Abstract
세포 신호 기술 (CST)에서 PTMScan ® 기술은 양적 같은 인산화 같은 사후 translational 수정 (PTMS) (PhosphoScan ®)를 프로필에 액체 크로마 토그래피 - 탠덤 질량 분석법 (LC-MS/MS)과 항체 기반 펩타이드의 농축에 대한 독자적인 방법론을 결합 , ubiquitination (UbiScan ®) 및 아세틸화 (AcetylScan ®).
PTMScan ® 기술은 중부 표준시를 고용 ™ 모티프 항체를 소화 세포 추출물에서 수정되지 않은 펩티드의 포스트 translationally 수정 펩티드의 미리 정의된 그룹을 분리합니다. 이 면역 친 화성 정화 기술이 수정 펩타이드의 풍부한 변화를 파악하고 수치 LC-MS/MS과 함께합니다. 모티브 항체는 세포의 인산화, 아세틸화, 또는 ubiquitination 상태의 양적 프로파일을 지원, 특히 phospho (티르, 빼앗아, Thr) 펩티드, 펩티드 acetylated, 또는 ubiquitin - 태그 펩티드를 바인딩하기 위해 사용할 수 있습니다.
MAPK, mTOR과 PI3K/Akt 경로는 주요 신호가 하류 종양 수용체 티로신 kinases (RTKs)의 활성화 경로입니다. 이러한 경로의 모든 단백질 기판 RxRxxS / T 모티브에서 phosphorylated 아르 Akt, RSK, 그리고 p70 S6 kinases 포함 AGC의 키나제 가족을 활성화합니다.
중부 표준시에서 과학자 (. Sci. 신호 (2010) 24, 3 (136) : ra64)에 의해 작성 최근 phosphoproteomic 연구에서는 이러한 AGC 가족 kinases에 대한 300여 putative 기판, 3 셀 라인, 중 EGFR에 의해 주도 각각 확인되었다 C - 메트, 또는 PDGFR. 실험 방법은 선택 Akt, RSK, 그리고 p70 S6 kinases의 phosphorylated 기판을 immunoprecipitate에 친화 시약으로 RxRxxS / T 모티프의 항체를 사용하여 PhosphoScan ® 기술을 채용. 이러한 RTKs의 신호 네트워크 하류의 매핑에 사용할 특정 PI3K, mTOR과 MEK에 대한 억제제와 함께 타겟 암 약물을 사용하지 않습니다. 기판은 비계, 단백질 안정성, 신진 대사, 인신 매매 및 운동성 등 많은 세포 기능에 관여 단백질을 포함.