The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
Authors
The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
This translation into Hebrew was automatically generated through Google Translate.
English Version | Other Languages
Laboratory for Multiscale Regenerative Technologies, MIT - Massachusetts Institute of Technology
This article is a part of JoVE General. If you think this article would be useful for your research, please recommend JoVE to your institution's librarian.
Recommend JoVE to Your LibrarianCurrent Access Through Your IP Address
You do not have access to any JoVE content through your current IP address.
IP: 54.234.126.92, User IP: 54.234.126.92, User IP Hex: 921337436
Current Access Through Your Registered Email Address
You aren't signed into JoVE. If your institution subscribes to JoVE, please sign in or create an account with your institutional email address to access this content.
Hui, E. E., Bhatia, S. N. Silicon Microchips for Manipulating Cell-cell Interaction. J. Vis. Exp. (7), e268, doi:10.3791/268 (2007).
תפקידה של microenvironment הסלולר מוכר מכרעת בקביעת גורל התא ותפקודו כמעט בכל הרקמות יונקים מפיתוח שינוי ממאיר. בפרט, אינטראקציה עם stroma השכנות היה מעורב שפע של תופעות ביולוגיות, עם זאת, טכניקות קונבנציונאלי להגביל את היכולת לחקור את האלמנטים מרחבית דינמית של אינטראקציות כאלה.
בתרבות Reconfigurable micromechanical (RC), אנחנו מעסיקים מצע סיליקון micromachined עם חלקים נעים באופן דינמי לשלוט תאים תאים אינטראקציות דרך מחדש מכני. קודם לכן, שיטה זו יושמה כדי לחקור תקשורת אינטר ב שיתוף תרבויות hepatocytes ולא parenchymal תאים, הוכחת תלוי זמן אינטראקציות מגוון מצומצם של איתות מסיסים 1.
כאן אנו מתארים בפרוטרוט את הכנת השימוש במערכת RC. אנחנו מתחילים ידי הוכחת את הטיפול חלקי המכשיר באמצעות פינצטה, כולל actuating הפער בין תצורות קשר (אוכלוסיות תאים המופרדים פער של 80 מיקרומטר צרים, או במגע ישיר). הבא, אנחנו בפרוטרוט את תהליך הכנת מצעים לתרבות, ואת רב שלבי תהליך זריעת תא הנדרש לקבלת monolayers תא ומחוברות. באמצעות מיקרוסקופ לחיות, אז אנחנו להמחיש בזמן אמת מניפולציה של תאים בין תצורות שונות ניסיוני אפשרי. לבסוף, אנו מדגימים את הצעדים הנדרשים על מנת לחדש את פני המכשיר לשימוש חוזר: טולואן וניקוי פיראניה, ציפוי קלקר, פלזמה טיפול חמצן.
הכנת תרביות תאים:
עיבוד חלקי סיליקון לשימוש חוזר:
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
מערכת זו היא ייחודית בכך שהיא מאפשרת את הארגון המרחבי של רקמות כדי לטפל באופן דינמי ברמה התאית. לפיכך, התקן זה איפשר מספר ניסויים ביולוגיים רומן, פורש נושאים כגון דינמיקה איתות אינטר, פנה בתיווך מול איתות מסיסים, גורל החלטות התא, טוקסיקולוגיה, ועל crosstalk הסלולר. מכשיר זה יש להכליל נרחב מאז המצע התרבות היא תרבות רקמות פלסטיק רגיל, והמערכת תואמת שיטות התרבות מבחני סטנדרטי. לפיכך, אנו מאמינים כי פלטפורמה זו יהיה עניין רחב ככלי לחקר תאים תאים האינטראקציה בין תאים שונים ברקמות רבות.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
המחברים מודים סלמאן Khetani, ג'ארד אלן, כריס Flaim, ואוסטין Derfus לדיונים מועיל בתהליך של עיצוב המכשיר הזה. עבודה זו נתמכה על ידי הקרן הלאומית למדע הפקולטה מוקדם תוכנית פיתוח קריירה, המכונים הלאומיים לבריאות / המכון הלאומי לסוכרת ומחלות עיכול כליות, ואת דיוויד ולוסיל פקארד קרן. EEH נתמכה על ידי ל 'רות פרס Kirschstein השירות הלאומי למחקר.
| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| Silicon Comb Substrates | Tool | N/A | N/A | Parts are available for collaborative research projects. Please contact Elliot Hui (eehui @ alum . mit . edu) or Sangeeta Bhatia (sbhatia @ mit . edu). |
1. Hui EE and Bhatia SN (2007). Micromechanical control of cell-cell interactions. Proceedings of the National Academy of Sciences, 104, 5722-5726.
2. Bhatia SN, Balis UJ, Yarmush ML and Toner M (1999). Effect of cell–cell interactions in preservation of cellular phenotype: cocultivation of hepatocytes and nonparenchymal cells. The FASEB Journal, 13, 1883-1900.
3. El-Ali J, Sorger PK, Jensen KF (2006). Cells on Chips. Nature, 442, 403 - 411.
Kind regard
1
ReplyPosted by: AnonymousSeptember 12, 2007, 3:48 AM