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 JoVE Clinical and Translational Medicine

तीव्र और जीर्ण चूहे में स्पाइनल कॉर्ड चोट के बाद स्पर्श संवेदी परीक्षण

1,2, 1, 1, 1

1Center for Brain and Spinal Cord Repair, School of Allied Medical Professions, The Ohio State University, 2Spinal Cord Research Center, Drexel University College of Medicine

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Cite this Article: तीव्र और जीर्ण चूहे में स्पाइनल कॉर्ड चोट के बाद स्पर्श संवेदी परीक्षण

Detloff, M. R., Fisher, L. C., Deibert, R. J., Basso, D. M. Acute and Chronic Tactile Sensory Testing after Spinal Cord Injury in Rats. J. Vis. Exp. (62), e3247, doi:10.3791/3247 (2012).

Abstract: तीव्र और जीर्ण चूहे में स्पाइनल कॉर्ड चोट के बाद स्पर्श संवेदी परीक्षण

रीढ़ की हड्डी की चोट (एससीआई) के संवेदी प्रणाली के कारण 1-8 परपीड़ा impairs. परपीड़ा के सेलुलर और आणविक कारण, संवेदनशील और चूहा एससीआई मॉडल में मान्य संवेदी परीक्षण की पहचान करने की जरूरत है. हालांकि, हाल ही में जब तक, कोई भी परीक्षण दृष्टिकोण एससीआई के लिए मान्य किया गया था इसलिए है कि मानकीकृत तरीके प्रयोगशालाओं भर में लागू नहीं किया गया. इसके अतिरिक्त, उपलब्ध परीक्षण तरीकों तीव्रता से लागू नहीं किया सकता है या जब गंभीर मोटर impairments के अस्तित्व, एससीआई प्रेरित 3 परपीड़ा के विकास के अध्ययन को रोकने. यहाँ हम दो मान्य संवेदी परीक्षण वॉन Frey बाल (VFH) monofilaments जो एससीआई बाद 4-5 स्पर्श संवेदी थ्रेसहोल्ड में बदलाव यों तरीकों का उपयोग कर प्रस्तुत करते हैं. एक परीक्षण अच्छी तरह से स्थापित परीक्षण ऊपर - नीचे जो अलग एससीआई कठोर अनुशासन भर में उच्च संवेदनशीलता और विशिष्टता जब 5 लंबे समय परीक्षण दर्शाता है. अन्य परीक्षण एक नव विकसित पृष्ठीय VFH परीक्षण है कि एससीआई के बाद तीव्रता से लागू किया जा सकता है जबविकसित llodynia, मोटर वसूली 4-5 करने के लिए पहले. प्रत्येक VFH monofilament एक calibrated बल पर लागू होता है जब यह झुकता जब तक हिंद पंजा की त्वचा को छुआ. अप - डाउन विधि में, उच्च या कम बलों की बारी VFHs के तल L5 चर्म - उच्छेदक पर उपयोग किया जाता है आकुंचिका वापसी थ्रेसहोल्ड चित्रित करना. क्रमिक उच्च बलों तक वापसी तो होता है कम बल VFHs के वापसी रहता है जब तक उपयोग किया जाता है लागू कर रहे हैं. स्पर्श सीमा उत्तेजनाओं के 50% में वापसी प्रकाश में लाना करने के लिए बल की आवश्यकता को दर्शाता है. नए परीक्षण के लिए, प्रत्येक VFH के पंजा पृष्ठीय L5 चर्म - उच्छेदक के लिए लागू किया जाता है, जबकि चूहे परीक्षक द्वारा समर्थित है. VFH उत्तेजना जब तक एक दिया बल पर कम से कम 3 अनुप्रयोगों के 2 से पंजा वापसी का उत्पादन बल के आरोही क्रम में होता है. स्पर्श संवेदी सीमा कम करने के लिए वापसी समय के 66% बटोर बल है. दशानुकूलन परीक्षण, और स्कोरिंग की प्रक्रिया का वर्णन कर रहे हैं. न्यायपालिका परीक्षण है कि एक retest और ठेठ परीक्षण की आवश्यकता होती है परिभाषित कर रहे हैं. पशु उपयोग डब्ल्यूके रूप में ओहियो स्टेट यूनिवर्सिटी पशु की देखभाल और उपयोग समिति ने मंजूरी दे दी है.

Protocol: तीव्र और जीर्ण चूहे में स्पाइनल कॉर्ड चोट के बाद स्पर्श संवेदी परीक्षण

1. ऊपर / नीचे तल वॉन फ्रे परीक्षण

परीक्षण के उद्देश्य कितना बल प्रोत्साहन से पंजा वापसी के प्रकाश में लाना करने के लिए आवश्यक है मापने के द्वारा स्पर्श संवेदनशीलता का निर्धारण है. व्यावसायिक रूप से उपलब्ध कैलिब्रेटेड 4.56 और 6.10 की सीमाओं के बीच वॉन फ्रे बालों monofilaments पंजा को प्रोत्साहित करने के लिए उपयोग किया जाता है. उत्तेजना या proprioception के दृश्य की तरह अन्य संवेदी इनपुट स्पर्श सीमा उपायों उलझाना इतना प्रतिक्रियाओं का दृश्य या proprioceptive इनपुट के आधार पर अमान्य कर सकते हैं. त्वचा को छू monofilament के दृश्य को रोकने के लिए, हम केवल परीक्षण करने के लिए, जबकि चूहे अनाज खा रहा है. इस संज्ञानात्मक distracter, यह भी सुनिश्चित करता है कि सभी चूहों आराम के समान आधारभूत स्तर पर परीक्षण कर रहे हैं. बजाय स्पर्श इनपुट proprioceptive कारण प्रतिक्रियाओं से बचने के लिए, हम परीक्षण जहां monofilament लिफ्टों या पंजा चाल शामिल नहीं हैं.

उत्तर प्रदेश - नीचे दृष्टिकोण के लिए ए दशानुकूलन प्रक्रियाओं

  1. वर्तमान फल मोमीघर पिंजरे में मैं इतना चूहों की पहचान और खाद्य इनाम की तलाश है. चूहों को भोजन gentling या परीक्षण प्रक्रिया में किसी भी बिंदु पर वंचित होने की जरूरत नहीं है.
  2. चूहे परीक्षण पर्यावरण और प्रक्रियाओं को आदत हो सकता है एक बार वे घर पिंजरे में फल अनाज खाने के लिए तैयार हैं. दशानुकूलन 4 कम से कम 10 मिनट के सत्र के प्रत्येक लेकिन अधिक जरूरत हो सकती है पर होता है. दस मिनट के सत्र का उपयोग किया जाता है ताकि चूहों सत्र के अंत से पहले तृप्त नहीं हो जाते हैं.
  3. फल अनाज के तीन टुकड़े के साथ परीक्षण कक्ष में चूहा रखें. अतिरिक्त फल अनाज के एक करने के लिए एक समय के रूप में वे खा रहे हैं पर दो प्रदान करते हैं. जबकि तीसरे सत्र में चूहा खा रहा है, तार मंजिल के तहत हाथ आंदोलनों का उत्पादन इतना है कि चूहा अपने हाथ नीचे आंदोलन के आदी हो जाता है. चौथे सत्र पर, पंजा का तल लगभग एक बार सतह दस प्रस्तुतियों के एक कुल के लिए एक मिनट के लिए 5.18 monofilament लागू होते हैं. भोले चूहा इस उप सीमा उत्तेजना नहीं जवाब चाहिए.
  4. लंबाy अनाज के टुकड़े का सेवन, पेशाब और शौच, ठंड, और सौंदर्य व्यवहार की आवृत्ति. बर्फ़ीली व्यवहार दो तरीकों से होता है) चूहे आम तौर पर पीछे की दीवार के पास जमीन कम crouched है या परीक्षक से दूर का सामना करना पड़ रहा है और स्थिर रहता है; ख) चूहा पिंजरे के बीच में hunched है और आमतौर पर अपने दांत chatters . बर्फ़ीली व्यवहार समय की लंबी अवधि के लिए जारी रख सकते हैं.
  5. एक gentled चूहा है कि परीक्षण के लिए तैयार है लगभग लगातार 10 मिनट के लिए खा जाएगा. यह आसानी से पिंजरे में स्थानांतरित करने के लिए और फल अनाज अंतिम उपभोक्ता के बाद बहुत जल्दी की तलाश करेंगे. महत्वपूर्ण बात, चूहे खाने को नहीं रोक या तार मंजिल या monofilament पंजा के लिए आवेदन के तहत हाथ आंदोलनों से विचलित हो जाएगा.

उत्तर प्रदेश - नीचे दृष्टिकोण के लिए बी परीक्षण प्रक्रियाओं

  1. चूहे संकट vocalizations कि हमारे मानव कर्ण सीमा से ऊपर हैं. चूहे का परीक्षण करने के लिए जाने की प्रतीक्षा में एक अलग कमरे में रखा जाना चाहिए कि ताकि वे इन VOC नहीं सुन सकते हैंalizations.
  2. रीढ़ की हड्डी में चोट के साथ चूहों कि वॉन Frey बाल परीक्षण ऊपर - नीचे के लिए उपयुक्त हैं अंगों के साथ वजन असर का प्रदर्शन होगा. अंग कि चूहा समर्थन करने में असमर्थ हैं मज़बूती से किया जा सकता है क्योंकि monofilaments की आवेदन बाल झुकता से पहले पंजा चाल परीक्षण नहीं किया जा सकता है.
  3. परीक्षण कक्ष में फल अनाज के 2 या 3 टुकड़े के साथ एक चूहे रखें. चूहे प्रत्येक VFH आवेदन के दौरान खा रहे होंगे.
  4. जो HL पहला परीक्षण शुरू करने के लिए निर्धारित करने के लिए मरने रोल. यहां तक ​​कि संख्या सही पंजा का प्रतिनिधित्व करते हैं और अजीब संख्या बाईं प्रतिनिधित्व करते हैं.
  5. 5.18 monofilament परीक्षण सत्र के साथ शुरू करो. वापसी प्रतिक्रियाओं सामान्य और एससीआई चूहों में 4.56 से 6.10 के लिए होते हैं और 5.18 monofilament सीमा के बीच में गिर जाता है.
  6. लागू जबकि एक चूहा जमा देता है, crouches या खाने के लिए नहीं है एक monofilament. यदि परीक्षक इंतजार कर रहा है, कभी कभी इन शर्तों को हल करने और परीक्षण फिर से शुरू कर सकते हैं. यदि चूहा इन अनुप्रयोग में कुल समय व्यवहार को प्रदर्शित करता हैaratus 20 मिनट है, और अगले दिन शुरुआत से परीक्षण retest बंद. न निकालें, जबकि यह इन व्यवहार प्रदर्शित कर रहा है के रूप में इस घटना में वृद्धि हो सकती है चूहा. रुको जब तक चूहे इन पैटर्न के बाहर इसे से निपटने के लिए इन behaviors मजबूत से बचने से पहले टूट जाता है.
  7. यह झुकता है (चित्र 1 ए देखें) जब तक पैर पैड के बीच हिंद पंजा L5 तल चर्म - उच्छेदक monofilament टच. यह चिकनी स्थिर आवेदन एक दूसरे के बारे में तो यह त्वचा से दूर रखना चाहिए. बचें छू पैर पैड के किसी भी भाग के रूप में त्वचा की संवेदनशीलता को इन क्षेत्रों में बहुत कम है. यह एक स्पर्श एक परीक्षण का गठन किया.
  8. एक सकारात्मक प्रतिक्रिया तब होता है जब चूहा जल्दी से पंजा लिफ्टों monofilament से दूर है. वापसी समय monofilament निकाल दिया जाता है के द्वारा शुरू किया जाना चाहिए क्रम में पुष्टि करते हैं कि प्रतिक्रिया के monofilament आवेदन के साथ जुड़ा हुआ है.
  9. मो के बारे में जागरूकता के अन्य सबूत के लिए पशु देखोवोकलिज़ेशन जैसे nofilament स्पर्श, नीचे, या पिछड़े परीक्षण पंजा, पंजा, निरंतर पंजा वापसी चाट या कान हिल. उन्हें डेटा पत्रक पर ध्यान दें. जब इन व्यवहार पंजा वापसी के साथ होते हैं उत्तेजना के supraspinal धारणा के सबूत के रूप में कार्य करता है.
  10. अगर वहाँ एक सकारात्मक प्रतिक्रिया है, सबसे कम अगले monofilament लागू होते हैं. अगर वहाँ कोई जवाब नहीं (नकारात्मक) है, अगले उच्च monofilament कदम. आधारभूत फायरिंग retesting (अनुकूलन रोकने के) से पहले वापस आ संवेदी रिसेप्टर्स के लिए प्रत्येक monofilament आवेदन के बीच 30 सेकंड की अनुमति दें.
  11. हिंद पंजा सकारात्मक या नकारात्मक प्रतिक्रियाओं के आधार पर करने के लिए उच्च या कम monofilaments आवेदन जारी रखें जब तक आप 10 परीक्षणों है. अन्य हिंद पंजा पर फिर दोहराना. (उदाहरण डेटा पत्रक देखें).
  12. उच्चतम VFH कि proprioceptive इनपुट शुरू और पंजा उठाने के बिना परीक्षण किया जा सकता है 6.10 है. 6.45VFH और बड़ा है क्योंकि पंजा monof से पहले हटाया नहीं किया जाना चाहिएilament झुकता है. अगर वहाँ 6.10 पर कोई जवाब नहीं है तो अगले परीक्षण 6.10 फिर से लागू होगी.
  13. एक प्रतिक्रिया और voided किया जाना चाहिए और परीक्षण फिर से परीक्षण किया जाना चाहिए अगर निम्न में से कोई एक प्रोत्साहन आवेदन या पंजा वापसी के दौरान होता है:
    1. चूहा लगातार नहीं खा रहा है.
    2. चूहा VFH उत्तेजना से दूर पूर्व चाल monofilament के झुकने के लिए, यह असंभव है पता करने के लिए लागू शक्ति है कि वापसी प्रतिक्रिया elicits.
    3. पंजा VFH (या तो पहले या बाद VFH तुला है) स्पर्श उत्तेजना के अलावा में proprioceptive उपलब्ध कराने के द्वारा उठाया है.
  14. एक परीक्षण सत्र आम तौर पर दोनों hindlimbs के लिए कम से कम 15 मिनट में पूरा किया जा सकता है.

उत्तर प्रदेश - नीचे दृष्टिकोण के लिए सी. डाटा प्रोसेसिंग

  1. एक सफल परीक्षण प्रत्येक पंजा के लिए 10 अनुक्रमिक परीक्षण होगा.
  2. स्पर्श सीमा के मूल्य निम्नतम monofilament कि पंजा वापसी पर जी और उत्पादन हैई, प्रस्तुतियों और monofilament के 3 या अधिक प्रस्तुतियों की 50% दी जा (उदाहरण डेटापत्रक देखें, थ्रेसहोल्ड की परिक्रमा कर रहे हैं).
  3. केवल 2 कुल परीक्षण के साथ एक monofilament सीमा भी जब एक परीक्षण सकारात्मक है और एक नकारात्मक है के रूप में चयनित नहीं है. उत्तेजना के कई प्रस्तुतियों है कि बल को बेहतर प्रतिक्रियाओं के पैटर्न के संकेतक हैं.
  4. अगर कोई monofilament है कि परीक्षणों के कम से कम 50% पर सकारात्मक प्रतिक्रिया पैदा करता है, चूहे 6.45 का एक अंक दिया जाता है. इसका मतलब यह है कि चूहा उच्चतम यादृच्छिक मौका परे 6.10 का परीक्षण योग्य monofilament का पता नहीं लगा था. 6.45 का एक मूल्य दिया जाता है क्योंकि यह अगले monofilaments के परीक्षण योग्य सीमा से अधिक मूल्य का प्रतिनिधित्व करता है.
  5. ग्राम बल में सही है और छोड़ दिया पंजे के लिए सीमा मान परिवर्तित. ग्राम बल मूल्यों वॉन Frey बाल के सप्लायर द्वारा प्रदान किया जाएगा. . द्विपक्षीय चोटों से डेटा के लिए, दो पंजे के लिए सीमा ग्राम बल के साथ औसतन किया जा सकता है उपजएक अंक.

2. पृष्ठीय वॉन फ्रे परीक्षण

इस परीक्षण का उद्देश्य ऐसे गरीब मोटर नियंत्रण है कि वे ठेठ तल VFH तरीकों का उपयोग कर परीक्षण नहीं किया जा सकता है के साथ चूहों में स्पर्श संवेदनशीलता का निर्धारण करने के लिए है. यह quantifies के कितना स्पर्श शक्ति के लिए एक प्रतिकूल प्रतिक्रिया के उत्पादन के लिए आवश्यक है. Proprioceptive stimuli करने के लिए प्रतिक्रियाओं से बचने के लिए, हम परीक्षण जिसमें में पंजा VFH के द्वारा आवेदन के दौरान ले जाया जाता है शामिल नहीं हैं. इसके अतिरिक्त, हम परीक्षण में जो VFH निकल जाता है या पैर की पृष्ठीय सतह भर में ब्रश शामिल नहीं हैं.

पृष्ठीय वॉन Frey परीक्षण के लिए दशानुकूलन प्रक्रियाओं

  1. 10 मिनट प्रत्येक के चार सत्रों के लिए आधारभूत परीक्षण और रीढ़ की हड्डी में चोट से पहले कोमल चूहों.
  2. शिथिल में चूहे एक छोटा तौलिया लपेट तो hindquarters नीचे दिखाया गया (चित्रा 1 बी) के रूप में उजागर कर रहे हैं. हिंद पंजे हल्के सतह पर आराम के साथ एक मेज पर चूहा स्थिति. उसी का उपयोगसुखद नहीं बल्कि तंग लपेटो और एक चूहे के लिए पकड़. तालिका के किनारे पर अपने प्रकोष्ठ ताल्लुक़ चूहों के बीच परिवर्तनशीलता को कम कर सकते हैं.
  3. एक gentled चूहा है कि परीक्षण के लिए तैयार है जा रहा है कई मिनट के लिए लगातार तौलिया में आयोजित विरोध नहीं होगा, लेकिन आप फिर से लपेट 1 चूहा या दोनों हिंद पंजे के परीक्षण के दौरान 2 बार हो सकता है.

बी पृष्ठीय वॉन Frey परीक्षण के लिए परीक्षण प्रक्रियाओं

  1. हिंद जो अंग पहले की जाँच शुरू करने के लिए निर्धारित करने के लिए मर रोल. यहां तक ​​कि संख्या सही पंजा का प्रतिनिधित्व करते हैं और अजीब संख्या बाईं प्रतिनिधित्व करते हैं.
  2. शिथिल उजागर hindquarters छोड़ने तौलिया में चूहे लपेटो.
  3. स्पर्श उत्तेजना लागू किया जाता है के बाद ही चूहे शांत और कम से कम 10 सेकंड के लिए शांत है.
  4. 4.56 VFH के साथ शुरू, monofilament लंबरूप में संयुक्त (चित्र 1C) के बीच पहले और दूसरे प्रपदिकीय में पृष्ठीय सतह के लिए लागू लगभग 1 सेमी समीपस्थ. एक चिकनी Ste, में monofilament लागू करेंएक दूसरे अंतराल से अधिक ady ढंग से जब तक यह झुकता है तो इसे हटाने. यह एक स्पर्श एक परीक्षण का गठन किया.
  5. एक सकारात्मक प्रतिक्रिया तब होता है जब चूहा जल्दी उत्तेजना से पंजा दूर ले जाता है. गति की दिशा अक्सर पिछले अंग flexed किया है पहले पीछे या बाहरी है. वापसी समय monofilament निकाल दिया जाता है के द्वारा शुरू किया जाना चाहिए क्रम में पुष्टि करते हैं कि प्रतिक्रिया के monofilament आवेदन के साथ जुड़ा हुआ है.
  6. 4.56 monofilament अनुप्रयोगों के बीच कम से कम 30 सेकंड के साथ दो बार के क्रम में संवेदी "windup" को रोकने के लिए और संवेदी रिसेप्टर्स आधारभूत करने के लिए वापस आने के लिए retesting से पहले फायरिंग (अनुकूलन रोकने के) की अनुमति लागू करें.
  7. एक प्रोत्साहन परीक्षण VFH निकल जाता है अगर लागू किया जाना चाहिए और धीरे त्वचा grazes, एक brushing या एक उठाई संपर्क के बजाय एक झाड़ू के बल वितरण और अधिक बना.
  8. अगर वहाँ कम से कम 2 (यानी 1 या 0) 4.56 monofilament के लिए सकारात्मक प्रतिक्रिया कर रहे हैं, अगले बड़ा VFH में 3 लागू किया जाता हैबार में एक ही तरीके.
  9. इस तरह, 4.56 से 5.88 के माध्यम से उत्तरोत्तर बड़ा VFHs जब तक दो या दो से अधिक सकारात्मक प्रतिक्रिया हो लागू कर रहे हैं या जब तक सबसे बड़ी VFH तक पहुँच जाता है.
  10. पंजा वापसी दहलीज का निम्नतम VFH जो 3 परीक्षण के बाहर कम से कम 2 सकारात्मक प्रतिक्रिया elicits में है.
  11. अन्य पंजा पर दोहराएँ.
  12. एक परीक्षण सत्र आमतौर पर दोनों हिंद पंजे के लिए 15 मिनट में पूरा किया जा सकता है.

3. प्रतिनिधि परिणाम

एक सफल परीक्षण तत्काल लंबरूप में लागू VFH हिंद पंजा तेज संयुक्त (चित्रा 1C) से मध्य तल क्षेत्र (चित्र 1 ए) या ​​1 और 2 एन डी प्रपदिकीय 1 सेमी के बीच पृष्ठीय सतह पर वापसी में परिणाम होगा . इन प्रतिक्रियाओं के प्रत्येक हिंद पंजा के लिए स्पर्श सीमा प्राप्त मिलान कर रहे हैं. तीव्र एससीआई में पृष्ठीय VFH परीक्षण के स्पर्श थ्रेसहोल्ड से उत्कृष्ट निष्ठा से पता चला है साथ तल VFH थ्रेसहोल्ड प्राप्तघ में पुराने समय (चित्रा 2). स्पर्श थ्रेसहोल्ड में गिरावट तल या पृष्ठीय परीक्षण से प्राप्त वर्गीकृत एससीआई (3 3,5 चित्रा) के लिए होते हैं. यह अतिसंवेदनशीलता एससीआई के बाद 7 दिनों के रूप में जल्दी के रूप में प्रकट होता है और के 3-4,6 प्रयोग की अवधि के लिए बनाए रखा. जबकि एससीआई कठोर अनुशासन की एक सीमा पंजा का स्पर्श संवेदी थ्रेसहोल्ड को प्रभावित नहीं करते, थ्रेसहोल्ड में गिरावट आती है और अधिक गंभीर एससीआई (चित्रा 3) के लिए होते हैं. महत्वपूर्ण बात है, नीचे के स्तर परपीड़ा के विकास के सभी या कोई भी प्रतिक्रिया है कि तब होता है जब वहाँ घाव उपरिकेंद्र पर सफेद पदार्थ की अधिक से अधिक 60% की एक हानि है. (4 चित्रा 3).

स्पर्श थ्रेसहोल्ड क्षय और कम VFH बलों के लिए कृत्रिम प्रतिक्रियाओं का उत्पादन कर सकते हैं. कम से कम दो स्थितियों सीमा क्षय का उत्पादन कर सकते हैं - तेजी से एक से poking या jabbing ढंग से त्वचा को लागू करने VFH या प्रोत्साहन अनुप्रयोगों के बीच काफी लंबे समय से इंतज़ार कर रहे. कि विश्वास होनास्पर्श थ्रेसहोल्ड वास्तविक हैं, देखभाल प्रत्येक VFH का उपयोग कर एक ऐसी ही कम वेग दृष्टिकोण और interstimulus अंतराल के कम से कम 30 सेकंड का होना चाहिए लागू करने के लिए लिया जाना चाहिए. हम यह भी पता चला है कि खाने के व्यवहार सीमा 5 क्षय को कम कर देता है.

चित्रा 1
चित्रा 1 योजनाबद्ध और तस्वीर तल और पृष्ठीय वॉन Frey बाल परीक्षण (VFH) के के लिए VFH उत्तेजना का स्थान चित्रण. ए) तल VFH परीक्षण के लिए, वॉन Frey बाल मध्य तल लगभग 1 सेमी मध्य अँगुली का पोर (के रूप में hindpaw के तल सतह के चित्र में लाल बॉक्स द्वारा संकेत) के लिए एक धीमी गति में पीछे hindpaw लंब के रूप में लागू किया जाना चाहिए लगातार गति जब तक यह झुकता है. बी और सी लिए पृष्ठीय VFH तकनीक), चूहा शिथिल एक शल्य तौलिया में लिपटे के रूप में तस्वीर में दिखाया गया है. VFH पहली और दूसरी प्रपदिकीय approximatel के बीच में पंजा का पृष्ठीय सतह के लिए लागू किया जाता हैवाई एक संयुक्त करने के लिए समीपस्थ सेमी.

चित्रा 2
चित्रा 2. पृष्ठीय वॉन Frey बाल संवेदी थ्रेसहोल्ड मानक तल VFH के लिए सहसंबंधी. (N-44, Pearson के गुणांक = 0.503, पी <0.01, 0.67 = r2). धराशायी लाइनों cutoff सीमा allodynic सनसनी के लिए दिखाने के लिए या तो पृष्ठीय VFH या तल VFH तकनीक का उपयोग करते हुए और संकेत मिलता है कि एससीआई के बाद 7 दिनों पृष्ठीय VFH परीक्षण का उपयोग allodynic थ्रेसहोल्ड पुरानी नीचे स्तर तल VFH तरीकों द्वारा निर्धारित परपीड़ा की भविष्यवाणी.

चित्रा 3
3 आंकड़ा जल्दी पृष्ठीय वॉन Frey बाल संवेदी थ्रेसहोल्ड के बाद timepoints पर चोट कठोर अनुशासन भर allodynic और गैर allodynic के स्पर्श संवेदनशीलता का अनुमान है. तुलनीय संवेदी थ्रेसहोल्ड 7 दिनों के बाद एससीआई पृष्ठीय VFH और 28 दिनों के बाद एससीआई तल VFH उपायों के बीच हुई. उल्लेखनीय समानता के लिए हुआ एससीआई के महत्वपूर्ण परपीड़ा के साथ विस्तृत रेंज के लिए उदार गंभीर एससीआई (पी <0.05 अन्य सभी समूहों बनाम 1.1 मिमी विस्थापन) में उल्लेख किया है.

चित्रा 4
चित्रा 4 laminectomy (कोई एससीआई) प्राप्त चूहों और एससीआई समूहों के 6 सप्ताह में एससीआई के बाद hindpaw परपीड़ा दिखाने का प्रतिशत. परपीड़ा उदारवादी या गंभीर एससीआई (OSU ESCID युक्ति 0.9, 1.1, 1.25, 1.3 मिमी की हड्डी displacements) जबकि हल्के एससीआई के साथ चूहों (0.3, 0.5, 0.7 मिमी रीढ़ की हड्डी displacements) का प्रदर्शन स्पर्श उत्तेजना सामान्य प्रतिक्रियाओं के साथ चूहों में ही देखा गया था. प्रतिनिधि राज्याभिषेक रीढ़ की हड्डी वर्गों laminectomy के लिए घाव उपरिकेंद्र (रिहाई नियंत्रण) में माइलिन के लिए दाग, हल्के (0.5 मिमी विस्थापन), मध्यम (1.1 मिमी विस्थापन) और गंभीर (1.3 मिमी विस्थापन) रीढ़ की हड्डी contusions axonal की डिग्री दिखाने के शामिल हैं बख्शते है कि इस hypersensitivity के साथ जुड़ा हुआ है. (वेतनमान = 0.5 मिमी बार).

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चित्रा 5
5 चित्रा ऊपर नीचे वॉन Frey बाल परीक्षण के लिए एक नमूना डेटा पत्रक. बाल मूल्य और परिणाम (सकारात्मक या नकारात्मक) प्रत्येक परीक्षण के लिए दर्ज हैं. परीक्षण के supraspinal जागरूकता के संकेत नोट कर रहे हैं. परीक्षण के अंत में, प्रत्येक बाल मूल्य पर प्रतिक्रियाओं का मिलान कर रहे हैं. उदाहरण डेटा के लिए चयनित सीमा मूल्य की परिक्रमा की है.

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Discussion: तीव्र और जीर्ण चूहे में स्पाइनल कॉर्ड चोट के बाद स्पर्श संवेदी परीक्षण

VFH परीक्षण तरीके यहाँ प्रस्तुत दो परीक्षण मानदंड है कि संवेदनशील और चूहा एससीआई मॉडल में उपयोग के लिए मान्य हैं का प्रतिनिधित्व करते हैं. महत्वपूर्ण बात है, पृष्ठीय VFH परीक्षण तीव्रता हिंद मध्य वक्ष एससीआई के बाद जब चूहों hindquarters पर खड़ा करने में असमर्थ रहे हैं पंजे के स्पर्श सनसनी की वसूली के आकलन के लिए बनाया गया था. इस परीक्षण प्रतिमान भी जब चूहों क्षमता हासिल करने के लिए अपने वजन का समर्थन करने और ग्रीवा एससीआई के बाद हिंद अंग के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.

दो मानदंड का प्रदर्शन कैलिब्रेटेड VFH का उपयोग करने के लिए प्रत्येक हिंद पंजा का स्पर्श सीमा निर्धारित. अन्य विधियों के लिए एक सामान्य रूप से अहानिकर या सामान्य रूप से हानिकारक उत्तेजना या तो वापसी की आवृत्ति निर्धारित. हम पहले से पता चला है कि छोटे स्पर्श थ्रेसहोल्ड में सुधार पुरानी neuropathic दर्द और सामान्य स्पर्श सनसनी की उपस्थिति के बीच अंतर का प्रतिनिधित्व कर सकते हैं. इसलिए कि दर्द थ्रेसहोल्ड पिता प्राप्त प्रयोगात्मक परीक्षण तरीकों का उपयोगसंभावित उपचारात्मक उपायों की क्लिनिक में अनुवाद cilitate है.

सभी व्यवहार परीक्षण के साथ के रूप में, यह है कि व्यवहार 9 परीक्षण के परिणाम को प्रभावित कर सकते हैं परीक्षण पर्यावरण के भीतर confounders की संख्या कम से कम करने के लिए जरूरी है. इस प्रकार, यह महत्वपूर्ण है कि प्रत्येक परीक्षण सत्र के दिन के एक ही समय में एक ही तापमान और आर्द्रता नियंत्रित कमरे में, होता है. इसके अलावा, के बाद से चूहों एक अल्ट्रासोनिक सीमा में शब्दो में संवाद करते हैं, यह महत्वपूर्ण है कि परीक्षण करने के लिए जाने की प्रतीक्षा में चूहों को एक अलग कमरे में रखा जाता है जब तक उनके परीक्षण शुरू. लैंगफोर्ड एट अल 10 नाटकीय सबूत से पता चला है कि भोले जानवरों हानिकारक उत्तेजना को उजागर cagemate साक्षी के बाद दर्द का अनुभव. आगे स्पर्श संवेदी परीक्षण में परिवर्तनशीलता को खत्म करने के लिए, हम दौरान तल VFH परीक्षण संज्ञानात्मक विचलित sugared अनाज के रूप में उपयोग. ऐसा करने में, हम जानवर की प्रतिक्रियाओं को स्थिर. सीमा कम करने के लिए भर में क्षय होने की संभावना हैपरीक्षण जब एक विचलित जब एक 5 नहीं है की तुलना में प्रदान की जाती है. इस स्थिरीकरण होने की संभावना है hypervigilant और catastrophizing व्यवहार, जहां दर्द की धमकी के मस्तिष्क में भय और भावनात्मक केन्द्रों सक्रिय दो अग्रिम राज्यों के तड़के के कारण है.

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Disclosures: तीव्र और जीर्ण चूहे में स्पाइनल कॉर्ड चोट के बाद स्पर्श संवेदी परीक्षण

लेखकों का खुलासा करने के लिए के लिए कुछ भी नहीं है.

Acknowledgements: तीव्र और जीर्ण चूहे में स्पाइनल कॉर्ड चोट के बाद स्पर्श संवेदी परीक्षण

एनआईएच NS43798 (DMB), एनआईएच NS058138 F31 (MRD), p30 NS045758 (CBSCR), और अमेरिका के रुक दिग्गजों (DMB) 2451 और # 2707 (MRD).

Materials: तीव्र और जीर्ण चूहे में स्पाइनल कॉर्ड चोट के बाद स्पर्श संवेदी परीक्षण

Name Company Catalog Number Comments
Semmes-Weinstein Monofilaments Stoelting Co. 58011
Fish Breeder Box Any Supplier Hole drilled in side for cereal delivery
Elevated wire mesh (1/4" X 1/4" grid) Hardware Store
Elastic to hold fish breeder box in place Any Supplier
Sugared Cereal Grocery Store
Surgical Huck Towel 16"x 23" Medical Supply Store

References: तीव्र और जीर्ण चूहे में स्पाइनल कॉर्ड चोट के बाद स्पर्श संवेदी परीक्षण

  1. Cruz-Almeida, Y., Felix, E.R., Martinez-Arizala, A., & Widerstrom-Noga, E.G. Pain symptom profiles in persons with spinal cord injury. Pain Med. 10, 1246-1259 (2009).
  2. Hulsebosch, C.E. From discovery to clinical trials: treatment strategies for central neuropathic pain after spinal cord injury. Curr. Pharm. Des. 11, 1411-1420 (2005).
  3. Kloos, A.D., Fisher, L.C., Detloff, M.R., Hassenzahl, D.L., & Basso, D.M. Stepwise motor and all-or-none sensory recovery is associated with nonlinear sparing after incremental spinal cord injury in rats. Exp. Neurol. 191, 251-265 (2005).
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