The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
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Department of Physiology and Biophysics, University of California, Irvine (UCI)
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Beeton, C., Garcia, A., Chandy, K. G. Drawing Blood from Rats through the Saphenous Vein and by Cardiac Puncture. J. Vis. Exp. (7), e266, doi:10.3791/266 (2007).
Drawing Blut von Nagern ist notwendig für eine große Anzahl von in vitro und in vivo Studien. Websites von Blutentnahmen sind bei Nagetieren zahlreich: retroorbitalen Sinus, Jugularvenen-, Kiefer-Vene, Vena saphena, Herz. Jede Technik hat ihre Vor-und Nachteile, und einige sind nicht mehr in einigen Ländern zugelassen (zB retroorbitalen zieht in Holland). Eine Diskussion der verschiedenen Techniken zur Blutentnahme zur Verfügung 1-3. Hier präsentieren wir zwei Techniken für die Entnahme von Blut von Ratten, die jeweils mit ihren spezifischen Anwendungen.
Blutentnahme aus der Vena saphena, sofern es richtig gemacht wird, induziert minimal Not bei Tieren und erfordert keine Narkose. Diese Technik erlaubt es wiederholt zieht von geringen Mengen an Blut, wie Studien zur Pharmakokinetik 4,5 erforderlich, die Bestimmung Plasmachemie oder Blut zählt 6.
Herzpunktion ermöglicht die Erfassung großer Mengen von Blut aus einem einzigen Tier (bis zu 10 ml Blut aus einer 150 g Ratte gezogen werden können). Diese Technik ist deshalb sehr nützlich, da ein Terminal Vorgehensweise bei der Entnahme von Blut aus der Vena nicht bieten würde eine ausreichend große Stichprobe. Wir verwenden Herzpunktion, wenn wir ausreichende Mengen an Serum aus einer spezifischen Belastung von Ratten auf T-Lymphozyten-Linien in vitro 4-9 wachsen müssen.
Drawing Blood von Ratten durch die Vena saphena und durch Herzpunktion
Hinweis: Alle Verfahren muss von Ihrem Instituts Tier in Pflege und Gebrauch Ausschuss genehmigt werden.
1. Blutentnahme aus der Vena saphena
2. Blutentnahme durch Herzpunktion
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Drawing Blut aus der Vena saphena ist ein bequemer Weg, um kleine Mengen von Blut ohne Betäubung bekommen. Wenn wiederholte Probenahme erforderlich ist, aktivieren Vorschriften, um sicherzustellen, Sie ziehen nicht zu viel Blut aus einer Ratte.
Blutentnahme durch Herzpunktion ist ein bequemer Weg, um große Mengen von Blut zu erhalten, aber dies ist ein Terminal-Verfahren. Das Tier muss am Ende der Blutentnahme eingeschläfert werden.
Diese Techniken (wie alle Techniken an lebenden Tieren) sollten zunächst in der Gegenwart von einem Tierarzt oder einer tierärztlichen Techniker, der in der Lage sein zu beurteilen, dass Tiere angemessen behandelt und sind nicht zu unnötigen Schmerzen und / oder Stress ausgesetzt wird geschehen.
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| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| Needle 20G 1/2 | Tool | BD Biosciences | 305176 | For puncturing the saphenous vein |
| Microvette 300 | Tool | Sarstedt Ltd | 20.1308.100 | To collect blood from the saphenous vein |
| Electric trimmer | Tool | Braintree Scientific, Inc. | CLP-32130 | |
| Needle 23 G 1 | Tool | BD Biosciences | 305145 | For cardiac puncture |
| 5 ml plastic syringe, slip tip | Tool | Fisher Scientific | 14-826-12 | For cardiac puncture |
1. Van Herck, H., Baumans, V., Brandt, C.J.W.M., Boere, H.A.G., Hesp, A.P.M., Van Lith, H.A., Schurink, M., Beynen, A.C. Blood sampling from the retro-orbital plexus, the saphenous vein and the tail vein in rats: comparative effects on selected behavioural and blood variables. Laboratory Animals. 35, 131-139 (2001).
2. Luzzi, M., Skoumbourdis, E., Baumans, V., Conte, A., Sherwin, C., Kerwin, A., Lang, T., Morton, D., Barley, J., Moreau, E., Weilenmann, R.F., Reinhardt, V. Collecting blood from rodents: a discussion by the laboratory animal refinement and enrichment forum. Animal Technology and Welfare. 4, 99-102 (2005).
3. Angelow, O., Schroer, R.A., Heft, S., James, V.C., Noble, J. A comparison of two methods of bleeding rats: the venous plexus of the eye versus the vena sublingualis. Jounal of Applied Toxicology. 4: 258-260 (2006).
4. Beeton C., Wulff H., Barbaria J., Clot-Faybesse O., Pennington M., Bernard D., Cahalan M.D., Chandy K.G., Beraud E. Selective blockade of T lymphocyte K+ channels ameliorates experimental autoimmune encephalomyelitis, a model for multiple sclerosis. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 98:13942-13947 (2001).
5. Beeton C., Pennington M.W., Wulff, H., Singh S., Nugent D., Crossley G., Khaytin I., Chen C.Y., Calabresi P.A., Chandy K.G. Targeting effector memory T cells with a selective peptide inhibitor of Kv1.3 channels for therapy of autoimmune diseases. Mol. Pharmacol. 67:1369-1381 (2005)
6. Beeton C.,Wulff H., Standifer N.E., Azam P., Mullen K.M., Pennington M.W., Kolski-Andreaco A., Wei E., Grino A., Counts D.R., Wang P.H., LeeHealey C.J., Andrews B.S., Sankaranarayanan A., Homerick D., Roeck W.W., Tehranzadeh J., Stanhope K.L., Zimin P., Havel P.J., Griffey S., Knaus H.G., Nepom G.T., Gutman G.A., Calabresi P.A., Chandy K.G. Kv1.3 channels are a therapeutic target for T cell mediated autoimmune diseases. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 103:17414-17419 (2006).
7. Beeton C., Barbaria J., Devaux J., Benoliel A.-M., Gola M., Sabatier J.-M., Bernard D., Crest M., Beraud E. Selective blocking of voltage-gated K+ channels treats experimental autoimmune encephalomyelitis and inhibits T-cell activation. J. Immunol. 166:936-944 (2001).
8. Devaux J., Forni C., Beeton C., Barbaria J., Beraud E., Gola M., Crest M. Myelin basic protein-reactive T cells induce conduction failure in vivo but not in vitro. Neuroreport 14:317-320 (2003).
9. Beeton C., Chandy K.G. Induction and monitoring of adoptive delayed type hypersensitivity in rats, Journal of Visualized Experiments, 8, http://www.jove.com/index/Details.stp?ID=325 (2007).
Does the cardiac puncture procedure also work with mice? If not, how can I do a cardiac puncture with mice?
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ReplyPosted by: Rouminder KaurOctober 1, 2008, 6:35 PM