Preparatif HPLC Analitik HPLC: Doğal Ürün Özü kullanarak Teknikleri Scale Up - REKLAM

Sign in to register to receive emails with product information.

Waters AutoPurification Sistemi kullanarak, ayırma yöntemleri analitik bir ölçekte geliştirilen ve aynı sistem üzerinde hazırlık ölçekli transfer, bir laboratuvar genel sermaye yatırımı azaltarak olabilir. Burada 10 üzerinden 4.6 mm ID analitik kolon ayrımı taşımak için kudzu ayırma (Pueraria lobata) kök ekstresi, 19, ve 30 mm ID hazırlık sütun ayrımlarını kullanarak büyütmek için sistematik bir yaklaşım göstermektedir.

1. Numune Hazırlama

Kudzu kök parçaları (20 gram) 100 ml su / metanol 09:01 eklenir ve 1 saat için sarsılmış, gece boyunca durmak için izin ve ek bir saat için sarsıldı. Bu öz, 3000 RPM hızında 20 dakika santrifüj ve daha ileri tedavi olmadan kullanılamaz.

2. Deneysel KoÅŸullar

Kromatografik ay, tüm ölçeklerde aşağıdaki Waters bileşenleri oluşan Waters AutoPurifcation Sistemi kullanılarak gerçekleştirilmiştir:

Bir başlangıç ​​analitik ölçek ayrımı aşağıda açıklanan koşullar kullanarak, bir Waters SUNFIRE C _18, 4.6 X 50 mm, 5 mm Sütun geliştirilmiştir.

(Şekil 1) sonucu kromatogram çözülmesi bileşiklerin bir dizi gösterdi ve ölçek için kabul edilebilir bir aday olarak kabul edildi.

Şekil 1 kudzu kök ekstresi Analitik Ayırma (4.6 mm ID).

Sonuçlar ve Tartışma

Scale-Up Yöntemi

Bunların bileşikleri özel yöntemler kullanarak, kimyagerler, bunların karışımlarından soruşturma süreci hızlandırmak mümkün olan en kısa sürede daha yüksek kaliteli kesirler elde edebiliyoruz. Bu ölçek-up süreci yaklaşırken göz önünde bulundurulması gereken önemli faktörler vardır.

Sütun Kimya

Ayrılması kalp sütun. İdeal aynıdır sütun kimyaları seçmelisiniz. Analitik ve preparatif sütunları farklı kimya, analitik sonuçlar dayalı preparatif ayrılması tahmin etmek çok zor olur. Waters, analitik ve preparatif ölçek boyutları mevcuttur sütun kimya seçenekleri geniş bir yelpazede sunmaktadır. Kimya kendisi ek olarak, parçacık boyutu da düşünülmelidir. Aynı parçacık boyutu Sütunlar, hem de ayrılık ölçekler kritik çifti benzer bir çözüm sağlayacaktır. Sütun uzunluğu da ayrılması verimliliğini etkiler, aynı uzunlukta sütunları, ölçekli, benzer ayrılması güç vermek. Kısa veya uzun sütun ölçekli ancak akılda tutulması gereken mesafeyi değişecek mümkündür.

Enjeksiyon Hacmi

Uygun enjeksiyon hacmi aşağıdaki denklem kullanılarak ölçeklendirilebilir pik şekil ve yükleme kapasitesi korumak için:

Cilt enjeksiyon hacmi (mcL), D sütunu (mm) iç çapı ve L sütun uzunluğu (mm). Örneğin, 4,6 x 50 mm sütun üzerinde 20 mcL enjeksiyon, 19 x 50 mm preparatif sütun üzerine 341 mcL enjeksiyon karşılık gelir.

Debisi

Ayrılık kalitesini korumak için debisi sütun boyutlarını dayalı ölçekli olmalıdır. Sütunları ile aynı parçacık boyutu, aşağıdaki denklemi geometrik akış hızı ölçekli için kullanılır:

F akış hızı (ml / dk) ve D sütunun iç çapı (mm). Örneğin, 4.6 mm Kimliği sütununda bir 1.5 mL / dak akış hızı 19 mm Kimliği sütununda 25.6 ml / dak akış hızı eşittir.

Gradient Ölçekleme

Sütunlar aynı uzunlukta, degrade Profil hiçbir değişiklik gereklidir. Daha uzun veya daha kısa sütun ölçeklendirme, degrade segmentinde ses ayırma bilgilerini korumak için korunabilir gerekir.

Waters OBD Hazırlık Hesap makinesi, ücretsiz bir dosya indirme (Şekil 2), aracı kullanmak için kolay bir sağladığı bu analitik-preparatif ölçeklendirme hesaplamaları ( yardımcı www.waters.com / prepcalculator) . Bu hesap, bu Appl açıklanan hazırlık ayırma yöntemleri analitik ayırma yöntemi dönüştürmek için kullanılanication not.

Şekil 2 Waters OBD Hazırlık Hesap Makinesi.

Waters OBD Hazırlık Calculator

Enjeksiyon hacmi ve akış oranları hesaplamak için, açılış ekranından kitle yük ölçekleme hesaplama (Şekil 3) seçin. Giriş analitik ve preparatif sütun boyutlarını, analitik akış hızı, ve enjeksiyon hacmi, hesap makinesi, doğru hazırlık değerleri döndürür.

Şekil 3 Waters OBD Hazırlık Hesap Makinesi kitle yük ölçekleme hesaplama.

Sütun uzunlukları aynıysa analitik yöntem olarak aynı degrade segmentinde kez kullanarak degrade tabloya giriş preparatif akış hızları sadece. Alternatif olarak, gradient metodlar, açılış ekranından temel degrade skaler hesaplama (Şekil 4) seçin, analitik ve preparatif sütun boyutlarını, giriş analitik degrade tablo seçin ve hesapla butonuna tıklayın. Preparatif degrade tablo otomatik olarak hesaplanır ve sayfanın alt yarısında gösterilir. Waters OBD Hazırlık Hesap Makinesi Kullanma Kılavuzu, tüm hesap makinesi fonksiyonlarının kullanımı ile ilgili ayrıntılı bilgiler verilmektedir.

Şekil 4 Waters OBD Hazırlık Hesap Makinesi temel degrade skaler hesaplama.

Sonuçlar

Daha önce açıklanan teknikleri göstermek için, deneysel bölümünde açıklanan analitik ayırma yöntemi, üç farklı preparatif boyut sütun (10.0, 19.0 ve 30.0 mm ID) yaygınlaştırılmıştır. Ölçekli debilerde ve enjeksiyon hacimleri (Waters OBD Hazırlık Calculator kullanılarak hesaplanmıştır) Tablo 1'de gösterilmiştir.

Tablo 1: Waters OBD Hazırlık Hesap Makinesi ölçekli akış oranları ve enjeksiyon hacimleri.

Preparatif sütun Sunfire Preparatif C _18, 5 mm, 50 mm uzunluğunda OBD teknoloji ve ayrılmaların analitik ölçekli kromatografi olarak aynı sistem üzerinde yapıldı. Ölçeği ne olursa olsun, Şekil 5 de görüldüğü gibi, kromatografi (UV TIC) çok benzer.

Şekil 5 Ölçekli Hazırlık Ayrımları, 10 mm kimlik (üst), 19 mm ID (orta), 30 ID mm (alt)

Orijinal 4.6 mm ID ölçeği (Şekil 1) ile karşılaştırıldığında, çözünürlük ve saklama süresi bakımından kromatografi yine çok benzer olduğu görülebilir. Bu basit bir deney, sistematik bir yaklaşım ölçek kilit bileşenleri arasında kromatografik çözünürlüğü sağlamak amacı karşılar ve analitik ve preparatif kromatografi arasında kromatografik performans daha iyi tahmin etmek için kullanıcıların sağlar gösteriyor. Bu egzersiz, aynı zamanda kullanıcıların herhangi bir performans uzlaşma ile aynı sistem üzerinde analitik ve hazırlık kromatografi yarabilirsiniz Waters AutoPurification Sistemi, benzersiz yeteneği göstermektedir.

Sonuçlar

• Analitik kromatografi baÅŸarılı ve kolay bir ÅŸekilde sistematik bir yaklaşım kullanarak hazırlık kromatografi ölçeklendirilebilir.
• , Aynı sütun kimya ve aynı sütun uzunlukları kullanımı ayırma kalitesini korur.
• Waters tescilli Optimum Yatak YoÄŸunluk (OBD) kolon tasarımı, mükemmel bir örnek yükleme ve sütun istikrarı kimyaları ve yapılandırmaları geniÅŸ bir yelpazede sunuyor.
• Waters Hazırlık OBD Hesap Makinesi yardımcıları ölçeklendirme hesaplamaları.
• Waters Autopurification Sistemi kullanarak, ayırma yöntemleri analitik bir ölçekte geliÅŸtirilen ve aynı sistem üzerinde hazırlık ölçekli transfer, genel sermaye yatırımı azaltmak olabilir.
• Sadece hazırlık ölçekte ayırma yöntemlerinin geliÅŸtirilmesi ile karşılaÅŸtırıldığında atık bertaraf maliyeti azaltırken analitik ölçekte yöntemler geliÅŸtirmek ve onları hazırlık ölçekli transfer solvent ve örnek tüketimi azaltır.

Çıkar çatışması ilan etti.

3 Comments

You must be signed in to post a comment. Please sign in or create an account.