JoVE   
You do not have subscription access to articles in this section. Learn more about access.

  JoVE Biology

  
You do not have subscription access to articles in this section. Learn more about access.

  JoVE Neuroscience

  
You do not have subscription access to articles in this section. Learn more about access.

  JoVE Immunology and Infection

  
You do not have subscription access to articles in this section. Learn more about access.

  JoVE Clinical and Translational Medicine

  
You do not have subscription access to articles in this section. Learn more about access.

  JoVE Bioengineering

  
You do not have subscription access to articles in this section. Learn more about access.

  JoVE Applied Physics

  
You do not have subscription access to articles in this section. Learn more about access.

  JoVE Chemistry

  
You do not have subscription access to articles in this section. Learn more about access.

  JoVE Behavior

  
You do not have subscription access to articles in this section. Learn more about access.

  JoVE Environment

|   

JoVE Science Education

General Laboratory Techniques

You do not have subscription access to videos in this collection. Learn more about access.

Basic Methods in Cellular and Molecular Biology

You do not have subscription access to videos in this collection. Learn more about access.

Model Organisms I

You do not have subscription access to videos in this collection. Learn more about access.

Model Organisms II

You have trial access to videos in this collection until May 31, 2014.

Automatic Translation

This translation into Hindi was automatically generated through Google Translate.
English Version | Other Languages

 JoVE Clinical and Translational Medicine

Vivo कुत्ते बलवान फंक्शन परख

1, 2, 3

1Department of Neurology and Wake Forest Institute for Regenerative Medicine, Wake Forest University, 2Department of Human Nutrition, Foods and Exercise, Virginia Polytechnic Institute and State University, 3Departments of Pathology and Laboratory Medicine and Neurology and the Gene Therapy Center , University of North Carolina-Chapel Hill

Article
    Downloads Comments Metrics
     

    Summary

    हम कुत्ते hindlimb मांसपेशियों की ताकत और मांसपेशियों दोहराया सनकी संकुचन के लिए प्रतिक्रिया को मापने के लिए एक न्यूनतम इनवेसिव और पीड़ारहित विधि का वर्णन.

    Date Published: 4/05/2011, Issue 50; doi: 10.3791/2623

    Cite this Article

    Childers, M. K., Grange, R. W., Kornegay, J. N. In Vivo Canine Muscle Function Assay. J. Vis. Exp. (50), e2623, doi:10.3791/2623 (2011).

    Abstract

    हम कुत्ते पैल्विक अंग मांसपेशियों की ताकत और मांसपेशियों दोहराया सनकी संकुचन के लिए प्रतिक्रिया को मापने के लिए एक न्यूनतम इनवेसिव और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य विधि का वर्णन. एक anesthetized कुत्ते के पैल्विक अंग stereotactic जांध की हड्डी के लिए एक सही कोण पर टिबिया संरेखित फ्रेम में स्थिर है. चिपकने वाला लपेटो एक टोक़ को मापने servomotor के शाफ्ट पर घुड़सवार पेडल के लिए पंजा affixes. Percutaneous तंत्रिका उत्तेजना isometric टोक़ उत्पन्न करने के लिए पेडल के खिलाफ या तो (विस्तार) या धक्का खींच (फ्लेक्स) पंजा के पैल्विक अंग की मांसपेशियों को सक्रिय. Percutaneous tibial तंत्रिका उत्तेजना tibiotarsal extensor मांसपेशियों को सक्रिय करता है. दोहराया सनकी संकुचन (लंबी) tibiotarsal flexor मांसपेशियों में percutaneous peroneal तंत्रिका उत्तेजना से प्रेरित कर रहे हैं. सनकी प्रोटोकॉल servomotor द्वारा लगाए गए एक मजबूर मायने बाद एक प्रारंभिक isometric संकुचन के होते हैं. रोटेशन प्रभावी ढंग से मांसपेशियों lengthens जबकि यह अनुबंध, जैसे, एक सनकी संकुचन. उत्तेजना के दौरान flexor मांसपेशियों एक 800 मिसे isometric और 200 मिसे सनकी संकुचन के अधीन हैं. यह प्रक्रिया हर 5 सेकंड दोहराया है. थकान से बचने, 4 मिनट बाकी 30 प्रदर्शन संकुचन की एक कुल के साथ इस प्रकार हर 10 संकुचन.

    Protocol

    1. प्रयोग के लिए स्थापना

    1. लोड गतिशील बलवान नियंत्रण सॉफ्टवेयर (डीएमसी).
    2. फिजियोलॉजी रिग निम्नलिखित निर्माता के निर्देशों के ऊपर शक्ति.
    3. रनिंग DMC सॉफ्टवेयर:

    यह माना जाता है कि हार्डवेयर कि DMC सॉफ्टवेयर चलाता है कंप्यूटर से जुड़ा है, और है कि प्रणाली calibrated है. सॉफ्टवेयर समय समय पर से संशोधित किया जा सकता है, इसलिए नीचे दिए गए निर्देशों का मौजूदा सॉफ्टवेयर संस्करण है कि हम का उपयोग करने के लिए प्रासंगिक प्रदान की जाती हैं. जब सॉफ्टवेयर खोला है, यह पहले से ही चल रहा है.

    उपयोगकर्ता शुरू DMC में एक प्रोटोकॉल (उदाहरण के लिए, 1.5 एस के लिए 50 हर्ट्ज पर प्रोत्साहित करने के लिए एक isometric टिटनेस का उत्पादन) लिख सकते हैं और प्रोटोकॉल तो बाद में उपयोग के लिए सहेजा जा सकता है. , और (2) सनकी खिंचाव चोट प्रोटोकॉल (1) isometric संकुचन प्रोटोकॉल (जैसे, चिकोटी, या टिटनेस): हम दो मानक प्रोटोकॉल का उपयोग करें. हम चिकोटी के लिए isometric संकुचन प्रोटोकॉल के साथ शुरू करते हैं. चिकोटी का अनुकूलन करने के लिए, मॉनिटर आउटपुट स्क्रीन प्रयोग किया जाता है, चिकोटी के दौरान उत्पन्न टोक़ के रूप में इलेक्ट्रोड को स्थानांतरित कर रहे हैं मनाया जा सकता है. जब अधिकतम चिकोटी प्रतिक्रिया हासिल की है, मुख्य स्क्रीन (जारी रखें का चयन करें) के लिए लौटने और शुरू और ठीक है का चयन करके डेटा एकत्र कर रहे हैं . फ़ाइलें पॉप अप विंडो के रूप में सहेजें से बच रहे हैं . उसी स्थिति में बनाए रखा इलेक्ट्रोड के साथ, एक टिटनेस (50 हर्ट्ज) और फिर एकत्र किया जाता है बचाया. जब सब isometric संकुचन को पूरा कर रहे हैं, सनकी प्रोटोकॉल खिंचाव चोट और लोड किया जा सकता है चलाने के. क्योंकि वहाँ संकुचन की एक श्रृंखला के लिए इस प्रोटोकॉल में निष्पादित किया जाना (10 संकुचन), मुख्य स्क्रीन पर चलाएँ एक बटन प्रकट करने के लिए सभी स्थिति भागो चयनित हैं. अब जब शुरू करें चयनित है, एक भागो सभी प्रोटोकॉल पॉप अप विंडो प्रकट होता है कि रूट फ़ाइल नाम और निर्देशिका में जो फ़ाइलों को बचाया जा रहे हैं के लिए पूछता है. फिर, प्रोटोकॉल सीरीज टेस्ट प्रारंभ और पूर्ण सनकी प्रोटोकॉल आरंभ करने के लिए चयन कर रहे हैं. फ़ाइलों को स्वचालित रूप से चयनित निर्देशिका में सहेजी जाती हैं.

    2. फिजियोलॉजी रिग में पशु पोजिशनिंग

    1. पशु देखभाल और उपयोग समिति दिशानिर्देशों (ACUC) सभी जानवरों को शामिल प्रक्रियाओं के लिए पालन किया जाना चाहिए.
    2. कुत्ते anesthetize साँस लेना संज्ञाहरण का उपयोग (जैसे isoflurane) अनुमोदित प्रोटोकॉल के अनुसार. जाँच करें झपकी पलटा लगता है कि जानवर गहरा anesthetized है. सीओ 2 की निगरानी, ​​नाड़ी oximetry और तापमान बारीकी से पूरी प्रक्रिया के दौरान निगरानी की जानी चाहिए . हम आम तौर पर शामिल होने के लिए साँस लेना संज्ञाहरण के लिए sevoflurane द्वारा पीछा propofol का उपयोग करें.
    3. दबाना पार्श्व (घुटने) (यानी, 2-3 सेमी अधिक trochanter बाहर का fibular सिर पर अंग शुरुआत के पार्श्व पहलू जहां उत्तेजक इलेक्ट्रोड रखा जाएगा के आसपास बाल दाढ़ी.
    4. फिजियोलॉजी मेज पर पैल्विक अंग इतना स्थिति है कि जांध की हड्डी और टिबिअ एक सही कोण बनाने, और टिबिअ के साथ पृष्ठीय लेटना में स्थिति कुत्ते tabletop के समानांतर है. या तो सही है या छोड़ दिया अंग का परीक्षण किया जा सकता है.
    5. पहले कुत्ता पंजा संलग्न करने के लिए पेडल बल की जांच के लिए बीमा है कि बल पेडल स्पष्ट और सुरक्षित करने के लिए बारी बारी से है. फिजियोलॉजी रिग के लिए प्रक्रिया पर शक्ति और पेडल सक्रिय पालन करें. नोट: बल पेडल "कठोर" हो सकता है जब उपयोगकर्ता इसे मैन्युअल रूप से बढ़ने का प्रयास करना चाहिए.
    6. धीरे पैर पेडल में कुत्ते का पंजा आराम, उपाय और रोटेशन के केंद्र अक्ष से पार्श्व अंक के अंत के लिए कुत्ते को पंजा की लंबाई रिकॉर्ड.
    7. पैर पेडल का उपयोग लोचदार लपेटो आत्म - पालन में पंजा सुरक्षित.

    3. Isometric चिकोटी टोक़ (tibiotarsal बल)

    1. एक सुरक्षा जाँच के बाद, 24 गेज उत्तेजक इलेक्ट्रोड उत्तेजना अलगाव इकाई (एसआईयू) बाँझ परिरक्षित monopolar कनेक्ट.
    2. उत्तेजक औधधि सेट करने के लिए: लगातार पल्स 1 हर्ट्ज प्रति सेकंड (1 नाड़ी) में उत्पादन
    3. सॉफ्टवेयर सेटिंग्स: isometric संकुचन प्रोटोकॉल (मुख्य स्क्रीन चुनें लोड प्रोटोकॉल पर) लोड. भागो एक बटन दिखाई बटन शुरू करने के लिए अगले किया जाना चाहिए. यह सुनिश्चित करता है प्रोटोकॉल केवल एक बार चलाया जाता है.
    4. Gloved हाथों के साथ, शराब के साथ त्वचा को साफ है, और आम peroneal तंत्रिका सिर्फ पार्श्व प्रॉक्सिमल fibula के लिए बाहर का टटोलना. एक तंत्रिका के क्षेत्र अंकन उंगली के साथ, ध्यान से त्वचा के नीचे कैथोड इलेक्ट्रोड (काला) सम्मिलित करते हैं और बस periosteum के लिए बाह्य. इलेक्ट्रोड 2cm के बारे में गहराई में त्वचा की सतह के समानांतर रखा जाना चाहिए, चलती है जब हाथ हटा दिया जाता है से इलेक्ट्रोड को रोकने के लिए पर्याप्त है.
    5. त्वचा समानांतर, और थोड़ा कैथोड इलेक्ट्रोड के लिए बाहर का के तहत anode इलेक्ट्रोड (लाल) रखें. दोनों इलेक्ट्रोड अब आम peroneal तंत्रिका सिर्फ fibular सिर को बाहर का आंतरिक होना चाहिए.
    6. Stimula सक्रिय1 हर्ट्ज पर टो. मॉनिटर पर चिकोटी प्रतिक्रियाओं निरीक्षण. सबसे बड़ा चिकोटी आयाम संभव प्राप्त इलेक्ट्रोड स्थिति में छोटे समायोजन करें. इलेक्ट्रोड पूरी तरह से हो सकता है और हटाया जाना चाहिए तीन से चार साढ़े सेमी टिबिअ के लिए समानांतर वेतन वृद्धि के लिए सबसे बड़ा चिकोटी प्रतिक्रिया मिल में बदल दिया. इस प्रक्रिया का एक महत्वपूर्ण घटक है और महान देखभाल करने के लिए सबसे बड़ी प्रतिक्रिया मिल लिया जाना चाहिए.
    7. मॉनिटर आउटपुट स्क्रीन (जारी रखें का चयन करें) निकल कर चिकोटी प्रतिक्रियाओं को रिकार्ड करने के लिए, तो चयन करने के लिए शुरू और डेटा इकट्ठा किया. पॉप अप विंडो के रूप में सहेजें में वांछित फ़ाइल नाम के साथ फ़ाइल सहेजें. उत्तेजक औधधि मुड़ें.

    4. Isometric धनुस्तंभीय टोक़ (tibiotarsal घुमाव)

    1. चलती इलेक्ट्रोड के बिना, 1.5 सेकंड के लिए 50 हर्ट्ज के लिए उत्तेजक औधधि सेटिंग्स को बदलने के लिए और बाहरी ट्रिगर समारोह सक्षम. यह उत्तेजक औधधि सॉफ्टवेयर के द्वारा सक्रिय करने के लिए अनुमति देता है.
    2. सॉफ्टवेयर सेटिंग्स: एक ही isometric संकुचन प्रोटोकॉल चिकोटी के लिए के रूप में धनुस्तंभीय प्रतिक्रिया लेने के लिए इस्तेमाल किया है. मान लिया जाये कि उत्तेजक इलेक्ट्रोड स्थानांतरित नहीं किया गया है, और पूर्ण शुरू टिटनेस का उत्पादन करने के लिए चयनित हैं. Isometric करने के लिए एक टिटनेस का उत्पादन प्रोटोकॉल में, उत्तेजक औधधि सॉफ्टवेयर सही समय को बनाए रखने से शुरू हो रहा है. पॉप अप विंडो के रूप में सहेजें में धनुस्तंभीय प्रतिक्रिया सहेजें .

    5. सनकी प्रोटोकॉल

    1. चलती इलेक्ट्रोड के बिना, उत्तेजक औधधि सेटिंग्स बदलने के लिए: 1 सेकंड (100V) के लिए 50 हर्ट्ज, और बाहरी ट्रिगर समारोह सक्षम. यह उत्तेजक औधधि सॉफ्टवेयर के द्वारा सक्रिय करने के लिए अनुमति देता है.
    2. सॉफ्टवेयर सेटिंग्स: सनकी खिंचाव चोट प्रोटोकॉल, servomotor के लिए एक कमांड के लिए 29 डिग्री (30 डिग्री के अधिकतम) बारी बारी से लोड करें. सभी चलाएँ का चयन करें. शुरू का चयन करें; फ़ाइलों के सनकी श्रृंखला के लिए मूल फ़ाइल नाम और फ़ोल्डर जिसमें वे बचाया जा रहे हैं दर्ज करें. प्रोटोकॉल सीरीज टेस्ट प्रारंभ का चयन करें, और तब प्रोटोकॉल आरंभ किया.
    3. इस प्रोटोकॉल में उत्तेजक औधधि सही समय को बनाए रखने के लिए सॉफ्टवेयर के द्वारा ट्रिगर किया जाना निर्धारित है. प्रत्येक सनकी संकुचन प्रतिक्रिया के रूप में स्क्रीन पर प्रकट होता है, यह स्वचालित रूप से सहेजा गया है.
    4. एक चार मिनट बाकी अवधि दस सनकी संकुचन की प्रत्येक सेट के बाद.
    5. 30 सनकी संकुचन (प्रत्येक एक चार मिनट बाकी अवधि के द्वारा अलग सेट दस संकुचन की तीन सेट) के कुल लीजिए.

    6. Isometric चिकोटी टोक़ (tibiotarsal एक्सटेंशन)

    1. चिकोटी प्रोटोकॉल ऊपर दोहराएँ, लेकिन जगह इलेक्ट्रोड त्वचा और बल प्रोटोकॉल के लिए मूल इलेक्ट्रोड प्लेसमेंट प्रॉक्सिमल को सीधा. tibial तंत्रिका उत्तेजित है gastrocnemious मांसपेशी पेट के भीतर यह caudally और distally पाठ्यक्रम के रूप में. उत्तेजक बनती और संदर्भ इलेक्ट्रोड गहरी मांसलता दुम के भीतर रखा जाता है और बस दबाना करने के लिए समीपस्थ. नियुक्ति की अनुमानित बिंदु एक पंक्ति है कि दबाना (घुटने) द्वारा गठित 90o कोण bisects के साथ है. क्योंकि tibial तंत्रिका आम peroneal तंत्रिका गहरी (और दुम) झूठ, इलेक्ट्रोड को कई क्षेत्रों में रखा जा इष्टतम चिकोटी क्षमता को प्रकाश में लाना चाहिए. इस प्रक्रिया का एक महत्वपूर्ण घटक है. नोट: tibiotarsal चिकोटी और tetany के लिए टोक़ tracings tibiotarsal बल tracings के सापेक्ष औंधा दिखाई देगा.

    7. Isometric धनुस्तंभीय टोक़ (tibiotarsal एक्सटेंशन)

    1. चलती इलेक्ट्रोड के बिना, 1.5 सेकंड के लिए 50 हर्ट्ज के लिए उत्तेजक औधधि सेटिंग्स को बदलने के लिए और बाहरी ट्रिगर समारोह सक्षम. यह उत्तेजक औधधि सॉफ्टवेयर के द्वारा सक्रिय करने के लिए अनुमति देता है.
    2. सॉफ्टवेयर सेटिंग्स करने के लिए: 1.5 सेकंड के लिए 50 हर्ट्ज और बाहरी ट्रिगर समारोह सक्षम. यह उत्तेजक औधधि सॉफ्टवेयर के द्वारा सक्रिय करने के लिए अनुमति देता है.
    3. सॉफ्टवेयर सेटिंग्स: एक ही isometric संकुचन प्रोटोकॉल चिकोटी के लिए के रूप में टिटनेस के लिए प्रयोग किया जाता है . मान लिया जाये कि उत्तेजक इलेक्ट्रोड स्थानांतरित नहीं किया गया है, और पूर्ण शुरू टिटनेस का उत्पादन करने के लिए चयनित हैं.
    4. Isometric करने के लिए एक टिटनेस का उत्पादन प्रोटोकॉल में, उत्तेजक औधधि सॉफ्टवेयर सही समय को बनाए रखने से शुरू हो रहा है. पॉप में धनुस्तंभीय प्रतिक्रिया अप फ़ाइल खिड़की सहेजें सहेजें.

    8. डेटा विश्लेषण

    1. गतिशील मांसपेशी विश्लेषण (डीएमए) कार्यक्रम (अरोड़ा वैज्ञानिक) टोक़ और लौकिक चिकोटी, धनुस्तंभीय और सनकी संकुचन से एकत्र जानकारी प्राप्त करने के लिए प्रयोग किया जाता है.
    2. डीएमए कार्यक्रम चल रहा है: सॉफ्टवेयर समय समय पर से संशोधित किया जा सकता है, इसलिए निर्देश के नीचे प्रदान की जाती हैं मौजूदा सॉफ्टवेयर संस्करण है कि हम का उपयोग करने के लिए प्रासंगिक है. जब डीएमए सॉफ्टवेयर यह नहीं चल रहा है खोला है. कार्यक्रम को सक्रिय करने के लिए, ऊपरी बाएँ कोने में सफेद तीर बटन का चयन करें. डीएमए सॉफ्टवेयर कार्यों की एक संख्या है, लेकिन हमारे उद्देश्य के लिएहै, केवल कुछ प्रासंगिक कार्यों वर्णित किया जाएगा.
      एक विश्लेषण के लिए फ़ाइल लोड? पुनः लोड हाल ही में डेटा फ़ाइल या नई डेटा फ़ाइल पॉप अप विंडो प्रकट होता है जब डीएमए कार्यक्रम शुरू कर दिया है. नई का चयन करें; अगले विंडो का चयन करें Labview में, अगली विंडो में, उपयुक्त फ़ोल्डर और फ़ाइल का चयन करें, खोलें का चयन करें. इस विंडो को दूर करने के लिए फ़िल्टर प्लॉट निकालें चुनें. कट - आवृत्ति बंद बॉक्स में एक फिल्टर आवृत्ति दर्ज करें. इष्टतम फिल्टर आवृत्ति विशिष्ट मूल्यांकन किया डेटा के आधार पर निर्धारित होगा. एक उदाहरण के रूप में, हम हमारे isometric प्रतिक्रियाओं और सनकी प्रतिक्रिया के लिए 10 हर्ट्ज के लिए 30 हर्ट्ज का उपयोग करें. का प्रयोग करें डेटा फ़िल्टर बटन का चयन करें. प्लॉट डेटा चुनें के तहत, छनित फोर्स का चयन करें. नीचे में दो स्लाइड सलाखों का उपयोग प्रदर्शित करने का विस्तार करने के लिए और फ़ाइल के माध्यम से कदम.
    3. चिकोटी (चित्र 1) विश्लेषण: मान लिया जाये कि फ़ाइल लोड है और उपरोक्त कदम पूरा कर रहे हैं, कर्सर की स्थिति सेट वहाँ 3 कर्सर हैं: (1) नीले, (2) पीले और (3) सफेद. Isometric twitches और tetani या अन्य isometric संकुचन के लिए, नीले रंग के बिंदु जहां टोक़ आराम टोक़ से उगता है पर सेट कर दिया जाता है, पीले जहां टोक़ आराम टोक़ (यानी, विश्राम चरण के बाद) के लिए रिटर्न रखा गया है, सफेद करने के लिए रखा गया है पीले कर्सर (नहीं) की जरूरत के अधिकार. कर्सर को बाईं माउस पर उदास और अपने इच्छित स्थान पर चयनित कर्सर खींच बटन के साथ आसानी से स्थानांतरित कर रहे हैं.
      प्रदर्शन विश्लेषण: जब कर्सर को तैनात कर रहे हैं, क्या बलवान विश्लेषण का चयन करें, तब परिणाम दिखाएँ. पर विश्लेषण बलवान डेटा परिणाम विंडो पॉप अप, चर के एक नंबर अधिकतम फोर्स के रूप में प्रदर्शित कर रहे हैं, आधारभूत सेना, साढ़े विश्राम का समय, आदि डेटा टोक़ प्रतिक्रिया है कि एक कर्सर (नीला) और 2 (पीला के बीच स्थित है के लिए प्रस्तुत कर रहे हैं ). इन चर या विशिष्ट चर के सभी एक डेटा फ़ाइल के लिए लॉग इन किया जा सकता है, तथापि, कि प्रक्रिया के साथ साथ वर्णित नहीं है. यदि कोई डेटा लॉग सेट नहीं है, डेटा को हाथ से दर्ज करना होगा. मुख्य स्क्रीन पर लौटने के विंडो बंद करें का चयन करें. बाहर निकलें कार्यक्रम का चयन करें डीएमए करीब है, और फिर सफेद करने के लिए एक नई फ़ाइल का विश्लेषण शुरू तीर का चयन करें.
    4. Tetany (चित्र 2) विश्लेषण: एक ही कदम के रूप में चिकोटी के लिए ऊपर वर्णित.
    5. सनकी (चित्र 3) विश्लेषण: सनकी विश्लेषण और अधिक कदम स्थापित करने के लिए की आवश्यकता है और सभी 3 कर्सर का उपयोग करता है. यदि सनकी टोक़ प्रतिक्रिया नकारात्मक है (यानी, टोक़ tracings नीचे की दिशा में दिखाई देते हैं) है, यह संदर्भ क्षेत्र में (वर्ग सेमी) बॉक्स (टोक़ मूल्यों अपरिवर्तित रहे हैं) -1 दर्ज करके उलटा जा सकता है और सामान्य मत का चयन करें; बटन इंगित करने के लिए डेटा सामान्यीकृत किया गया है (इस मामले में उलटा) पराजयों. आवृत्ति के बाहर वांछित कट (उदाहरण के लिए, 10 हर्ट्ज) दर्ज करें और चुनें अनफ़िल्टर्ड डेटा फ़िल्टर डेटा का उपयोग करने के लिए बटन रिवर्स, अब फ़िल्टर्ड डेटा विश्लेषण के लिए इस्तेमाल किया जाएगा का उपयोग करें. स्थिति सफेद कर्सर जहां टोक़ रिटर्न; बिंदु जहां सनकी खिंचाव टोक़ isometric पठार (देखें नीचे आकृति) से वृद्धि करने के लिए शुरू होता है पर पीले कर्सर स्थिति, बिंदु जहां isometric टोक़ करने के लिए आराम टोक़ से वृद्धि करने के लिए शुरू होता है पर नीले कर्सर स्थिति टोक़ आराम. क्या बलवान विश्लेषण का चयन करें, तब परिणाम दिखाएँ. बलवान डेटा विश्लेषण पॉप अप विंडो परिणाम में, आप isometric टोक़ डेटा के लिए एक कर्सर (नीला) और 2 (पीले) के बीच डेटा का चयन कर सकते हैं, या सनकी टोक़ डेटा के लिए 2 (पीला) और 3 (सफेद) कर्सर के बीच. इन चर या विशिष्ट चर के सभी एक डेटा फ़ाइल के लिए लॉग इन किया जा सकता है, तथापि, कि प्रक्रिया के साथ साथ वर्णित नहीं है. यदि कोई डेटा लॉग सेट नहीं है, डेटा को हाथ से दर्ज करना होगा. मुख्य स्क्रीन पर लौटने के विंडो बंद करें का चयन करें. बाहर निकलें कार्यक्रम का चयन करें डीएमए करीब है, और फिर सफेद करने के लिए एक नई फ़ाइल का विश्लेषण शुरू तीर का चयन करें.

    9. प्रतिनिधि परिणाम

    1. Tibial तंत्रिका उत्तेजना tibiotarsal extensor मांसपेशियों के सक्रिय एकल twitches (चित्र 1) (1 हर्ट्ज): टोक़ चिकोटी. ध्यान दें कि Y-अक्ष "बल" इंगित करता है, टोक़ शक्ति और दूरी के (उत्पाद) को उपयोगकर्ता द्वारा की गणना की जाती है. हम (रोटेशन की धुरी से पार्श्व अंक के अंत) पंजा की लंबाई को मापने. यह लंबाई दूरी (लीवर हाथ) टोक़ (एनएम) का निर्धारण किया जाता है.
    2. Isometric धनुस्तंभीय (tibiotarsal विस्तार) टोक़: tibial तंत्रिका उत्तेजना tibiotarsal extensor मांसपेशियों (50hz दालों का 1.5 सेकंड ट्रेन) tetanized. हम गतिशील बलवान नियंत्रण कंप्यूटर सॉफ्टवेयर (DMC, अरोड़ा वैज्ञानिक, Inc) का इस्तेमाल उत्तेजना समय नियंत्रण और टोक़ प्रतिक्रियाओं (चित्र 2) पर कब्जा.
    3. सनकी प्रोटोकॉल: सनकी संकुचन tibiotarsal flexors में आयोजित की गई. Percutaneous peroneal तंत्रिका stimulसमझना एक प्रारंभिक isometric संकुचन संयुक्त रोटेशन के बाद सक्रिय सक्रिय flexor मांसपेशियों (सनकी संकुचन; चित्र 3) की लंबी कारण 6.

    चित्रा 1
    चित्रा 1 (# 1), नीले, पीले (# 2) और सफेद (# 3) कर्सर की नियुक्ति एक चिकोटी का विश्लेषण करने के लिए.. डीएमए सॉफ्टवेयर का एक प्रतिनिधि स्क्रीन शॉट एक स्वस्थ 13 किलो कुत्ते में tibiotarsal विस्तार चिकोटी के लिए दिखाया गया है. ध्यान दें कि बाद के विश्लेषण के लिए सॉफ्टवेयर के द्वारा प्रदर्शन किया, एक स्प्रेडशीट, और बल (आंकड़े में दिखाया बल (छ) के रूप टोक़ (एनएम) टोक़ के लिए कनवर्ट किया जा सकता है बल के उत्पाद द्वारा की गणना है और उत्पादन के लिए डेटा निर्यात कर रहे हैं लीवर हाथ दूरी (= लंबाई इस दूरी में रोटेशन की धुरी से पंजा के पार्श्व अंक मापा).

    चित्रा 2
    चित्रा 2. नीले रंग (# 1), पीला (# 2) और सफेद (# 3) कर्सर की नियुक्ति एक टिटनेस का विश्लेषण करने के लिए. Tibiotarsal विस्तार tetany, एक ही पशु के लिए एक प्रतिनिधि डीएमए सॉफ्टवेयर के स्क्रीन शॉट में दिखाया गया है के रूप में 1 अंजीर में दिखाया गया है.

    चित्रा 3
    चित्रा 3 (# 1), नीले, पीले (# 2) और सफेद (# 3) कर्सर की नियुक्ति एक सनकी संकुचन खिंचाव चोट का विश्लेषण करने के लिए. . डीएमए सॉफ्टवेयर का एक प्रतिनिधि स्क्रीन शॉट एक एकल एक स्वस्थ 13 किलो कुत्ते में सनकी संकुचन खिंचाव चोट के लिए दिखाया गया है. प्रारंभिक पठार (ग्रीन लाइन) संकुचन की isometric चरण दिखाता है. isometric चरण हरे रंग की लाइन में तेजी से शिखर द्वारा एक सनकी (खिंचाव) सचित्र रूप चरण के द्वारा पीछा किया जाता है. दोहराया सनकी संकुचन आम तौर पर isometric टोक़ में लगातार गिरावट में परिणाम.

    Discussion

    इस प्रोटोकॉल के लिए विश्लेषण करने के vivo में बड़े जानवर पेशी समारोह का आकलन, दस्तावेज़ और इलाज के उपायों की प्रभावकारिता निर्धारित करने के लिए या रोग प्रगति के जैविक सुविधाओं दस्तावेज़ के लिए प्रयोग किया जाता है 1-6 पशु पोजीशनिंग, अंग प्लेसमेंट और इलेक्ट्रोड प्लेसमेंट प्रमुख चर रहे हैं कि काफी प्रभाव परिणाम. एक प्रारंभिक अध्ययन में, isoflurane काफी बल माप (Schueler आरओ, कोच एच, Kornegay जे.एन., अप्रकाशित डेटा, 1993) को प्रभावित नहीं किया वायुकोशीय एकाग्रता मूल्यों मतलब (मैक) हार्डवेयर और सॉफ़्टवेयर 7 व्यावसायिक रूप से उपलब्ध है और अच्छी तरह से स्थापित तरीके हैं. . 1,2,8,4,9-11,6,12 यह अनुशंसित है कि उपयोगकर्ताओं को प्राप्त करने और सॉफ्टवेयर और उपकरण ऊपर वर्णित का उपयोग करें जब इस प्रोटोकॉल का पालन.

    संशोधन: वर्तमान servomotor की सीमाओं के बारे में 23 किलो और 20cm के पंजा लंबाई के शरीर द्रव्यमान शामिल हैं. ध्यान दें कि टोक़ सीमा ~ 8 टोक़ transducer (310LR मॉडल) के लिए एन मीटर यहाँ वर्णित है. इस मान को 6 महीने या पुराने पर सामान्य कुत्तों से अधिक हो सकता है. वर्तमान प्रोटोकॉल के लिए संभावित संशोधनों सॉफ्टवेयर अद्यतन शामिल हैं और transducer के टोक़ रेंज में वृद्धि. अरोड़ा वैज्ञानिक बड़े जानवरों के लिए एक अंग पोजीशनिंग युक्ति है कि stereotactic वर्तमान प्रोटोकॉल में इस्तेमाल किया फ्रेम के लिए एवजी किया जा सकता है है बनाती है. अन्य पशु मॉडल की इस पद्धति का सफलतापूर्वक लागू किया गया है, गैर मानव प्राइमेट सहित.

    Disclosures

    इस वीडियो के उत्पादन के लेख अरोड़ा वैज्ञानिक, इंक द्वारा प्रायोजित किया गया था

    Acknowledgements

    राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान (NIH), यहोशू Frase फाउंडेशन, पेशी Dystrophy एसोसिएशन (एमडीए).

    Materials

    Name Company Catalog Number Comments
    Stimulating electrodes Teca 25mmx26G Disposable sterile monopolar needle electrodes
    Stimulator Grass Technologies S88X
    Stimulus isolation unit Grass Technologies SIU-C
    Muscle lever system Aurora Scientific 310C-LR Footplate option
    Signal interface Aurora Scientific Series 604A
    Dynamic Muscle Control & Analysis Software Aurora Scientific Aurora Scientific
    PC/Monitor Aurora Scientific Windows XP computer
    Limb position device Aurora Scientific NA Can be substituted for stereotactic frame
    Table Northstar Customs, LLC NA Custom made table
    Flexible wrap for paw attachment to pedal Andover PetFlex(5cmx2m) May be reused a time or two

    References

    1. Childers, M.K., Okamura, C.S., Bogan, D.J., Bogan, J.R., Petroski, G.F., McDonald, K., Kornegay, J.N. Eccentric contraction injury in dystrophic canine muscle. Arch Phys Med Rehabil 83 : 1572-1578 (2002).
    2. Childers, M.K., Okamura, C.S., Bogan, D.J., Bogan, J.R., Sullivan, M.J., Kornegay, J.N. Myofiber injury and regeneration in a canine homologue of Duchenne muscular dystrophy. Am J Phys Med Rehabil 80 : 175-181 (2001).
    3. Childers MK, Staley JT, Kornegay JN, McDonald KS. Skinned single fibers from normal and dystrophin-deficient dogs incur comparable stretch-induced force deficits. Muscle Nerve 31 : 768-771 (2005).
    4. Kornegay, J.N., Bogan, D.J., Bogan, J.R., Childers, M.K., Cundiff, D.D., Petroski, G.F., Schueler, R.O. Contraction force generated by tarsal joint flexion and extension in dogs with golden retriever muscular dystrophy. J Neurol Sci 166 : 115-121 (1999).
    5. Liu, J.M., Okamura, C.S., Bogan, D.J., Bogan, J.R., Childers, M.K., Kornegay, J.N. Effects of prednisone in canine muscular dystrophy. Muscle Nerve 30 : 767-773 (2004).
    6. Tegeler, C.J., Grange, R.W., Bogan, D.J., Markert, C.D., Case, D., Kornegay, J.N., Childers, M.K. Eccentric contractions induce rapid isometric torque drop in dystrophin-deficient dogs. Muscle Nerve 42 : 130-132 (2010).
    7. Allen, D.G. Eccentric muscle damage: mechanisms of early reduction of force. Acta Physiol Scand 171 : 311-319 (2001).
    8. Friden, J., Lieber, R.L. Eccentric exercise-induced injuries to contractile and cytoskeletal muscle fibre components. Acta Physiol Scand 171:321-326 (2001).
    9. Merkies, I.S., Faber, C.G. Outcome measures in Duchenne muscular dystrophy: are we ready for the new therapeutic era? Neuromuscul Disord 19 : 447 (2009).
    10. Nagaraju, K., Willmann, R. Developing standard procedures for murine and canine efficacy studies of DMD therapeutics: report of two expert workshops on "Pre-clinical testing for Duchenne dystrophy": Washington DC, October 27th-28th 2007 and Zurich, June 30th-July 1st 2008. Neuromuscul Disord 19 : 502-506 (2009).
    11. Proske, U., Allen, T.J. Damage to skeletal muscle from eccentric exercise. Exerc Sport Sci Rev 33 : 98-104 (2005).
    12. Warren, G.L., Lowe, D.A., Armstrong, R.B. Measurement tools used in the study of eccentric contraction-induced injury. Sports Med 27 : 43-59 (1999).

    Comments

    0 Comments

    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Metrics

    Waiting
    simple hit counter