The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
This translation into Hebrew was automatically generated through Google Translate.
English Version | Other Languages
Department of Physiology and Biophysics, University of California, Irvine (UCI)
This article is a part of JoVE General. If you think this article would be useful for your research, please recommend JoVE to your institution's librarian.
Recommend JoVE to Your LibrarianCurrent Access Through Your IP Address
Current Access Through Your Registered Email Address
Beeton, C., Garcia, A., Chandy, K. G. Drawing Blood from Rats through the Saphenous Vein and by Cardiac Puncture. J. Vis. Exp. (7), e266, doi:10.3791/266 (2007).
ציור דם מכרסמים הוא הכרחי עבור מספר גדול של הן במבחנה במחקרים vivo. אתרים של דם שואבת הן רבות במכרסמים: לב רטרו מסלולית סינוס, וריד, וריד לסתי, וריד saphenous,. טכניקה לכל היתרונות והחסרונות שלה, וחלק אינם מאושרים יותר במדינות מסוימות (למשל, רטרו מסלולית שואבת בהולנד). דיון בטכניקות שונות של ציור דם הם 1-3 זמין. כאן, אנו מציגים שתי טכניקות ציור דם חולדות, כל אחד עם יישומים ספציפיים שלה.
להקיז דם מהעורק saphenous, בתנאי שזה נעשה כראוי, גורמת מצוקה מינימלית בבעלי חיים ואינו דורש הרדמה. טכניקה זו מאפשרת חזר שואבת של כמויות קטנות של דם, כגון הצורך ללימודי פרמוקוקינטיים 4,5, בקביעת כימיה פלזמה, או ספירת דם 6.
לנקב לב מאפשר איסוף כמויות גדולות של דם מבעל חיים אחד (עד 10 מ"ל של דם ניתן להסיק חולדה ז 150). טכניקה זו שימושית מאוד ולכן כהליך סופני כאשר ציור דם saphenous לא יספק מדגם מספיק גדול. אנו משתמשים לנקב לב כאשר אנחנו צריכים כמות מספקת של בסרום של זן מסוים של חולדות לגדול קווי לימפוציטים T במבחנה 4-9.
ציור דם מן החולדות דרך וריד Saphenous ועל ידי נקר לב
הערה: כל הנהלים חייב להיות מאושר על ידי טיפול בבעלי חיים במכון שלך, ועדה להשתמש.
1. שואבים דם בווריד saphenous
2. דם לצייר על ידי לנקב לב
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
ציור דם מהעורק saphenous הוא דרך נוחה לקבל כמויות קטנות של דם ללא הרדמה. אם הדגימה חזר נדרש, לבדוק את התקנות כדי לוודא שאתה לא למשוך יותר מדי דם מן עכברוש אחד.
ציור דם על ידי לנקב לב הוא דרך נוחה לקבל כמויות גדולות של דם, אבל זה הליך סופנית. בעל חיים חייב להיות מורדמים בסוף לצייר את הדם.
טכניקות אלו (כמו כל טכניקות בבעלי חיים) צריך להיעשות הראשון בנוכחות וטרינר או טכנאי וטרינרי אשר יוכלו להעריך כי החיות מטופלות כראוי ולא כפופים כאב מיותר ו / או מצוקה.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| Needle 20G 1/2 | Tool | BD Biosciences | 305176 | For puncturing the saphenous vein |
| Microvette 300 | Tool | Sarstedt Ltd | 20.1308.100 | To collect blood from the saphenous vein |
| Electric trimmer | Tool | Braintree Scientific, Inc. | CLP-32130 | |
| Needle 23 G 1 | Tool | BD Biosciences | 305145 | For cardiac puncture |
| 5 ml plastic syringe, slip tip | Tool | Fisher Scientific | 14-826-12 | For cardiac puncture |
1. Van Herck, H., Baumans, V., Brandt, C.J.W.M., Boere, H.A.G., Hesp, A.P.M., Van Lith, H.A., Schurink, M., Beynen, A.C. Blood sampling from the retro-orbital plexus, the saphenous vein and the tail vein in rats: comparative effects on selected behavioural and blood variables. Laboratory Animals. 35, 131-139 (2001).
2. Luzzi, M., Skoumbourdis, E., Baumans, V., Conte, A., Sherwin, C., Kerwin, A., Lang, T., Morton, D., Barley, J., Moreau, E., Weilenmann, R.F., Reinhardt, V. Collecting blood from rodents: a discussion by the laboratory animal refinement and enrichment forum. Animal Technology and Welfare. 4, 99-102 (2005).
3. Angelow, O., Schroer, R.A., Heft, S., James, V.C., Noble, J. A comparison of two methods of bleeding rats: the venous plexus of the eye versus the vena sublingualis. Jounal of Applied Toxicology. 4: 258-260 (2006).
4. Beeton C., Wulff H., Barbaria J., Clot-Faybesse O., Pennington M., Bernard D., Cahalan M.D., Chandy K.G., Beraud E. Selective blockade of T lymphocyte K+ channels ameliorates experimental autoimmune encephalomyelitis, a model for multiple sclerosis. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 98:13942-13947 (2001).
5. Beeton C., Pennington M.W., Wulff, H., Singh S., Nugent D., Crossley G., Khaytin I., Chen C.Y., Calabresi P.A., Chandy K.G. Targeting effector memory T cells with a selective peptide inhibitor of Kv1.3 channels for therapy of autoimmune diseases. Mol. Pharmacol. 67:1369-1381 (2005)
6. Beeton C.,Wulff H., Standifer N.E., Azam P., Mullen K.M., Pennington M.W., Kolski-Andreaco A., Wei E., Grino A., Counts D.R., Wang P.H., LeeHealey C.J., Andrews B.S., Sankaranarayanan A., Homerick D., Roeck W.W., Tehranzadeh J., Stanhope K.L., Zimin P., Havel P.J., Griffey S., Knaus H.G., Nepom G.T., Gutman G.A., Calabresi P.A., Chandy K.G. Kv1.3 channels are a therapeutic target for T cell mediated autoimmune diseases. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 103:17414-17419 (2006).
7. Beeton C., Barbaria J., Devaux J., Benoliel A.-M., Gola M., Sabatier J.-M., Bernard D., Crest M., Beraud E. Selective blocking of voltage-gated K+ channels treats experimental autoimmune encephalomyelitis and inhibits T-cell activation. J. Immunol. 166:936-944 (2001).
8. Devaux J., Forni C., Beeton C., Barbaria J., Beraud E., Gola M., Crest M. Myelin basic protein-reactive T cells induce conduction failure in vivo but not in vitro. Neuroreport 14:317-320 (2003).
9. Beeton C., Chandy K.G. Induction and monitoring of adoptive delayed type hypersensitivity in rats, Journal of Visualized Experiments, 8, http://www.jove.com/index/Details.stp?ID=325 (2007).
Does the cardiac puncture procedure also work with mice? If not, how can I do a cardiac puncture with mice?
1
ReplyPosted by: Rouminder KaurOctober 1, 2008, 6:35 PM