The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
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1Laboratory for Behavior and Dynamic Cognition, Brain Science Institute, RIKEN, 2Laboratory for Biolinguistics, Brain Science Institute, RIKEN
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Okumura, T., Okanoya, K., Tani, J. Application of Light-cured Dental Adhesive Resin for Mounting Electrodes or Microdialysis Probes in Chronic Experiments. J. Vis. Exp. (6), e249, doi:10.3791/249 (2007).
Etapa 1. Preparação de implantação da sonda
Etapa 2. Posicionamento estereotáxica
Etapa 3. Pré-tratamento da superfície craniana
(O procedimento semelhante para "restauração direta enchimento" do produto dental deve ser empregada.)
Etapa 4. Montagem de resina composta
Limpar a área cirúrgica, aplicar antibiótico (gentamicina pomada), e remover o animal da chama estereotáxica. Então, manter o animal em uma câmara de termo-controlada (temperatura = 33-35 ° C) para recuperação pós-anestésica.
Conforme mostrado no vídeo, nem qualquer comportamento anormal foi observado em nenhum dos animais no dia seguinte após a cirurgia.
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Em comparação com a aplicação de resinas acrílicas convencionais auto cura, a técnica introduzida tem várias vantagens importantes:
1. Ligação direta:
Acrílica auto-cura pode ser conectado ao osso por um tempo mas não adere ao osso. Portanto, os parafusos de fixação são necessários para corrigir uma base de montagem (ver Figura 2a). Em contraste, a resina de cura pela luz pode vínculo até o osso diretamente de modo parafusos não são necessários (Figura 2B). Portanto, o tamanho da base de montagem pode ser reduzido consideravelmente. Além disso, as resinas de cura pela luz também adere a alguns metais, se você usou "primer metal" com ele. Esta característica da ligação a materiais variável permite uma ampla gama de aplicação.
A Figura 2 mostra uma implantação usando acrílicos auto convencionais de cura (em 2A) e um implante com luz resinas adesivas de cura (no 2B). Em 2A, o parafuso de âncora é utilizada para fixar a base de montagem. Em 2B, o tamanho da base de montagem pode ser reduzida consideravelmente devido ao fato de que a resina de cura pela luz aderem ao crânio e parafusos como não são necessários. 
Figura 2
2. Fácil de manusear:
Janela de resina convencional o tempo de processamento é relativamente curto, em poucos minutos. Ele tem uma alta fluidez e não é fácil de manusear à primeira vista. Entretanto, uma vez iniciados reação química, a reação é acelerada pelo calor exotérmica e resinas se tornam mais difíceis em pouco tempo. As janelas de tempo de processamento para resina de fotopolimerização são significativamente mais larga e ajustável. Basicamente, as resinas manter elasticidade constante desde o início até o momento em que é fotopolimerizado.
3. Reação não gera calor:
Ea reação de cura da resina autopolimerizável é exotérmica. Quando a base de montagem é de espessura, este calor acumula e pode danificar o tecido. Reação da resina de cura pela luz não gera calor eo material é biocompatível.
4. Feitas à mão luz LED:
Custo do material e equipamentos especiais, como unidade de luz pode ser um problema. Na Figura 3, apresentamos uma mão feita LED unidade de luz que não custa muito. Esta mão-made unidade de fotoativação podem ser usados como substitutos para a unidade comercial caro.
Figura 3A mostra um diagrama de circuito da unidade de luz. Figura 3B mostra três LEDs colados paralelos uns aos outros, e inserido no suporte de um marcador quadro branco. 
Figura 3 - Diagrama do circuito (em A) e fotografia (em B) de uma unidade hand-made de luz
Esta técnica é aplicável a implantes de eletrodos crônica ou sonda de microdiálise em outros animais de experimentação, tais como peixes, mouse, coelho, gato e macaco.
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Experimentos foram realizados em conformidade com as orientações para a experimentação animal do cérebro Science Institute, RIKEN (RIKEN-BSI) e animal do instituto comitê de ética aprovado.
Agradecemos aos nossos colegas em RIKEN-BSI para os seus apoios e conselhos gentilmente frutífera durante este trabalho. Eu gostaria de expressar minha sincera gratidão ao Professor Shigemi Mori, Professor G bor Juh sz, os drs. Kiyoji Matsuyama, Katalin AK kesi e rp d Dobolyi que me aconselhou a estudar o método de microdiálise durante o curso de pós-graduação na Universidade de Pós-Graduação de Estudos Avançados, Japão. Finalmente, agradecemos o Sr. Dr. Chris Sarnecky e Akitsugu Takasu para os seus apoios em gravação de vídeo.
| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| Bengalese finches | Animal | Two adult male , Body weight: 14.2 g and 14.8 g | ||
| Microdialysis probe | Tool | EICOM | total weight of probe, guide cannula, cap nut and dental adhesive resin: 0.65 to 0.78 g. | |
| Light-cured dental adhesive resin system | Kuraray Medical Inc | +Light cured composite resin (CLEARFIL AP-X). +Dual-cure dental adhesive system with the self-etching primer and bonding agent (CLEARFIL Liner Bond IIΣ). | ||
| Surgical instruments | Stereotaxic frame, surgical microscope, thermal controlled surgical pad and thermal controlled recovery chamber. Plain plugger for handling composite resin. Microspatula or sharp curette to ablate periosteum and muscles.Injection syringe and needle (30G) for inducing anesthesia.Small scissors. Fine forceps for making small craniotomy. | |||
| Light-unit | Rolence Enterprise Inc | Ultra-Lite 500E | ||
| Microscope | Konan Medical | KOM300 | with C-mount adaptor | |
| 3- CCD camera | Tool | Hitachi | HV-D30 |
1. Adell A and Artigas F. In vivo Brain microdialysis: Principles and applications. In: Eds. Boulton A, Baker G and Bateson A. Neuromethods, Vol.32: In vivo Neuromethods. Totowa: Humana Press Inc, 1998: 325-57
2. Kendrick K. Microdialysis in large unrestrained animals: neuroendocrine and behavioral studies of acetylcholine, amino acid, monoamine and neuropeptide release in the sheep. In: Eds. Robinson T and Justice J. Techniques in the behavioral and neural sciences. Vol.7: Microdialysis in the Neuroscience. Amsterdam: Elsevier. 1991: 327-48
3. Oakley B and Schafer R. Experimental Neurobiology: A laboratory Manual. Ann Arbor: University of Michigan Press, 1978
4. Okumura T, Yamashita Y, Okanoya K and Tani J Function of the sensori-motor nucleus NIf in generation of complex syntactical song in the Bengalese Finch I. A Biological study. Soc. Neurosci Abst. 33. 2007, in press.
5. Vanderwolf C and Leung L. The relation of brain electrical activity to behavior. In: Eds. Boulton A, Baker G and Bateson A. Neruomethods, Vol.32: In vivo Neuromethods. Totowa: Humana Press Inc, 1998: 325-57
6. Yamashita Y, Okumura T, Okanoya K and Tani J. Function of the sensori-motor nucleus NIf in generation of complex syntactical song in the Bengalese finch. Proceeding of the 2nd International Symposium on Mobiligence. 2007: 101-104.
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ReplyPosted by: AnaOctober 13, 2009, 3:13 PM