The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
This translation into Hebrew was automatically generated through Google Translate.
English Version | Other Languages
This article is a part of JoVE General. If you think this article would be useful for your research, please recommend JoVE to your institution's librarian.
Recommend JoVE to Your LibrarianCurrent Access Through Your IP Address
Current Access Through Your Registered Email Address
Chiu, K., Lau, W. M., Lau, H. T., So, K., Chang, R. C. Micro-dissection of Rat Brain for RNA or Protein Extraction from Specific Brain Region. J. Vis. Exp. (7), e269, doi:10.3791/269 (2007).
שלב 1
הקורבן חולדה על פי פרוטוקולים הוקמה. הסר את המוח מהגולגולת ולשטוף אותו קרח קר DEPC טיפול במים מילי Q כדי להסיר כל משטח דם.
שלב 2
מניחים על צלחת מתכת קר. חותכים את המוח דו וחצי לתוך הכדור ימינה ושמאלה. 
באיור 1. עמדות חיתוך מהעין המדיאלי של האונה עכברוש
שלב 3
אסוף את הנורה חוש הריח מיד לאחר לחתוך הראשונה. פלאש להקפיא את הדגימה בחנקן נוזלי חנות ב -80 ° C. 
איור 2. הנורה חוש הריח לנתיחה
שלב 4
איסוף קליפת המוח הקדמית הימנית לאחר לחתוך את השני, באמצעות להב מס '5 דומון מלקחיים. פלאש להקפיא את הדגימה בחנקן נוזלי חנות ב -80 ° C. 
איור 3. דיסקציה הקורטקס פרונטלי
שלב 5
אסוף את הסטריאטום (גרעין caudate) מיד לאחר לחתוך השלישית בעזרת שני מלקחיים דומון No.5. פלאש להקפיא את הדגימה בחנקן נוזלי חנות ב -80 ° C. 
איור 4. הסטריאטום (caudate גרעין) דיסקציה
שלב 6
כדי לאסוף את ההיפוקמפוס, לשים בצד הגחוני של המוח ולאחר מכן להסיר את המוח התיכון לחשוף את ההיפוקמפוס. מנתחים את ההיפוקמפוס מהקורטקס באמצעות שני דומון מלקחיים No.5. פלאש להקפיא את הדגימה בחנקן נוזלי חנות ב -80 ° C. 
איור 5. ההיפוקמפוס לנתיחה
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
אזורי מוח שונים לקשר עם מחלות ניווניות שונות. לדוגמה, קליפת המוח הקדמית ואת בסטריאטום קשורות עם מחלת פרקינסון בזמן של ההיפוקמפוס קשור עם מחלת אלצהיימר. דיסקציה מיקרו מדויק של המוח מאפשר לנו לזהות את ה-mRNA וחלבון שינויים באזור הפגוע באופן מדויק יותר.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
החיות טופלו לפי פרוטוקול לשימוש בבעלי חיים במחקר שאושר על ידי הוועדה על השימוש בבעלי חיים בהוראה ומחקר (CULATR) באוניברסיטת הונג קונג על פי המכון הלאומי לבריאות הנחיות לשימוש בבעלי חיים.
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Microscope | Olympus Corporation | ||
| Dissection tools | Metal plate, forceps, blade, etc. Individually wrapped with aluminum foil and heated at 180oC for eight hours to eliminate RNase. Made ice cold before use. |
1. Palkovits, M., 1998. Maps and guide to micro-dissection of the rat brain. New York: Elsevier, c.1988.
2. Swanson, L.W., 2004. Brain maps: structure of the rat brain. 3rd revised edition. Elsevier Academic Press.
thank u very much. good protocol
1
ReplyPosted by: AnonymousJanuary 8, 2009, 4:37 AM