The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
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Department of Physiology and Biophysics, University of California, Irvine (UCI)
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Beeton, C., Garcia, A., Chandy, K. G. Drawing Blood from Rats through the Saphenous Vein and by Cardiac Puncture. J. Vis. Exp. (7), e266, doi:10.3791/266 (2007).
Dessin de sang de rongeurs est nécessaire pour un grand nombre de fois in vitro et in vivo. Sites de prélèvements sanguins sont nombreux chez les rongeurs: le cœur du sinus rétro-orbitaires, la veine jugulaire, veine maxillaire, la veine saphène,. Chaque technique a ses avantages et ses inconvénients, et certains ne sont pas approuvés plus dans certains pays (par exemple, rétro-orbitaires dessine en Hollande). Une discussion sur les différentes techniques de dessin sont disponibles sanguins 1-3. Ici, nous présentons deux techniques pour prélever du sang à partir de rats, chacun avec ses applications spécifiques.
Prélever du sang de la veine saphène, à condition qu'il soit fait correctement, induit une détresse minimale chez les animaux et ne nécessite pas d'anesthésie. Cette technique permet des tirages répétés de petites quantités de sang, comme nécessaires pour les études pharmacocinétiques 4,5, la détermination de la chimie du plasma, ou numération globulaire 6.
Ponction cardiaque permet la collecte de grandes quantités de sang à partir d'un seul animal (jusqu'à 10 ml de sang peuvent être tirées d'un rat de 150 g). Cette technique est donc très utile en tant que procédure de terminal lors de l'élaboration de sang de la saphène ne serait pas de fournir un échantillon suffisamment grand. Nous utilisons ponction cardiaque quand nous avons besoin des quantités suffisantes de sérum provenant d'une souche spécifique de rats à croître T lymphocytes in vitro lignes 4-9.
Dessin de sang de rats à travers la veine saphène et par ponction cardiaque
Remarque: Toutes les procédures doivent être approuvées par les soins des animaux de votre institut et au comité d'utilisation.
1. Prélever du sang de la veine saphène
2. Prélever du sang par ponction cardiaque
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Dessin de sang de la veine saphène est une façon pratique d'obtenir de petites quantités de sang, sans anesthésie. Si l'échantillonnage répété est nécessaire, consulter les règlements pour vous assurer de ne pas tirer trop de sang d'un rat.
Dessin de sang par ponction cardiaque est une façon pratique d'obtenir de grandes quantités de sang, mais c'est une procédure terminale. L'animal doit être euthanasié à l'issue du tirage au sort du sang.
Ces techniques (comme toutes les techniques sur des animaux vivants) doit d'abord être fait en présence d'un vétérinaire ou un technicien vétérinaire qui sera en mesure d'évaluer ce que les animaux sont manipulés correctement et ne sont pas soumis à une douleur inutile et / ou de détresse.
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| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| Needle 20G 1/2 | Tool | BD Biosciences | 305176 | For puncturing the saphenous vein |
| Microvette 300 | Tool | Sarstedt Ltd | 20.1308.100 | To collect blood from the saphenous vein |
| Electric trimmer | Tool | Braintree Scientific, Inc. | CLP-32130 | |
| Needle 23 G 1 | Tool | BD Biosciences | 305145 | For cardiac puncture |
| 5 ml plastic syringe, slip tip | Tool | Fisher Scientific | 14-826-12 | For cardiac puncture |
1. Van Herck, H., Baumans, V., Brandt, C.J.W.M., Boere, H.A.G., Hesp, A.P.M., Van Lith, H.A., Schurink, M., Beynen, A.C. Blood sampling from the retro-orbital plexus, the saphenous vein and the tail vein in rats: comparative effects on selected behavioural and blood variables. Laboratory Animals. 35, 131-139 (2001).
2. Luzzi, M., Skoumbourdis, E., Baumans, V., Conte, A., Sherwin, C., Kerwin, A., Lang, T., Morton, D., Barley, J., Moreau, E., Weilenmann, R.F., Reinhardt, V. Collecting blood from rodents: a discussion by the laboratory animal refinement and enrichment forum. Animal Technology and Welfare. 4, 99-102 (2005).
3. Angelow, O., Schroer, R.A., Heft, S., James, V.C., Noble, J. A comparison of two methods of bleeding rats: the venous plexus of the eye versus the vena sublingualis. Jounal of Applied Toxicology. 4: 258-260 (2006).
4. Beeton C., Wulff H., Barbaria J., Clot-Faybesse O., Pennington M., Bernard D., Cahalan M.D., Chandy K.G., Beraud E. Selective blockade of T lymphocyte K+ channels ameliorates experimental autoimmune encephalomyelitis, a model for multiple sclerosis. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 98:13942-13947 (2001).
5. Beeton C., Pennington M.W., Wulff, H., Singh S., Nugent D., Crossley G., Khaytin I., Chen C.Y., Calabresi P.A., Chandy K.G. Targeting effector memory T cells with a selective peptide inhibitor of Kv1.3 channels for therapy of autoimmune diseases. Mol. Pharmacol. 67:1369-1381 (2005)
6. Beeton C.,Wulff H., Standifer N.E., Azam P., Mullen K.M., Pennington M.W., Kolski-Andreaco A., Wei E., Grino A., Counts D.R., Wang P.H., LeeHealey C.J., Andrews B.S., Sankaranarayanan A., Homerick D., Roeck W.W., Tehranzadeh J., Stanhope K.L., Zimin P., Havel P.J., Griffey S., Knaus H.G., Nepom G.T., Gutman G.A., Calabresi P.A., Chandy K.G. Kv1.3 channels are a therapeutic target for T cell mediated autoimmune diseases. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 103:17414-17419 (2006).
7. Beeton C., Barbaria J., Devaux J., Benoliel A.-M., Gola M., Sabatier J.-M., Bernard D., Crest M., Beraud E. Selective blocking of voltage-gated K+ channels treats experimental autoimmune encephalomyelitis and inhibits T-cell activation. J. Immunol. 166:936-944 (2001).
8. Devaux J., Forni C., Beeton C., Barbaria J., Beraud E., Gola M., Crest M. Myelin basic protein-reactive T cells induce conduction failure in vivo but not in vitro. Neuroreport 14:317-320 (2003).
9. Beeton C., Chandy K.G. Induction and monitoring of adoptive delayed type hypersensitivity in rats, Journal of Visualized Experiments, 8, http://www.jove.com/index/Details.stp?ID=325 (2007).
Does the cardiac puncture procedure also work with mice? If not, how can I do a cardiac puncture with mice?
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ReplyPosted by: Rouminder KaurOctober 1, 2008, 6:35 PM