Abstract
PTMScan ® Technology от клеточной сигнализации технике (КНТ), опираясь на собственные методологии на основе антител пептида обогащения жидкостной хроматографии-тандемной масс-спектрометрии (LC-MS/MS) количественно профиля пост-трансляционной модификации (PTMs), таких как фосфорилирования (PhosphoScan ®) , убиквитинирования (UbiScan ®) и ацетилирования (AcetylScan ®).
PTMScan ® Technology использует CST ™ Motif антител к отдельным предопределенным группам посттрансляционно изменение пептидов из немодифицированных пептидов в переваривается экстракты клеток. Эта техника иммуноаффинной очистки сочетается с LC-MS/MS для выявления и количественной оценки изменений в модифицированных пептидных изобилии. Мотив антитела, позволяющие специфически связываются фосфора (Тира, Ser, Thr)-пептидов, ацетилированный пептидов, или убиквитин с метками пептидов, что позволяет количественные профилирования фосфорилирование, ацетилирование, или убиквитинирования статус клетки.
МАРК, MTOR и PI3K/Akt пути являются ключевыми сигнальных путей активирован ниже по течению от онкогенных рецепторов тирозин-киназы (RTKs). Все эти пути активации киназы AGC членов семьи, включая Акт, РСК и p70 S6 киназы, чьи белка подложках фосфорилированных на RxRxxS / T мотив.
В недавнем исследовании phosphoproteomic автором которого ученые CST (Sci. сигнала (2010) 24, 3 (136):. Ra64), более 300 предполагаемых субстратов для этих AGC киназ семьи были определены в трех клеточных линий, каждая реализуются либо EGFR, с-Met, или PDGFR. Экспериментальный подход занятых PhosphoScan ® Технология использования RxRxxS / T Антитела Motif как сродство реагента выборочно иммунопреципитации фосфорилированного субстрата Akt, РСК и p70 S6 киназы. Использование целевых препаратов с ингибиторами рака, специфичные для PI3K, MTOR, и МЭК позволило отображение сети сигнализации на выходе из этих RTKs. Подложки включены белки участвуют во многих клеточных функций, в том числе леса, стабильность белков, обмен веществ, торговля людьми и подвижности.
