IonFlux: Автоматизированная система зажим патч с пластины Простота Reader - РЕКЛАМА

Sign in to register to receive emails with product information.

Ионные каналы играют важную роль в регуляции центральной нервной системе и физиологии нервов и мышц. В результате они были вовлечены в многочисленные условия, болезни, такие как диабет и эпилепсия, и являются ведущими целями новых лекарств. Метод патч зажим золотой стандарт для оценки активности ионных каналов в пробирке. При реализации в руководстве моды, анализ патч зажим ограничена примерно до 10 точек данных в день, что значительно ниже порога необходимого для значимого открытия и разработки лекарственных усилий. Платформа IonFlux использует собственные Ну пластины микрожидкостных технологии для автоматизации метода патч зажим в удобном и высокую пропускную способность и формата пластина, которая поставляется в двух конфигурациях масштабируемой для размещения широкого спектра приложений, включая как напряжения и лиганд-ионные каналы. IonFlux HT предназначен для высокопроизводительного скрининга в открытия и разработки лекарственных. Эта версия способна производить до 10000 точек данных в день. Для дополнительной пропускной способности, до четырех IonFlux HT системы могут быть выстроены вокруг одного робота перевалке жидких до 40000 точек данных в день. Низкая стоимость на каждую точку данных и минимальным использованием соединения делают IonFlux идеальным HT для скрининга препаратов, разработки лекарств, безопасности токсикологии, а также ионного канала исследований. IonFlux 16 представляет собой экономически эффективное решение для средних приложений, таких как пропускная способность клеточной линии развития, мутант скрининга и анализа развития. Впервые когда-либо, пользователи имеют доступ к истинным автоматизированная технология зажим патч на сопоставимые затраты на ручной установки зажим патч.

1. IonFlux Обзор системы

1. Система IonFlux состоит из настольного прибора, собственных микрожидкостных устройств в СБС-стандартный формат и пластинки, и полное приобретение и пакет программного обеспечения для анализа.
2. В отличие от других автоматизированных инструментов зажим патч, IonFlux читатель поддерживает очень небольшой размер которой тесно напоминает ридер. Он легко умещается на настольных, и располагает интеграции с широко используемые роботы лаборатории автоматизации, что позволяет IonFlux, чтобы соответствовать легко в существующий высокий скрининг рабочие процессы, а также научно-исследовательские лаборатории.
3. IonFlux использует ансамбль записи, это означает, что население 20 ячеек заделаны в каждой записи зоны, и их токов усредняются для получения одной точки данных. Такой подход дает высокий уровень успеха и минимизирует эффект клеточной изменчивости.
4. Каждый 384-луночного планшета может обрабатывать 256 уникальных соединений и производить 512 точек данных. 96-луночного планшета используется с IonFlux 16 процессов 64 соединений и производит 128 точек данных.
5. Имея возможность запуска экранов с высоким электрофизиологии пропускной открывает двери для широкого круга экспериментов ионного канала. Общие приложения включают в себя эксперименты с лигандом закрытых каналов, таких как ГАМК и никотиновые рецепторы, напряжения закрытого каналы, такие как натрий и калий каналы и безопасности токсикологии упором на калиевого канала hERG. Мутант и клеточной линии экраны могут быть выполнены. Кроме того, IonFlux позволяет анализировать функциональное выражение ионных каналов.

2. Устройства сбора данных и анализа

1. Система IonFlux поставляется с передовой программный комплекс для сбора данных и анализа. После того как программа загружена, пользователь увидит три основных экрана: установки, выполнения и анализа данных.
2. Режим настройки содержит все элементы управления, необходимые для определения эксперимента. В этом режиме эксперимента подготовлены, а все или половину пластины обозначен. Таблица используемых соединений также импортируемые в режиме настройки.
3. В экспериментальной вкладке Sequence, параметры задаются на четыре фазы эксперимента: премьер-ловушки, брейк, и сбора данных. Здесь напряжение протоколов определены.
4. Время режим показывает данные, как это собирается. В режиме реального времени развертки окно отображает токов, генерируемых в течение каждого импульса напряжения на каждый канал. Экспериментальные прогресс также сообщается.
5. Режим Анализ данных позволяет быстро обзор и анализ завершенных экспериментов. Инструменты предназначены для просмотра подметать и данные трассировки, а также для регистрации определенных событий, таких как соединения внедрения. Модуль Hit карта помогает выявить наиболее перспективных соединений в экран. Все данные могут быть легко экспортированы в формате. CSV для Excel и других приложений баз данных.

3. IonFlux Приложения - ГАМК-модуляторы

1. Разнообразные эксперименты и целевых экраны могут быть выполнены на IonFlux системы. Здесь пример продемонстрировал тест для модуляторов человека ГАМК-рецепторов, выраженное в НЕК293 от Millipore. Этот лиганд закрытого канала хлорида участвует в торможение ЦНС, таким образом, составляющих важную цель препарата при эпилепсии, тревоги и бессонницы.
2. Для проведения скрининга, сотовые ансамбли подвергались EC20 концентрации родной лигандом ГАМК, в присутствии возрастания концентрации веществ, которые связывают модулятор на аллостерических сайта на рецептор.
3. Графики показывают, кривых доза-реакция для двух положительных аллостерических модуляторы в бензодиазепина класса, а именно триазолам и диазепам, для которых EC50 значения 3 нм и 0,5 мкм были получены.
4. Модулятор-зависимый сдвиг в очевидной близости ГАМК тогда определяется кумулятивно применяя различные концентрации ГАМК в присутствии фиксированной концентрации модулятор, в данном случае, 3 мкМ диазепама.
5. Такого рода эксперимент включено по проточной жидкостный дизайна доступны в IonFlux инструментов. EC50 для ГАМК был перенесен примерно на 1 мкМ до более низкой концентрации из-за увеличения аффинности связывания в присутствии модулятора.

4. IonFlux применения - Блокаторы нейронов hNav1.8 натриевых каналов

1. IonFlux инструмент облегчает также других фармакологических экспериментов, в том числе пример, показанный здесь типичны для блокаторов нейронов hNav1.8 натриевых каналов, напряжения закрытого канала, участвующих в восприятии боли. В данном анализе Na ⁺ каналов, выраженная в НЕК293 был активирован ступеней напряжения зажим от -120 мВ до 0 мВ, применяемые в секунду.
2. Этот протокол, следовательно, обеспечивает информацию о тоник блок канала, так как канал снова вступает отдыхали состояние между depolarizatионов. Накопительное блокатор кривых доза-реакция проиллюстрированы на местные анестетики лидокаин и тетракаин, обеспечивая IC50 значения 320 мкм и 34 мкм соответственно.
3. На втором графике, лидокаин сродством к hNaV1.8 сравнивается, что для hNaV1.7, другого напряжения закрытого Na ⁺ каналов, участвующих в болевых ощущений. IC50 для hNaV 1,7 было установлено, что 3 мм, раскрывая десять раз ниже, близость, когда этот канал связывает лидокаин, по сравнению с hNaV1.8.

5. IonFlux Приложения - hERG Скрининг

1. IonFlux прибор может также использоваться для обеспечения безопасности фармакологии приложений, таких как скрининг hERG. Канал hERG калия был вовлечен в неблагоприятных сердечных событий, связанных с различными лекарств на рынке, что приводит к их снятия; и в настоящее время требуется, чтобы все соединения нового препарата пройти обследование на этом канале.
2. Blocker кривых доза-реакция проводились для характерная зависимость напряжения каналов hERG выражается в клетках СНО на три часто используемых ссылкой соединений, а именно: терфенадин, цизаприд и хинидин.
3. Графики показывают типичный текущий профиль, полученные при hERG каналы активируются двухимпульсного протокола, которая необходима из-за его быстрой скорости инактивации, как использованы для выявления токов hERG хвост. Графики показывают, активация напряжения зависимость и ректификации свойства текущего hERG записан в IonFlux инструмента.
4. Эти записи тесно повторить принято поведение канала представлены в литературе. Блокатор кривых доза-реакция выявить IC50 значения для трех ссылкой соединений 60 нм, 160 нм и 1 мМ.

Нет конфликта интересов объявлены.

0 Comments

You must be signed in to post a comment. Please sign in or create an account.