The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
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Department of Physiology and Biophysics, University of California, Irvine (UCI)
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Beeton, C., Garcia, A., Chandy, K. G. Drawing Blood from Rats through the Saphenous Vein and by Cardiac Puncture. J. Vis. Exp. (7), e266, doi:10.3791/266 (2007).
Prelievo di sangue da roditori è necessaria per un gran numero di sia in vitro e in vivo. Siti di prelievi di sangue sono numerose nei roditori: retro-orbitale del seno, la vena giugulare, vena mascellare, della vena safena, cuore. Ogni tecnica ha i suoi vantaggi e svantaggi, e alcuni non sono stati approvati più in alcuni paesi (ad esempio, retro-orbitale disegna in Olanda). Una discussione di diverse tecniche di sangue disegno sono disponibili 1-3. Qui, presentiamo due tecniche di prelievo di sangue da topi, ognuno con le sue applicazioni specifiche.
Prelievo di sangue dalla vena safena, purché sia fatto nel modo giusto, induce disagio minimo negli animali e non richiede anestesia. Questa tecnica permette ripetuti disegna di piccole quantità di sangue, come necessarie per gli studi di farmacocinetica 4,5, determinando la chimica al plasma, o conta ematica 6.
Puntura cardiaca permette la raccolta di grandi quantità di sangue da un singolo animale (fino a 10 ml di sangue può essere prelevato da un topo 150 g). Questa tecnica è quindi molto utile come procedura terminale quando un prelievo di sangue dalla safena non avrebbe fornito un campione abbastanza grande. Noi usiamo puntura cardiaca quando abbiamo bisogno di una quantità sufficiente di siero di un ceppo specifico di ratti a crescere le linee di linfociti T in vitro 4-9.
Disegno di sangue di ratti attraverso la vena safena e da puntura cardiaca
Nota: Tutte le procedure devono essere approvati dalla cura degli animali vostro Istituto e sul comitato per l'uso.
1. Prelievo di sangue dalla vena safena
2. Prelievo di sangue da puntura cardiaca
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Un prelievo di sangue dalla vena safena è un modo conveniente per ottenere piccole quantità di sangue senza anestesia. Se campionamento ripetuto è necessario, verificare le regole per assicurarsi di non attirare troppo sangue da un ratto.
Prelievo di sangue da puntura cardiaca è un modo conveniente per ottenere grandi quantità di sangue, ma questa è una procedura terminale. L'animale deve essere l'eutanasia al termine del prelievo del sangue.
Queste tecniche (come tutte le tecniche su animali vivi) dovrebbe essere il primo fatto in presenza di un veterinario o un tecnico veterinario che sarà in grado di valutare che gli animali siano trattati correttamente e non sono sottoposti a sofferenze inutili e / o disagio.
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| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| Needle 20G 1/2 | Tool | BD Biosciences | 305176 | For puncturing the saphenous vein |
| Microvette 300 | Tool | Sarstedt Ltd | 20.1308.100 | To collect blood from the saphenous vein |
| Electric trimmer | Tool | Braintree Scientific, Inc. | CLP-32130 | |
| Needle 23 G 1 | Tool | BD Biosciences | 305145 | For cardiac puncture |
| 5 ml plastic syringe, slip tip | Tool | Fisher Scientific | 14-826-12 | For cardiac puncture |
1. Van Herck, H., Baumans, V., Brandt, C.J.W.M., Boere, H.A.G., Hesp, A.P.M., Van Lith, H.A., Schurink, M., Beynen, A.C. Blood sampling from the retro-orbital plexus, the saphenous vein and the tail vein in rats: comparative effects on selected behavioural and blood variables. Laboratory Animals. 35, 131-139 (2001).
2. Luzzi, M., Skoumbourdis, E., Baumans, V., Conte, A., Sherwin, C., Kerwin, A., Lang, T., Morton, D., Barley, J., Moreau, E., Weilenmann, R.F., Reinhardt, V. Collecting blood from rodents: a discussion by the laboratory animal refinement and enrichment forum. Animal Technology and Welfare. 4, 99-102 (2005).
3. Angelow, O., Schroer, R.A., Heft, S., James, V.C., Noble, J. A comparison of two methods of bleeding rats: the venous plexus of the eye versus the vena sublingualis. Jounal of Applied Toxicology. 4: 258-260 (2006).
4. Beeton C., Wulff H., Barbaria J., Clot-Faybesse O., Pennington M., Bernard D., Cahalan M.D., Chandy K.G., Beraud E. Selective blockade of T lymphocyte K+ channels ameliorates experimental autoimmune encephalomyelitis, a model for multiple sclerosis. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 98:13942-13947 (2001).
5. Beeton C., Pennington M.W., Wulff, H., Singh S., Nugent D., Crossley G., Khaytin I., Chen C.Y., Calabresi P.A., Chandy K.G. Targeting effector memory T cells with a selective peptide inhibitor of Kv1.3 channels for therapy of autoimmune diseases. Mol. Pharmacol. 67:1369-1381 (2005)
6. Beeton C.,Wulff H., Standifer N.E., Azam P., Mullen K.M., Pennington M.W., Kolski-Andreaco A., Wei E., Grino A., Counts D.R., Wang P.H., LeeHealey C.J., Andrews B.S., Sankaranarayanan A., Homerick D., Roeck W.W., Tehranzadeh J., Stanhope K.L., Zimin P., Havel P.J., Griffey S., Knaus H.G., Nepom G.T., Gutman G.A., Calabresi P.A., Chandy K.G. Kv1.3 channels are a therapeutic target for T cell mediated autoimmune diseases. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 103:17414-17419 (2006).
7. Beeton C., Barbaria J., Devaux J., Benoliel A.-M., Gola M., Sabatier J.-M., Bernard D., Crest M., Beraud E. Selective blocking of voltage-gated K+ channels treats experimental autoimmune encephalomyelitis and inhibits T-cell activation. J. Immunol. 166:936-944 (2001).
8. Devaux J., Forni C., Beeton C., Barbaria J., Beraud E., Gola M., Crest M. Myelin basic protein-reactive T cells induce conduction failure in vivo but not in vitro. Neuroreport 14:317-320 (2003).
9. Beeton C., Chandy K.G. Induction and monitoring of adoptive delayed type hypersensitivity in rats, Journal of Visualized Experiments, 8, http://www.jove.com/index/Details.stp?ID=325 (2007).
Does the cardiac puncture procedure also work with mice? If not, how can I do a cardiac puncture with mice?
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ReplyPosted by: Rouminder KaurOctober 1, 2008, 6:35 PM