레이더 기술로 간체 LC / MS / MS Bioanalytical 방법 개발 - 광고

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bioanalytical 분석의 개발은 MRM 방법의 개발뿐만 아니라 멀리 내생 배경 신호에서 관심의 analyte 피크의 위치를​​ 필요로하는 크로마 토그래피 방법을 필요로합니다. 레이더 ™ 기술과 Xevo TQ - S ™ 탠덤 quadrupole 질량 분석기는 크게 메서드 개발 프로세스를 단순화, 전체 스캔 및 MS / MS MRM 데이터의 동시 모음을 수 있습니다.

효과 bioanalysis 방법에 대해서는, 양도 재현성, 그리고 강력한해야합니다. 신뢰할 수있는 LC / MS / MS bioanalysis 분석의 발전은 철저한 샘플 준비 최적화, MS 감지하고, 크로마 토그래피 조건을 포함합니다. 이것은 종종 analyte의 봉우리 (S)가 이온 억제 및 분석 irreproducibility의 원인이 내생 매트릭스 구성 요소에서 확인할 수 필요, 시간이 소요되는 과정을 수 있습니다. 이것은 종종 여러 분석 실행이 필요한 MRM, 제품 이온, 및 전체 스캔 데이터를 취득해야합니다.

bioanalysis 방법 개발을 단순화하는 새로운 듀얼 스캔 데이터 수집 기능 - 여기서 설명하는 것은 레이더 Xevo TQ - S ™ 질량 분석기의 사용 ™ 기술입니다. Xevo TQ - S는 전체 검사와 MS MRM 데이터의 동시 수집을 허용 소설 충돌 셀 디자인을 사용합니다.

레이더 기술을 통해 I. 간체 LC / MS / MS Bioanalytical 방법 개발

1. 레이더 기술과 LC / MS / MS bioanalytical 방법 개발을 단순화 입증하기 위해 크로마 토그래피는 ACQUITY UPLC 다리를 에틸 하이브리드 C18 컬럼을 사용하여, 워터스의 ACQUITY UPLC ® 시스템에서 수행되었다.
   
   LC의 조건 :
   ACQUITY UPLC BEH C18 컬럼 2.1 X 50mm, 1.7 μm의
   모바일 단계 :
   1. 0.1 % 개미 산성 또는 0.1 % 수성 암모늄 수산화
   2. 메탄올 또는 acetonitrile
   
   그라데이션 : 600 μL / 분 유량에 0~2분 이상 유기 5~95%.
2. analytes는 0.1 % 수성 개미의 산성 또는 0.1 % 수성 암모늄 수산화은 메탄올 또는 acetonitrile 교환했습니다 이분을 통해 5~95% 유기 그라디언트와 600 μL / 분 유량에 eluted했다.
3. 질량 분석법의 검출은 워터스 Xevo 전체 스캔 데이터의 동시 수집과 긍정적인 이온 전기 분무 MRM 모드에서 운영 ™ TQ - S 질량 분석기에서 수행되었다.
   
   MS 조건 :
   긍정적인 이온 전기 분무 :
   MRM : 315> 129
   전체 검색 MS : 5000 AMU / 초에서 50~5백m / Z.
   제품 이온 스캔 : 200-600에서 M / Z = 184의 엽 성의 전구 물질
4. 레이더 기술의 사용을 설명하려면 일반 H2 수용체 길항제 ranitidine 염산염은 쥐의 플라즈마 치솟았어 acetonitrile (2:1)로 시켰던 및 UPLC / MS / MS 시스템을 사용하여 분석했다.

레이더 ™ 기술을 사용하여 II.Representative 결과 Bioanalysis

Chromatograms는 기본 수성 버퍼를 (그림 1)를 사용 얻은 chromatograms와 비교했다 종래의 산성 수성 버퍼와 acetonitrile 유기 수정자 그라데이션을 사용하여 획득하였습니다. 쥐 플라즈마에 ranitidine 하이드로 클로라이드의 LC / MS / MS 분석, 레이더 MRM 데이터는 산성 수성 수정자와 ranitidine이 색층 시스템의 무효와 eluting, unretained는 것을 보여줍니다. 그러나, 기본적인 수성 수정자를 고용하면, 화합물은 0.9 분 eluting, 유지됩니다. M /의 전체 스캔 부모 Z = 184 데이터는 모두 산성과 기본적인 분리와 analyte가 매트릭스의 인지질과 다른 내생 자료에서 해결되었는지 보여줍니다.

기본 수성 버퍼와 메탄올 유기 수정자의 사용은 1.30 분에 analyte 유지 증가했습니다. analyte 신호 응답도 4 (그림 2)의 요인에 의해 증가되었다. 그러나, 간단한 5-95% 기본 - 메탄올 기울기와 함께, 전체 스캔 데이터는 analyte 피크는 시료의 내생적인 소재와 함께 공동 eluted 것으로 나타났다. 이 공동 용출은 이온 억제 및 분석 irreproducibility가 발생할 수 있습니다.

내생 물질에서 analyte 피크를 해결하려면 그라데이션기구가 조정되었습니다. Xevo TQ - S 레이더 기능을 신속하게 최상의 처리량과 최고의 LC 조건을 선택하는 데 사용되었다. 최종 색층 조건 2-2.5 분 거리에 95 % 유기 세척 (그림 3) 이분 이상 15-60%의 메탄올의 그라디언트했다. analyte 피크 잘 녹색으로 전체 스캔 추적에서 볼 수로 샘플의 내생 물질에서 해결되었습니다. 이 접근법은 또한 마약 관련 metabolites, 공동 관리 치료 및 결과의 정확성에 영향을 미칠 수 매트릭스에 변화를 확인하기 위해 샘플 분석하는 동안 사용할 수 있습니다.

그림 1 : Chromatograms은 기본 수성 버퍼를 사용하여 얻은 chromatograms에 비해 기존의 산성 수성 버퍼와 acetonitrile 유기 수정자 그라데이션을 사용하여 획득하였습니다. 산성 수성 수정자와 ranitidine은 무효로 eluting, unretained입니다. 기본 수성 수정자를 고용하면 화합물은 0.9 분 eluting, 유지됩니다. M /의 전체 스캔 부모 Z = 184 데이터는 모두 산성과 기본적인 분리와 analyte가 매트릭스의 인지질과 다른 내생 자료에서 해결되었는지 보여줍니다.

그림 2 : 기본적인 수성 버퍼와 메탄올 유기 수정자의 사용은 1.30 분에 ranitidine 염산염 유지 증가했습니다. analyte 신호 응답도 4 배로 증가했다. 그러나, 전체 스캔 데이터는 analyte 정상 간단한 5-95% 기본 - 메탄올 기울기가 고용되는 예제에서 내생적인 소재와 함께 공동 eluted를 보여줍니다.

그림 3 : ranitidine 하이드로 클로라이드의 최종 색층 조건은 2-2.5 분 거리에 95 % 유기 세척과 이분 이상 15~60%의 메탄올의 그라데이션이 포함되어 있습니다. analyte 피크 잘 녹색으로 전체 스캔 추적에서 볼 수로 샘플의 내생 물질에서 해결되었습니다.

Bioanalytical 방법 개발이 크게 Xevo TQ - S 레이더 기술을 사용하여 간단 해집니다. 동시에 전체 검색 데이터뿐만 아니라 MS / MS 및 MRM 데이터를 수집할 수있는 능력은 내생 샘플 매트릭스가 촉진, analyte 피크 동시에 모니터링할 수 있습니다 :

• 빠른 방법 개발
• 배경 신호를 얻기 위해 반복 주사의 필요성을 제거
• 샘플 분석 중에 매트릭스 모니터링
• 간편한 문제 해결
• 사전 임상 및 임상 개발 중에 생체내의 metabolites의 탐지

이 문서의 저자는 워터스 주식 회사의 직원입니다.

Materials: 레이더 기술로 간체 LC / MS / MS Bioanalytical 방법 개발 - 광고

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