Abstract
に:Cell Signaling Technology(CST)からPTMScan ®テクノロジーは、定量的リン酸化などの翻訳後修飾(PTMS)(PhosphoScan ®)をプロファイルする液体クロマトグラフィー - タンデム質量分析(LC-MS/MS)を持つ抗体ベースのペプチドの濃縮のための独自の手法を組み合わせた、ユビキチン化(UbiScan ®)とアセチル化(AcetylScan ®)。
PTMScan ®テクノロジーは、CSTを採用™モチーフの抗体を消化細胞抽出液内の変更されていないペプチドから翻訳後修飾ペプチドの定義済みのグループを分離する。この免疫親和性精製技術は、修飾されたペプチドの存在量の変化を識別し、定量化するLC-MS/MSと結合されます。モチーフの抗体は、細胞のリン酸化、アセチル化、またはユビキチン化状態の定量的なプロファイリングを有効にする、特にリン酸化(チロシン、セリン、スレオニン) - ペプチド、アセチル化ペプチド、またはユビキチン - タグペプチドを結合することが可能です。
MAPK、mTORの経路およびPI3K/AKT経路は、重要なシグナルが下流に発癌性の受容体チロシンキナーゼ(RTK)の活性化パスウェイです。これらの経路のすべては、タンパク質基質RxRxxS / Tモチーフがリン酸化され酸化Akt、RSK、およびP70 S6キナーゼ、を含む、AGCキナーゼファミリーのメンバーを、アクティブにします。
CSTの科学(。Sci.信号(2010)24; 3(136):ra64)によって作成された最近のphosphoproteomic研究では、これらのAGCファミリーキナーゼのための300以上の推定基質は、3つの細胞系、どちらEGFRによって駆動される各で同定されたc - Metと、またはPDGFR。実験的なアプローチは、選択的に酸化Akt、RSK、およびP70 S6キナーゼのリン酸化基質を免疫沈降する親和性試薬としてRxRxxS / Tモチーフの抗体を使用してPhosphoScan ®テクノロジーを採用。これらのRTKのシグナル伝達ネットワークの下流のマッピングで許さPI3K、mTORは、およびMEKのための特異的阻害剤と標的癌治療薬の使用。基板は、足場、タンパク質の安定性、代謝、人身売買、及び運動性を含む多くの細胞機能に関与するタンパク質を、含まれています。