The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
Authors
The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
This translation into Dutch was automatically generated through Google Translate.
English Version | Other Languages
Department of Physiology and Biophysics, University of California, Irvine (UCI)
This article is a part of JoVE General. If you think this article would be useful for your research, please recommend JoVE to your institution's librarian.
Recommend JoVE to Your LibrarianCurrent Access Through Your IP Address
You do not have access to any JoVE content through your current IP address.
IP: 50.17.109.248, User IP: 50.17.109.248, User IP Hex: 840003064
Current Access Through Your Registered Email Address
You aren't signed into JoVE. If your institution subscribes to JoVE, please sign in or create an account with your institutional email address to access this content.
Froger, A., Hall, J. E. Transformation of Plasmid DNA into E. coli Using the Heat Shock Method. J. Vis. Exp. (6), e253, doi:10.3791/253 (2007).
Transformatie van plasmide DNA in E. coli met behulp van de heat shock-methode is een basistechniek van de moleculaire biologie. Het bestaat uit het plaatsen van een buitenlandse plasmide of ligatieproduct in bacteriën. Deze video protocol beschrijft de traditionele methode van transformatie met behulp van commercieel verkrijgbare chemisch bevoegde bacteriën van Genlantis. Na een korte incubatie in ijs, is een mengsel van chemisch bevoegde bacteriën en DNA geplaatst bij 42 ° C gedurende 45 seconden (heat shock) en dan weer terug geplaatst in ijs. SOC media is toegevoegd en de getransformeerde cellen worden geïncubeerd bij 37 ° C gedurende 30 min met agitatie. Worden verzekerd van het isoleren van kolonies onafhankelijk van transformatie-efficiëntie, zijn twee grootheden van de getransformeerde bacteriën verguld. Deze traditionele protocol met succes kan worden gebruikt om de meeste commercieel beschikbare bevoegde bacteriën te transformeren. De turbocells van Genlantis kan ook gebruikt worden in een nieuwe 3-minuten transformatie protocol, beschreven in de handleiding.
1
ReplyPosted by: AnonymousFebruary 1, 2008, 7:57 PM