The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.

Recommend to Librarian

Automatic Translation

This translation into Russian was automatically generated through Google Translate.
English Version | Other Languages

 JoVE General

Микро-рассечение мозга крысы для РНК или белка Извлечение из конкретного региона мозга

, , , ,

Laboratory of Neurodegenerative Diseases, Department of Anatomy, LKS Faculty of Medicine, The University of Hong Kong - HKU

You must be subscribed to JoVE to access this content.

This article is a part of   JoVE General. If you think this article would be useful for your research, please recommend JoVE to your institution's librarian.

Recommend JoVE to Your Librarian

Current Access Through Your IP Address

You do not have access to any JoVE content through your current IP address.

IP: 23.22.76.170, User IP: 23.22.76.170, User IP Hex: 387337386

Current Access Through Your Registered Email Address

You aren't signed into JoVE. If your institution subscribes to JoVE, please or create an account with your institutional email address to access this content.

 

Video Article Chapters

Cite this Article: Микро-рассечение мозга крысы для РНК или белка Извлечение из конкретного региона мозга

Chiu, K., Lau, W. M., Lau, H. T., So, K., Chang, R. C. Micro-dissection of Rat Brain for RNA or Protein Extraction from Specific Brain Region. J. Vis. Exp. (7), e269, doi:10.3791/269 (2007).

Abstract: Микро-рассечение мозга крысы для РНК или белка Извлечение из конкретного региона мозга

Микро-рассечение мозга крыс в различных регионах является чрезвычайно важным для изучения различных нейродегенеративных заболеваний. Это видео демонстрирует микро-рассечение из четырех основных областей мозга включают обонятельной луковице, лобной коре, стриатуме и гиппокампе в свежей ткани мозга крысы. Полезные советы для быстрого удаления соответствующих регионов, чтобы избежать РНК и белка деградация ткани даны.

Protocol: Микро-рассечение мозга крысы для РНК или белка Извлечение из конкретного региона мозга

Шаг 1

Жертва крысы в ​​соответствии с установленными протоколами. Удалить мозг от черепа и промойте его в ледяной DEPC рассматриваться Милли Q водой, чтобы удалить любой поверхности крови.

Шаг 2

Место на холодную металлическую пластину. Вырезать мозга би половину на правую и левого полушария.

269_Figure-01

Рисунок 1. Резка позиции от медиальной зрения крысы полушарии

Шаг 3

Сбор обонятельной луковицы сразу после первого разреза. Flash Freeze образца в жидком азоте и хранят при температуре -80 ° C.

269_Figure-02

Рисунок 2. Обонятельные вскрытия лампы

Шаг 4

Сбор фронтальной коры права после второй разрез, используя лезвие и Дюмон № 5 щипцами. Flash Freeze образца в жидком азоте и хранят при температуре -80 ° C.

269_Figure-03

Рисунок 3. Фронтальная рассечение коры

Шаг 5

Сбор полосатом теле (хвостатое ядро) сразу после третьего вырезать с помощью двух Дюмон щипцы № 5. Flash Freeze образца в жидком азоте и хранят при температуре -80 ° C.

269_Figure-04

Рисунок 4. Стриатум (хвостатое ядро) рассечение

Шаг 6

Для сбора гиппокампе, положить брюшной стороне мозга, а потом удалить мозга подвергать гиппокампе. Рассеките гиппокампа от коры головного мозга с помощью двух Дюмон № 5 щипцами. Flash Freeze образца в жидком азоте и хранят при температуре -80 ° C.

269_Figure-05

Рисунок 5. Гиппокамп рассечение

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion: Микро-рассечение мозга крысы для РНК или белка Извлечение из конкретного региона мозга

Различные области мозга ассоциируются с различными нейродегенеративными заболеваниями. Например, лобной коре и полосатом теле связаны с болезнью Паркинсона в то время как гиппокамп связан с болезнью Альцгеймера. Точное микро-рассечение мозга позволяет нам обнаружить мРНК и белка изменения в пораженной зоне более точно.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures: Микро-рассечение мозга крысы для РНК или белка Извлечение из конкретного региона мозга

Животных были обработаны в соответствии с протоколом для использования животных в исследованиях утвержденной Комитетом по использованию живых животных в области преподавания и исследований (CULATR) в Университете Гонконга и в соответствии с Национальными Институтами Здоровья руководящие принципы для использования животных.

Materials: Микро-рассечение мозга крысы для РНК или белка Извлечение из конкретного региона мозга

Name Company Catalog Number Comments
Microscope Olympus Corporation
Dissection tools Metal plate, forceps, blade, etc. Individually wrapped with aluminum foil and heated at 180oC for eight hours to eliminate RNase. Made ice cold before use.

References: Микро-рассечение мозга крысы для РНК или белка Извлечение из конкретного региона мозга

1. Palkovits, M., 1998. Maps and guide to micro-dissection of the rat brain. New York: Elsevier, c.1988.

2. Swanson, L.W., 2004. Brain maps: structure of the rat brain. 3rd revised edition. Elsevier Academic Press.

Ask the Author: Микро-рассечение мозга крысы для РНК или белка Извлечение из конкретного региона мозга

8 Comments

thank u very much. good protocol

1

Reply

Posted by: AnonymousJanuary 8, 2009, 4:37 AM

very nice and great

2

Reply

Posted by: bavaFebruary 11, 2009, 1:27 PM

Approximately how much time/rat from sacrifice to remove the frontal cortex and the hippocampus?  Thank you.

3

Reply

Posted by: Mark CabonceFebruary 16, 2009, 10:59 AM

Hi, can be done within 3 minutes. When you practice more, 2 minutes will be enough.

3.1

Reply

Posted by: kin c.March 28, 2012, 9:28 PM

Great, Thanks for your sharing。 maybe it's better to have more brain regions to dissect

 

4

Reply

Posted by: Wang YQApril 1, 2009, 8:47 AM

How does this protocol change if we were to attempting to dissect the striatum of embryonic rats or mice for culture?

5

Reply

Posted by: H ZakariaJuly 14, 2010, 1:59 PM

Yeah nicely done. Although I am using mice this seems to work just fine for me as well.

6

Reply

Posted by: BDHMarch 28, 2012, 6:23 AM

Thanks. I think this is just a demostration that we can dissect the brain into regions. When we deal with different parts, normally we go back to the atlas first (you can use the atlas listed in the reference). Then we try to identify the region in the brain samples.

7

Reply

Posted by: kin c.March 28, 2012, 9:26 PM

Thanks. If we want to isolate some specific nuclei from brain to study them under microscope how we must do that?

8

Reply

Posted by: Jamal E.May 8, 2012, 2:10 PM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Waiting
simple hit counter