The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
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1Laboratory for Behavior and Dynamic Cognition, Brain Science Institute, RIKEN, 2Laboratory for Biolinguistics, Brain Science Institute, RIKEN
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Okumura, T., Okanoya, K., Tani, J. Application of Light-cured Dental Adhesive Resin for Mounting Electrodes or Microdialysis Probes in Chronic Experiments. J. Vis. Exp. (6), e249, doi:10.3791/249 (2007).
Schritt 1. Vorbereitung der Sonde Implantation
Schritt 2. Stereotaktische Positionierung
Schritt 3. Eine Vorbehandlung der Oberfläche der Schädelbasis
(Die ähnliche Vorgehensweise für "direkte Befüllung Wiederherstellung" der zahnärztlichen Produkt wird eingesetzt werden.)
Schritt 4. Montage Komposit
Reinigen Sie den OP-Bereich, gelten Antibiotikum (Gentamicin Salbe), und entfernen Sie das Tier aus der stereotaktischen Flamme. Dann halten die Tiere in einem thermo-kontrollierten Kammer (Temperatur = 33-35 ° C) für post-Aufwachraum.
Wie in dem Video zu sehen, wurde kein anormales Verhalten in einem der Tiere am nächsten Tag nach der Operation beobachtet.
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Im Vergleich zu der Anwendung der konventionellen Selbsthilfeeffekt Acrylharze, hat die Einführung Technik mehrere wichtige Vorteile:
1. Eine direkte Verbindung:
Selbst Akrylat kann bis auf die Knochen für eine Weile befestigt werden aber nicht bis auf die Knochen halten. Daher sind Verankerungsschrauben erforderlich, um eine Grundplatte fixieren (siehe Abbildung 2a). Im Gegensatz dazu kann Lichthärtung Kunstharzbindung bis auf die Knochen direkt so Schrauben sind nicht erforderlich (Abbildung 2B). Deshalb können Größe der Grundplatte erheblich reduziert werden. Darüber hinaus lichthärtenden Kunststoff hält auch einige Metalle, wenn Sie "Metall-Primer" verwendet mit ihm. Diese Funktion der Bindung an variable Materialien ermöglicht es uns, eine breite Palette von Anwendungen.
Abbildung 2 zeigt eine Implantation mit herkömmlichen Selbsthilfeeffekt Acryl (in 2A) und eine Implantation mit Hilfe von Licht härtende Klebstoff-Harzen (in 2B). In 2A wird der Anker Schraube verwendet werden, um die Montageplatte befestigen. In 2B, Größe der Grundplatte kann erheblich durch die Tatsache, dass lichthärtenden Harz zum Hinterhaupt und solche Schrauben halten reduziert werden sind nicht erforderlich. 
Abbildung 2
2. Leicht zu handhaben:
Konventionelle Harzes Verarbeitung Zeitfenster ist relativ kurz, innerhalb von wenigen Minuten. Es hat eine hohe Fließfähigkeit und es ist nicht leicht, auf den ersten Griff. Sobald jedoch chemische Reaktion gestartet, ist die Reaktion von exothermen Wärme beschleunigt und Harze schwieriger geworden, in kurzer Zeit. Die Verarbeitung Zeitfenster für lichthärtende Harz sind deutlich breiter und einstellbar. Grundsätzlich halten Harze konstante Elastizität von Anfang bis zu dem Moment, wenn es Licht ausgehärtet wird.
3. Reaktion keine Wärme:
Härtungsreaktion der Autopolymerisat ist exotherm. Wenn die Grundplatte dick ist, sammelt sich diese Wärme und können das Gewebe beschädigen. Reaktion von lichthärtenden Harz erzeugt keine Wärme und das Material ist biokompatibel.
4. Handgemachte LED-Licht:
Kosten des Materials und spezielle Ausrüstung wie Licht-Einheit kann ein Problem sein. In Abbildung 3 stellen wir eine handgefertigte LED-Einheit, die kostet nicht viel. Diese Hand-made Lichthärtegerät kann als Ersatz für teure kommerzielle eingesetzt werden.
3A zeigt ein Schaltbild Leuchteinheit. Abbildung 3B zeigt drei LEDs parallel miteinander verklebt, und in den Halter eines weißen Board-Marker. 
Abbildung 3 - Schaltbild (in A) und fotografieren (in B) eine Hand-made Leuchteinheit
Diese Technik ist für chronische Implantation von Elektroden oder Mikrodialysesonde in anderen Versuchstieren wie Fisch, Maus, Kaninchen, Katze und Affe.
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Die Experimente wurden in Übereinstimmung mit den Richtlinien für Tierversuche der Brain Science Institute, RIKEN (RIKEN-BSI) und des Instituts Tier Ethikkommission genehmigt ihnen unternommen.
Wir danken unseren Kollegen in RIKEN-BSI für die freundliche Unterstützung und fruchtbare Ratschläge bei dieser Arbeit. Ich möchte meinen aufrichtigen Dank Professor Shigemi Mori, Professor G bor Juh sz, Drs. auszudrücken. Kiyoji Matsuyama, Katalin AK kesi und rp d Dobolyi, die mich zu Mikrodialyse-Methode während der Diplom-Studium an der Graduate University for Advanced Studies, Japan-Studie beraten. Abschließend danken wir Herrn Chris Sarnecky und Dr. Akitsugu Takasu für ihre Unterstützung in Video-Aufzeichnung.
| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| Bengalese finches | Animal | Two adult male , Body weight: 14.2 g and 14.8 g | ||
| Microdialysis probe | Tool | EICOM | total weight of probe, guide cannula, cap nut and dental adhesive resin: 0.65 to 0.78 g. | |
| Light-cured dental adhesive resin system | Kuraray Medical Inc | +Light cured composite resin (CLEARFIL AP-X). +Dual-cure dental adhesive system with the self-etching primer and bonding agent (CLEARFIL Liner Bond IIΣ). | ||
| Surgical instruments | Stereotaxic frame, surgical microscope, thermal controlled surgical pad and thermal controlled recovery chamber. Plain plugger for handling composite resin. Microspatula or sharp curette to ablate periosteum and muscles.Injection syringe and needle (30G) for inducing anesthesia.Small scissors. Fine forceps for making small craniotomy. | |||
| Light-unit | Rolence Enterprise Inc | Ultra-Lite 500E | ||
| Microscope | Konan Medical | KOM300 | with C-mount adaptor | |
| 3- CCD camera | Tool | Hitachi | HV-D30 |
1. Adell A and Artigas F. In vivo Brain microdialysis: Principles and applications. In: Eds. Boulton A, Baker G and Bateson A. Neuromethods, Vol.32: In vivo Neuromethods. Totowa: Humana Press Inc, 1998: 325-57
2. Kendrick K. Microdialysis in large unrestrained animals: neuroendocrine and behavioral studies of acetylcholine, amino acid, monoamine and neuropeptide release in the sheep. In: Eds. Robinson T and Justice J. Techniques in the behavioral and neural sciences. Vol.7: Microdialysis in the Neuroscience. Amsterdam: Elsevier. 1991: 327-48
3. Oakley B and Schafer R. Experimental Neurobiology: A laboratory Manual. Ann Arbor: University of Michigan Press, 1978
4. Okumura T, Yamashita Y, Okanoya K and Tani J Function of the sensori-motor nucleus NIf in generation of complex syntactical song in the Bengalese Finch I. A Biological study. Soc. Neurosci Abst. 33. 2007, in press.
5. Vanderwolf C and Leung L. The relation of brain electrical activity to behavior. In: Eds. Boulton A, Baker G and Bateson A. Neruomethods, Vol.32: In vivo Neuromethods. Totowa: Humana Press Inc, 1998: 325-57
6. Yamashita Y, Okumura T, Okanoya K and Tani J. Function of the sensori-motor nucleus NIf in generation of complex syntactical song in the Bengalese finch. Proceeding of the 2nd International Symposium on Mobiligence. 2007: 101-104.
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ReplyPosted by: AnaOctober 13, 2009, 3:13 PM