The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.

Recommend to Librarian

Automatic Translation

This translation into Turkish was automatically generated through Google Translate.
English Version | Other Languages

 JoVE General

RNA veya Protein Ekstraksiyonu Özgül Beyin Bölgesi'nden Rat Beyin Mikro-disseksiyon

, , , ,

Laboratory of Neurodegenerative Diseases, Department of Anatomy, LKS Faculty of Medicine, The University of Hong Kong - HKU

You must be subscribed to JoVE to access this content.

This article is a part of   JoVE General. If you think this article would be useful for your research, please recommend JoVE to your institution's librarian.

Recommend JoVE to Your Librarian

Current Access Through Your IP Address

You do not have access to any JoVE content through your current IP address.

IP: 184.73.74.47, User IP: 184.73.74.47, User IP Hex: 3091810863

Current Access Through Your Registered Email Address

You aren't signed into JoVE. If your institution subscribes to JoVE, please or create an account with your institutional email address to access this content.

 

Video Article Chapters

Cite this Article: RNA veya Protein Ekstraksiyonu Özgül Beyin Bölgesi'nden Rat Beyin Mikro-disseksiyon

Chiu, K., Lau, W. M., Lau, H. T., So, K., Chang, R. C. Micro-dissection of Rat Brain for RNA or Protein Extraction from Specific Brain Region. J. Vis. Exp. (7), e269, doi:10.3791/269 (2007).

Abstract: RNA veya Protein Ekstraksiyonu Özgül Beyin Bölgesi'nden Rat Beyin Mikro-disseksiyon

Mikro-disseksiyon içine sıçan beynin çeşitli bölgelerinde, farklı nörodejeneratif hastalıklar çalışma için son derece önemlidir. Bu video dört büyük beyin bölgelerinde mikro diseksiyon koku alma ampul, frontal korteks, striatum ve taze sıçan beyin dokusu hipokampüsteki göstermektedir. RNA ve protein doku bozulması önlemek için ilgili bölgelerde hızlı kaldırılması için yararlı ipuçları verilmiştir.

Protocol: RNA veya Protein Ekstraksiyonu Özgül Beyin Bölgesi'nden Rat Beyin Mikro-disseksiyon

Adım 1

Kurulmuş protokollere göre sıçan Kurban. Kafatası beyin çıkarın ve buz durulayın soğuk DEPC herhangi bir yüzeye kan kaldırmak için Milli Q suyu tedavi.

Adım 2

Soğuk metal plaka üzerine yerleştirin. , Sağ ve sol hemisfer beynin iki yarısı kesin.

269_Figure-01

Şekil 1. Sıçan yarımkürenin medial kesme pozisyonları

Adım 3

Ilk kesim hemen sonra koku ampul toplayın. Flaş -80 sıvı azot ve mağaza örnek dondurma ° C

269_Figure-02

Şekil 2. Olfaktör ampul diseksiyonu

Adım 4

Bir bıçak ve bir Dumont No 5 forseps kullanarak, ikinci kesim sonra sağ frontal korteksin toplayın. Flaş -80 sıvı azot ve mağaza örnek dondurma ° C

269_Figure-03

Şekil 3. Frontal korteks diseksiyonu

Adım 5

Iki Dumont No.5 forseps yardımı ile üçüncü kesintisinden sonra sağ striatum (kaudat nükleus) toplayın. Flaş -80 sıvı azot ve mağaza örnek dondurma ° C

269_Figure-04

Şekil 4. Striatum (kaudat nükleus) diseksiyonu

Adım 6

Hipokampus toplamak için, beynin ventral tarafında koymak ve sonra hipokampus maruz Ortabeyin kaldırmak. Iki Dumont No.5 forseps kullanarak korteks, hipokampus parçalara ayır. Flaş -80 sıvı azot ve mağaza örnek dondurma ° C

269_Figure-05

Şekil 5. Hippocampus diseksiyonu

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion: RNA veya Protein Ekstraksiyonu Özgül Beyin Bölgesi'nden Rat Beyin Mikro-disseksiyon

Beynin farklı bölgelerinde farklı nörodejeneratif hastalıklar ile ilişkilendirir. Hipokampus Alzheimer hastalığı ile ilgilidir Örneğin, frontal korteks ve striatum Parkinson hastalığı ile ilgili. Beynin hassas mikro diseksiyon hastalıklı bölgede mRNA ve protein değişiklikleri daha doğru algılamasına olanak sağlar.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures: RNA veya Protein Ekstraksiyonu Özgül Beyin Bölgesi'nden Rat Beyin Mikro-disseksiyon

Hayvanların Hong Kong Üniversitesi Eğitim ve Araştırma Canlı Hayvan Kullanımı (CULATR) Komitesi tarafından onaylanmış ve hayvan kullanımı için sağlık kuralları National Institutes göre araştırma hayvan kullanımı için protokole göre ele alınmıştır.

Materials: RNA veya Protein Ekstraksiyonu Özgül Beyin Bölgesi'nden Rat Beyin Mikro-disseksiyon

Name Company Catalog Number Comments
Microscope Olympus Corporation
Dissection tools Metal plate, forceps, blade, etc. Individually wrapped with aluminum foil and heated at 180oC for eight hours to eliminate RNase. Made ice cold before use.

References: RNA veya Protein Ekstraksiyonu Özgül Beyin Bölgesi'nden Rat Beyin Mikro-disseksiyon

1. Palkovits, M., 1998. Maps and guide to micro-dissection of the rat brain. New York: Elsevier, c.1988.

2. Swanson, L.W., 2004. Brain maps: structure of the rat brain. 3rd revised edition. Elsevier Academic Press.

Ask the Author: RNA veya Protein Ekstraksiyonu Özgül Beyin Bölgesi'nden Rat Beyin Mikro-disseksiyon

8 Comments

thank u very much. good protocol

1

Reply

Posted by: AnonymousJanuary 8, 2009, 4:37 AM

very nice and great

2

Reply

Posted by: bavaFebruary 11, 2009, 1:27 PM

Approximately how much time/rat from sacrifice to remove the frontal cortex and the hippocampus?  Thank you.

3

Reply

Posted by: Mark CabonceFebruary 16, 2009, 10:59 AM

Hi, can be done within 3 minutes. When you practice more, 2 minutes will be enough.

3.1

Reply

Posted by: kin c.March 28, 2012, 9:28 PM

Great, Thanks for your sharing。 maybe it's better to have more brain regions to dissect

 

4

Reply

Posted by: Wang YQApril 1, 2009, 8:47 AM

How does this protocol change if we were to attempting to dissect the striatum of embryonic rats or mice for culture?

5

Reply

Posted by: H ZakariaJuly 14, 2010, 1:59 PM

Yeah nicely done. Although I am using mice this seems to work just fine for me as well.

6

Reply

Posted by: BDHMarch 28, 2012, 6:23 AM

Thanks. I think this is just a demostration that we can dissect the brain into regions. When we deal with different parts, normally we go back to the atlas first (you can use the atlas listed in the reference). Then we try to identify the region in the brain samples.

7

Reply

Posted by: kin c.March 28, 2012, 9:26 PM

Thanks. If we want to isolate some specific nuclei from brain to study them under microscope how we must do that?

8

Reply

Posted by: Jamal E.May 8, 2012, 2:10 PM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Waiting
simple hit counter