The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.

Recommend to Librarian

Automatic Translation

This translation into Arabic was automatically generated through Google Translate.
English Version | Other Languages

 JoVE General

الجزئي تشريح الدماغ الجرذ لاستخراج الحمض النووي الريبي أو البروتينات من منطقة الدماغ الخاصة

, , , ,

Laboratory of Neurodegenerative Diseases, Department of Anatomy, LKS Faculty of Medicine, The University of Hong Kong - HKU

You must be subscribed to JoVE to access this content.

This article is a part of   JoVE General. If you think this article would be useful for your research, please recommend JoVE to your institution's librarian.

Recommend JoVE to Your Librarian

Current Access Through Your IP Address

You do not have access to any JoVE content through your current IP address.

IP: 54.234.67.55, User IP: 54.234.67.55, User IP Hex: 921322295

Current Access Through Your Registered Email Address

You aren't signed into JoVE. If your institution subscribes to JoVE, please or create an account with your institutional email address to access this content.

 

Video Article Chapters

Cite this Article: الجزئي تشريح الدماغ الجرذ لاستخراج الحمض النووي الريبي أو البروتينات من منطقة الدماغ الخاصة

Chiu, K., Lau, W. M., Lau, H. T., So, K., Chang, R. C. Micro-dissection of Rat Brain for RNA or Protein Extraction from Specific Brain Region. J. Vis. Exp. (7), e269, doi:10.3791/269 (2007).

Abstract: الجزئي تشريح الدماغ الجرذ لاستخراج الحمض النووي الريبي أو البروتينات من منطقة الدماغ الخاصة

الجزئي تشريح الدماغ الفئران في مناطق مختلفة من المهم للغاية لدراسة الأمراض العصبية المختلفة. هذا الفيديو يوضح الدقيقة تشريح الدماغ أربع مناطق رئيسية تشمل البصلة الشمية ، اللحاء الجبهي ، والمخطط الحصين في الفئران الطازجة أنسجة المخ. يتم إعطاء النصائح المفيدة لإزالة سريعة للمناطق المعنية لتفادي تدهور RNA والبروتين من الأنسجة.

Protocol: الجزئي تشريح الدماغ الجرذ لاستخراج الحمض النووي الريبي أو البروتينات من منطقة الدماغ الخاصة

الخطوة 1

التضحية الفئران وفقا للبروتوكولات المعمول بها. إزالة المخ من الجمجمة وشطفه في الجليد الباردة تعامل DEPC ملي س بالماء لإزالة أي دم السطح.

الخطوة 2

مكان على صفيحة معدنية باردة. قطع نصف الدماغ ثنائية في نصف الكرة اليمين واليسار.

269_Figure - 01

الشكل 1. مواقف قطاعات من الرأي الإنسي لنصف الكرة الفئران

الخطوة 3

جمع البصلة الشمية مباشرة بعد أول خطوة من نوعها. فلاش تجميد العينة في النيتروجين السائل وتخزينه في -80 درجة مئوية.

269_Figure - 02

الشكل 2. تشريح البصلة الشمية

الخطوة 4

جمع الحق القشرة الأمامية بعد خفض الثانية ، باستخدام شفرة وملقط دومون رقم 5. فلاش تجميد العينة في النيتروجين السائل وتخزينه في -80 درجة مئوية.

269_Figure - 03

الشكل 3. القشرة الأمامية التشريح

الخطوة 5

جمع المخطط (نواة المذنب) اليمين بعد قطع الثالث مع بمساعدة اثنين من ملقط No.5 دومون. فلاش تجميد العينة في النيتروجين السائل وتخزينه في -80 درجة مئوية.

269_Figure - 04

الشكل 4. المخطط (نواة المذنب) تشريح

الخطوة 6

لجمع الحصين ، وطرح الجانب البطنية من الدماغ وحتى ذلك الحين إزالة المخ الأوسط لكشف الحصين. تشريح الحصين من القشرة باستخدام اثنين دومون ملقط No.5. فلاش تجميد العينة في النيتروجين السائل وتخزينه في -80 درجة مئوية.

269_Figure - 05

الشكل 5. تشريح الحصين

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion: الجزئي تشريح الدماغ الجرذ لاستخراج الحمض النووي الريبي أو البروتينات من منطقة الدماغ الخاصة

مناطق الدماغ المختلفة اقترانه الأمراض العصبية المختلفة. على سبيل المثال ، القشرة الأمامية والمخطط تتصل مع مرض باركنسون ق الحصين حين يتعلق بمرض الزهايمر. دقة متناهية الصغر تشريح الدماغ يتيح لنا الكشف عن التغيرات مرنا والبروتين في المنطقة المريضة بشكل أكثر دقة.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures: الجزئي تشريح الدماغ الجرذ لاستخراج الحمض النووي الريبي أو البروتينات من منطقة الدماغ الخاصة

وقد تم التعامل مع هذه الحيوانات وفقا لبروتوكول لاستخدام الحيوانات في البحوث التي وافقت عليها اللجنة بشأن استخدام حيوانات حية في التدريس والبحث (CULATR) في جامعة هونج كونج وفقا للمعاهد الوطنية للصحة المبادئ التوجيهية للاستخدام الحيواني.

Materials: الجزئي تشريح الدماغ الجرذ لاستخراج الحمض النووي الريبي أو البروتينات من منطقة الدماغ الخاصة

Name Company Catalog Number Comments
Microscope Olympus Corporation
Dissection tools Metal plate, forceps, blade, etc. Individually wrapped with aluminum foil and heated at 180oC for eight hours to eliminate RNase. Made ice cold before use.

References: الجزئي تشريح الدماغ الجرذ لاستخراج الحمض النووي الريبي أو البروتينات من منطقة الدماغ الخاصة

1. Palkovits, M., 1998. Maps and guide to micro-dissection of the rat brain. New York: Elsevier, c.1988.

2. Swanson, L.W., 2004. Brain maps: structure of the rat brain. 3rd revised edition. Elsevier Academic Press.

Ask the Author: الجزئي تشريح الدماغ الجرذ لاستخراج الحمض النووي الريبي أو البروتينات من منطقة الدماغ الخاصة

8 Comments

thank u very much. good protocol

1

Reply

Posted by: AnonymousJanuary 8, 2009, 4:37 AM

very nice and great

2

Reply

Posted by: bavaFebruary 11, 2009, 1:27 PM

Approximately how much time/rat from sacrifice to remove the frontal cortex and the hippocampus?  Thank you.

3

Reply

Posted by: Mark CabonceFebruary 16, 2009, 10:59 AM

Hi, can be done within 3 minutes. When you practice more, 2 minutes will be enough.

3.1

Reply

Posted by: kin c.March 28, 2012, 9:28 PM

Great, Thanks for your sharing。 maybe it's better to have more brain regions to dissect

 

4

Reply

Posted by: Wang YQApril 1, 2009, 8:47 AM

How does this protocol change if we were to attempting to dissect the striatum of embryonic rats or mice for culture?

5

Reply

Posted by: H ZakariaJuly 14, 2010, 1:59 PM

Yeah nicely done. Although I am using mice this seems to work just fine for me as well.

6

Reply

Posted by: BDHMarch 28, 2012, 6:23 AM

Thanks. I think this is just a demostration that we can dissect the brain into regions. When we deal with different parts, normally we go back to the atlas first (you can use the atlas listed in the reference). Then we try to identify the region in the brain samples.

7

Reply

Posted by: kin c.March 28, 2012, 9:26 PM

Thanks. If we want to isolate some specific nuclei from brain to study them under microscope how we must do that?

8

Reply

Posted by: Jamal E.May 8, 2012, 2:10 PM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Waiting
simple hit counter