The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
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Department of Physiology and Biophysics, University of California, Irvine (UCI)
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Beeton, C., Garcia, A., Chandy, K. G. Drawing Blood from Rats through the Saphenous Vein and by Cardiac Puncture. J. Vis. Exp. (7), e266, doi:10.3791/266 (2007).
कृन्तकों से रक्त आकर्षित इन विट्रो में और vivo अध्ययन में दोनों की बड़ी संख्या के लिए आवश्यक है. खून की साइटें ड्रॉ कृन्तकों में कई हैं: रेट्रो कक्षीय साइनस, गले का शिरा, दाढ़ की हड्डी का नस, saphenous नस, दिल. प्रत्येक तकनीक के अपने फायदे और नुकसान है, और कुछ किसी भी अधिक कुछ देशों में अनुमोदित नहीं कर रहे हैं (जैसे, रेट्रो कक्षीय हॉलैंड में छोड़ता है). ड्राइंग रक्त के लिए विभिन्न तकनीकों का एक चर्चा उपलब्ध 1-3 कर रहे हैं. यहाँ, हम चूहों से रक्त ड्राइंग के लिए दो तकनीकों, प्रत्येक अपनी विशिष्ट अनुप्रयोगों के साथ प्रस्तुत करते हैं.
Saphenous नस से खून आकर्षित, बशर्ते वह ठीक से किया है, पशुओं में कम से कम संकट लाती है और संज्ञाहरण की आवश्यकता नहीं है. इस तकनीक की अनुमति देता है दोहराया खून की छोटी मात्रा के खींचता है, जैसे pharmacokinetic 4,5 अध्ययन के लिए की जरूरत है, प्लाज्मा, रसायन शास्त्र, या रक्त 6 मायने रखता निर्धारित है.
कार्डिएक पंचर की अनुमति देता है एक एकल जानवर से रक्त की बड़ी मात्रा का संग्रह (रक्त का 10 मिलीलीटर 150 ग्राम चूहे से खींचा जा सकता है है). इसलिए इस तकनीक बहुत उपयोगी है एक टर्मिनल प्रक्रिया के रूप में जब saphenous से रक्त ड्राइंग एक बड़ा पर्याप्त नमूना प्रदान नहीं होता. हम हृदय पंचर का उपयोग करें जब हम 4-9 इन विट्रो में टी लिम्फोसाइट लाइनों बढ़ने चूहों के एक विशिष्ट तनाव से सीरम की पर्याप्त मात्रा की जरूरत है.
चूहे से saphenous नस के माध्यम से रक्त और कार्डिएक पंचर द्वारा आरेखण
नोट: सभी प्रक्रियाओं अपने संस्थान जानवरों की देखभाल और उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित किया जाना चाहिए.
1. Saphenous नस से खून आकर्षित
2. हृदय पंचर द्वारा रक्त आकर्षित
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Saphenous नस से खून आकर्षित संज्ञाहरण के बिना रक्त की छोटी मात्रा में मिल के लिए एक सुविधाजनक तरीका है. यदि दोहराया नमूने की आवश्यकता है, नियमों की जांच करने के लिए सुनिश्चित करें तुम एक चूहे से बहुत ज्यादा खून आकर्षित नहीं करते.
हृदय पंचर के द्वारा रक्त आकर्षित खून की बड़ी मात्रा में प्राप्त करने के लिए एक सुविधाजनक तरीका है, लेकिन यह एक टर्मिनल प्रक्रिया है. जानवर खून आकर्षित के अंत में euthanized किया जाना चाहिए.
इन तकनीकों में (जीवित जानवरों पर सभी तकनीकों के रूप में) पहली बार एक पशुचिकित्सा या एक पशु चिकित्सा तकनीशियन जो आकलन है कि पशुओं को ठीक से नियंत्रित किया जाता है और अनावश्यक दर्द और / या संकट के अधीन नहीं हैं सक्षम हो जाएगा की उपस्थिति में किया जाना चाहिए.
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| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| Needle 20G 1/2 | Tool | BD Biosciences | 305176 | For puncturing the saphenous vein |
| Microvette 300 | Tool | Sarstedt Ltd | 20.1308.100 | To collect blood from the saphenous vein |
| Electric trimmer | Tool | Braintree Scientific, Inc. | CLP-32130 | |
| Needle 23 G 1 | Tool | BD Biosciences | 305145 | For cardiac puncture |
| 5 ml plastic syringe, slip tip | Tool | Fisher Scientific | 14-826-12 | For cardiac puncture |
1. Van Herck, H., Baumans, V., Brandt, C.J.W.M., Boere, H.A.G., Hesp, A.P.M., Van Lith, H.A., Schurink, M., Beynen, A.C. Blood sampling from the retro-orbital plexus, the saphenous vein and the tail vein in rats: comparative effects on selected behavioural and blood variables. Laboratory Animals. 35, 131-139 (2001).
2. Luzzi, M., Skoumbourdis, E., Baumans, V., Conte, A., Sherwin, C., Kerwin, A., Lang, T., Morton, D., Barley, J., Moreau, E., Weilenmann, R.F., Reinhardt, V. Collecting blood from rodents: a discussion by the laboratory animal refinement and enrichment forum. Animal Technology and Welfare. 4, 99-102 (2005).
3. Angelow, O., Schroer, R.A., Heft, S., James, V.C., Noble, J. A comparison of two methods of bleeding rats: the venous plexus of the eye versus the vena sublingualis. Jounal of Applied Toxicology. 4: 258-260 (2006).
4. Beeton C., Wulff H., Barbaria J., Clot-Faybesse O., Pennington M., Bernard D., Cahalan M.D., Chandy K.G., Beraud E. Selective blockade of T lymphocyte K+ channels ameliorates experimental autoimmune encephalomyelitis, a model for multiple sclerosis. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 98:13942-13947 (2001).
5. Beeton C., Pennington M.W., Wulff, H., Singh S., Nugent D., Crossley G., Khaytin I., Chen C.Y., Calabresi P.A., Chandy K.G. Targeting effector memory T cells with a selective peptide inhibitor of Kv1.3 channels for therapy of autoimmune diseases. Mol. Pharmacol. 67:1369-1381 (2005)
6. Beeton C.,Wulff H., Standifer N.E., Azam P., Mullen K.M., Pennington M.W., Kolski-Andreaco A., Wei E., Grino A., Counts D.R., Wang P.H., LeeHealey C.J., Andrews B.S., Sankaranarayanan A., Homerick D., Roeck W.W., Tehranzadeh J., Stanhope K.L., Zimin P., Havel P.J., Griffey S., Knaus H.G., Nepom G.T., Gutman G.A., Calabresi P.A., Chandy K.G. Kv1.3 channels are a therapeutic target for T cell mediated autoimmune diseases. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 103:17414-17419 (2006).
7. Beeton C., Barbaria J., Devaux J., Benoliel A.-M., Gola M., Sabatier J.-M., Bernard D., Crest M., Beraud E. Selective blocking of voltage-gated K+ channels treats experimental autoimmune encephalomyelitis and inhibits T-cell activation. J. Immunol. 166:936-944 (2001).
8. Devaux J., Forni C., Beeton C., Barbaria J., Beraud E., Gola M., Crest M. Myelin basic protein-reactive T cells induce conduction failure in vivo but not in vitro. Neuroreport 14:317-320 (2003).
9. Beeton C., Chandy K.G. Induction and monitoring of adoptive delayed type hypersensitivity in rats, Journal of Visualized Experiments, 8, http://www.jove.com/index/Details.stp?ID=325 (2007).
Does the cardiac puncture procedure also work with mice? If not, how can I do a cardiac puncture with mice?
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ReplyPosted by: Rouminder KaurOctober 1, 2008, 6:35 PM