The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
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Chiu, K., Lau, W. M., Lau, H. T., So, K., Chang, R. C. Micro-dissection of Rat Brain for RNA or Protein Extraction from Specific Brain Region. J. Vis. Exp. (7), e269, doi:10.3791/269 (2007).
1 단계
설립 프로토콜에 따라 쥐를 희생. 두개골의 두뇌를 제거하고 얼음에 씻어 차가운 DEPC는 표면 혈액을 제거하는 밀리 Q 물을 취급.
2 단계
차가운 금속 접시에 놓습니다. 좌우 반구로 두뇌 BI 절반을 잘라. 
그림 1. 쥐 반구의 중간보기에서 절단 위치
3 단계
오른쪽 첫 번째 컷 후 후각 망울를 수집합니다. 플래시 -80에서 액체 질소와 저장소의 표본을 동결 ° C. 
그림 2. 후각 망울의 해부
4 단계
블레이드와 더몬트 제 5 포셉를 사용하여 두 번째 절단 후 전두엽 피질의 권리를 수집합니다. 플래시 -80에서 액체 질소와 저장소의 표본을 동결 ° C. 
그림 3. 전두엽 피질의 절개
5 단계
오른쪽이 더몬트 5 번 집게의 도움으로 세 번째 절단 후 striatum (꼬리가있는 핵)를 수집합니다. 플래시 -80에서 액체 질소와 저장소의 표본을 동결 ° C. 
그림 4. Striatum (꼬리가있는 핵) 해부
6 단계
해마를 수집, 최대 두뇌의 복부 측면을 넣고 다음 해마을 폭로 midbrain를 제거합니다. 이 더몬트 5 번 집게를 사용하여 피질의 해마을 해부하다. 플래시 -80에서 액체 질소와 저장소의 표본을 동결 ° C. 
그림 5. 해마의 해부
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다른 뇌 영역은 다른 neurodegenerative 질병에 함께 연결합니다. 해마는 알츠하이머와 관련된 반면 예를 들어, 전두엽 피질과 striatum는 파킨슨병의 질환과 관련. 뇌 정밀 미세 절개은 우리가보다 정확하게 질병 지역의 mRNA와 단백질 변화를 검색할 수 있습니다.
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동물 홍콩의 대학 교육 및 연구에 살아있는 동물의 사용 (CULATR)에위원회에 의해 승인과 동물 사용을위한 건강 지침 국립 연구소에 따르면 연구에 동물의 사용을 위해 프로토콜에 따라 처리되었습니다.
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Microscope | Olympus Corporation | ||
| Dissection tools | Metal plate, forceps, blade, etc. Individually wrapped with aluminum foil and heated at 180oC for eight hours to eliminate RNase. Made ice cold before use. |
1. Palkovits, M., 1998. Maps and guide to micro-dissection of the rat brain. New York: Elsevier, c.1988.
2. Swanson, L.W., 2004. Brain maps: structure of the rat brain. 3rd revised edition. Elsevier Academic Press.
thank u very much. good protocol
1
ReplyPosted by: AnonymousJanuary 8, 2009, 4:37 AM