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 JoVE Clinical and Translational Medicine

Ischemic घाव मॉडल के निर्माण के लिए एक सरल तकनीक

,

Department of Surgery, University of Louisville

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Cite this Article: Ischemic घाव मॉडल के निर्माण के लिए एक सरल तकनीक

Chien, S., Wilhelmi, B. J. A Simplified Technique for Producing an Ischemic Wound Model. J. Vis. Exp. (63), e3341, doi:10.3791/3341 (2012).

Abstract: Ischemic घाव मॉडल के निर्माण के लिए एक सरल तकनीक

एक वर्तमान मधुमेह घाव अनुसंधान में प्रमुख बाधा है कि सुरक्षित रूप से मधुमेह के पशुओं में इस्तेमाल किया जा सकता है एक इस्कीमिक घाव मॉडल की कमी है. दवाओं है कि गैर इस्कीमिक घावों में अच्छी तरह से काम करते हैं मानव मधुमेह घाव में काम नहीं करेगा क्योंकि vasculopathy एक प्रमुख कारक है कि इन घावों के उपचार hinders है हो सकता है. हम 2007 में एक खरगोश कान इस्कीमिक घाव एक न्यूनतम इनवेसिव सर्जरी तकनीक के द्वारा बनाई गई मॉडल का वर्णन एक लेख प्रकाशित. तब से, हम आगे आसान ऑपरेशन के लिए प्रक्रिया सरल है. एक कान पर तीन छोटे त्वचा चीरों संवहनी pedicles, कान के आधार से 1-2 सेमी पर किए गए थे. केंद्रीय धमनी ligated और तंत्रिका के साथ काट दिया. पूरे कपाल बंडल में कटौती करने के लिए और ligated, केवल दुम का शाखा बरकरार जा रही है. एक परिधीय चमड़े के नीचे सुरंग चीरों के माध्यम से किया गया था, चमड़े के नीचे के ऊतकों, मांसपेशियों, नसों, और छोटे जहाजों में कटौती. अन्य कान एक गैर इस्कीमिक नियंत्रण के रूप में इस्तेमाल किया गया था. चार घाव उदर पक्ष ओ पर किए गएच एक कान. इस तकनीक साथ 4 इस्कीमिक बनती तुलना के लिए और घाव एक जानवर में 4 गैर इस्कीमिक घाव पैदा करता है. सर्जरी के बाद, इस्कीमिक कान शांत और श्यावता अथवा नीलरोग संबंधी था, और कम आंदोलन और कान धमनी में नाड़ी की कमी से पता चला. इस्कीमिक कान की त्वचा तापमान 1-10 डिग्री सेल्सियस है कि कान पर सामान्य से कम है और इस अंतर को एक से अधिक महीने के लिए बनाए रखा गया था. कान उच्च ऊर्जा ऊतक फॉस्फेट सामग्री नियंत्रण कान से इस्कीमिक कान में कम थे. घाव भरने बार इस्कीमिक कान में अब कान गैर इस्कीमिक है जब एक ही इलाज में इस्तेमाल किया गया था में से थे. तकनीक अब 80 से अधिक खरगोश जिसमें 23 मधुमेह (2 सप्ताह से 2 वर्ष से लेकर मधुमेह समय) पर किया गया. कोई भी खरगोश के रूप में किसी भी खून बह रहा, संक्रमण, या त्वचा चीरों में टूटना शल्य जटिलताओं को विकसित किया है. मॉडल थोड़ा त्वचा विघटन, अब इस्कीमिक समय, और उच्च सफलता दर है, जब कई अन्य मॉडलों की तुलना के रूप में कई फायदे, है. इसमें CAn सुरक्षित रूप से कम प्रतिरोध के साथ पशुओं में इस्तेमाल किया जा, और भी अलग परीक्षण आवश्यकताओं को पूरा करने के लिए संशोधित किया जा सकता है.

Protocol: Ischemic घाव मॉडल के निर्माण के लिए एक सरल तकनीक

1. शारीरिक आधार

खरगोश कान एक इष्ट अध्ययन सामग्री घाव देखभाल के लिए जल्दी 20 वीं सदी के बाद से किया गया है. कान तीन संवहनी बंडलों (केंद्रीय, कपाल, और दुम का) द्वारा आपूर्ति की है, केंद्रीय बंडल सबसे बड़ा है, जबकि कपाल और दुम का बंडलों में जहाजों के आकार में भिन्नता है. कभी कभी, लांगुलिय धमनी अनुपस्थित हो सकता है 1 इन जहाजों के सभी कर रहे हैं आसानी से पृष्ठीय पक्ष पर पहचान के बाद कान के बाल काटे है (1 छवि). उदर पक्ष पर, बाहर त्वचा समीपस्थ जहाजों से रक्त की आपूर्ति नहीं प्राप्त करता है. तीन पृष्ठीय कान पर पोत बंडलों कई शाखाओं कि उपास्थि बाहर उदर त्वचा (छवि 2) को रक्त की आपूर्ति प्रदान करने के माध्यम से घुसना है. कुछ खरगोशों में, एक बहुत छोटे चमड़े के नीचे पोत उदर पक्ष है, जो उदर त्वचा की 1/3 से अधिक रक्त की आपूर्ति पर भी होता है. एक खुला घेर त्वचा चीरा में, एस्सेन हैtially एक उदर चीरा से कोई खून बह रहा है.

2. शल्य चिकित्सा की प्रक्रिया

  1. खरगोश तौला जाता है और कान, गर्दन के पीछे के साथ मुंडा कर रहे हैं.
  2. Buprenorphine (0.01 मिलीग्राम / किग्रा) के एक premedication सर्जरी से पहले आईएम एक घंटा दिया जाता है.
  3. संज्ञाहरण ketamine (50 मिलीग्राम / किग्रा) और (5 मिग्रा / किग्रा) Xylazine आईएम के एक मिश्रण से प्रेरित है.
  4. खरगोश एक हीटिंग पैड के साथ सर्जरी के दौरान सुरक्षित है, आँखें मरहम साथ रक्षा कर रहे हैं, और सर्जरी के दौरान अपने महत्वपूर्ण संकेत निगरानी कर रहे हैं.
  5. शल्य चिकित्सा के क्षेत्र aseptically एक शल्य साफ़ साथ तैयार है और इतना लिपटी है कि दो कान उजागर कर रहे हैं.
  6. एक कान इस्कीमिक प्रदान की गई है, जबकि अन्य कान एक जोड़ी गैर इस्कीमिक नियंत्रण के रूप में कार्य करता है.
  7. धमनियों और नसों के द्वारा तीन नाड़ी pedicles के पहचाने जाते हैं.
  8. # 15 ब्लेड का प्रयोग, तीन छोटे ऊर्ध्वाधर चीरों (1-1.5 सेमी) संवहनी pedicles पर बना रहे हैं और कान के आधार से 1-2 सेमी के बारे में,.
  9. केंद्रीय नस हैआसपास के ऊतकों से अलग और एक टांका यह त्याग के लिए घेरना करने के लिए प्रयोग किया जाता है. केंद्रीय धमनी 4-0 sutures के साथ ligated है और विभाजित है.
  10. साथ केंद्रीय तंत्रिका भी कट जाता है.
  11. पूरे कपाल डंडी ligated और विभाजित है.
  12. दुम का डंडी संरक्षित है.
  13. एक चमड़े के नीचे सुरंग 3 चीरों के माध्यम से किया जाता है. यह एक और एक चाकू और कैंची के साथ दबाना तेज dissections के साथ कुंद विच्छेदन के द्वारा पूरा किया है. चमड़े के नीचे के ऊतकों, मांसपेशियों, नसों, और छोटे संवहनी शाखाओं के सभी बंद कर रहे हैं. dermis के नीचे छोटे vasculatures के पूरी तरह विभाजित हैं. चमड़े के नीचे के ऊतकों के सभी ब्लेड के साथ उपास्थि के स्तर में कटौती कर रहे हैं.
  14. इसके अलावा तेज और कुंद dissections आधार साफ करने के लिए उपयोग किया जाता है, 5-10 मिमी के बारे में एक नंगे उपास्थि विस्तृत जा रही है.
  15. यह प्रक्रिया सभी चमड़े के नीचे संवहनी शाखाओं के बीच में आता है उन्हें तेजी से collaterals की स्थापना से रोकने के.
  16. खून बह रहा हैकम से कम. अगर कोई है, यह आसानी से धुंध संपीड़न द्वारा नियंत्रित किया जाता है विद्युतदहनकर्म के लिए आवश्यकता के बिना,.
  17. कान के अंदर त्वचा ज्यादा रक्त की आपूर्ति नहीं ले करता है और इस तरह की छिन्न नहीं है.
  18. 3 त्वचा चीरों 4-0 या 5-0 sutures का उपयोग कर बंद हो जाती हैं, और बाँझ धुंध के साथ कवर किया.
  19. 3 छोटे त्वचा चीरों और एक खुले सर्जरी की तुलना में बहुत कम त्वचा को नुकसान incurs में प्रक्रिया का परिणाम है.
  20. चार परिपत्र पूर्ण मोटाई त्वचा के घावों प्रत्येक कान के उदर पक्ष पर एक 6 मिमी स्टेनलेस स्टील पंच के साथ बनाया जाता है. घाव के बीच की दूरी कम से कम 20-30 मिमी है. पंच घाव अंदर त्वचा उपास्थि से निकाल दिया जाता है. perichondrium भी त्वचा के साथ या अलग से निकाल दिया जाता है. आधार जिस पर दानेदार बनाने का कार्य और epithelization जगह ले उपास्थि है, लेकिन है उपास्थि छिद्रित छवि (3) नहीं है.
  21. जब दोनों कान पर घाव पूरा कर रहे हैं, परीक्षण दवा दो घाव के एक तरफ करने के लिए लागू किया जाता है, जबकि नियंत्रण दवा appl हैदूसरी तरफ घाव आइईडी. एक occlusive ड्रेसिंग (TegaDerm, 3M) घाव साइट को कवर करने के लिए प्रयोग किया जाता है. यह शुष्क बनने से घाव को रोकता है.
  22. कान के नीचे के हिस्से में घाव आमतौर पर कान के शीर्ष पर घाव से तेजी से चंगा. घाव भरने की तुलना अध्ययन के लिए, यह दूसरे पक्ष पर दो घाव के साथ एक तरफ दो घाव, तुलना या ऊपर और नीचे घाव को अलग से तुलना करने की सिफारिश की है.

3. पश्चात की देखभाल

  1. एक Duragesic पैच वापस त्वचा से जुड़ी है Fentanyl (25 μg / घंटा) 2-3 दिनों के लिए संभव दर्द को कम करने के लिए जारी है.
  2. खरगोश भोजन और पीने के लिए मुक्त पहुँच की अनुमति दी जाती है.
  3. ड्रेसिंग परिवर्तन दैनिक बाहर किया जाता है. पुराने ड्रेसिंग हटा रहे हैं और घाव बाँझ कपास swabs के साथ साफ कर रहे हैं. तुलना के लिए डिजिटल तस्वीरें ले रहे हैं. नई ड्रेसिंग लागू कर रहे हैं, और घाव फिर TegaDerm के द्वारा कवर कर रहे हैं. नहीं संवेदनाहारी ड्रेसिंग चर्चा के दौरान की जरूरत हैanges.
  4. त्वचा तापमान दैनिक तुलना के लिए प्रत्येक कान पर मापा जाता है.
  5. अतिरिक्त कान रक्त परिसंचरण एक transcutaneous ऑक्सीजन तनाव मीटर या एक लेजर डॉपलर प्रवाहमापी के साथ मापा जा सकता है.
  6. sutures के एक सप्ताह के बाद हटाया जा सकता है.
  7. गैर मधुमेह पशुओं के लिए, कान के घाव का सबसे आम तौर पर 2-3 सप्ताह के भीतर ठीक है.

4. संभावित जटिलताओं और उन से कैसे बचें

यह न्यूनतम इनवेसिव सर्जरी सुरक्षित है और जटिलताओं दुर्लभ हैं. को छोड़कर के लिए एक संक्रमणकालीन पश्चात हल्के कान शोफ, हमारे खरगोश की कोई भी किसी भी गंभीर शल्य जटिलताओं पड़ा है. फिर भी, वहाँ इस प्रक्रिया के लिए कई संभावित जटिलताओं हैं:

  1. खून बह रहा है. खून बह रहा चीरों में होते हैं अगर रक्तस्तम्भन अधूरा है या अगर एक बड़ी रक्त वाहिका (जैसे मुख्य डंडी जहाजों में से एक) क्षतिग्रस्त हो सकता है. यह आसानी से सावधान विच्छेदन द्वारा बचा है. तीन प्रमुख संवहनी बंडलों, वहाँ एक करने के लिए इसके अलावा मेंकई छोटे चमड़े के नीचे संवहनी शाखाओं रहे हैं. जब चमड़े के नीचे सुरंग बना है, इन जहाजों में कटौती की जा रही हैं लेकिन कोई बांधने आवश्यक है. Hemostasis धुंध दबाकर बस हासिल कर सकते हैं. यह आसानी से कुछ मिनट के लिए सुरंग में धुंध के एक कोने में डालने से किया जाता है. चीरा बंद करने से पहले, सुनिश्चित करें कि कोई सक्रिय खून बह रहा मौजूद है.
  2. चीरा संक्रमण और स्फोटकता के इन जटिलताओं अगर चीरों को दूषित कर रहे हैं हो सकता है. इस कड़े सड़न रोकनेवाला तकनीक के उपयोग से बचा जा सकता है और कोई एंटीबायोटिक जरूरत है. हालांकि, अगर संक्रमण होती है, उचित जल निकासी और ड्रेसिंग परिवर्तन की जरूरत है.
  3. कान शोफ: संवहनी ligations और लसीका परिसंचरण के विघटन के कारण, हल्के कान edema कुछ दिनों के लिए उपस्थित हो सकता है. हालांकि, यह अपने आप गायब हो जाता है और कोई इलाज आवश्यक है.

5. प्रतिनिधि परिणाम

2007 के बाद से, हम अधिक से अधिक 70 खरगोशों में इस प्रक्रिया का इस्तेमाल किया है 23 मधुमेह एक सहित,imals. मधुमेह समूह में, सर्जरी अलग मधुमेह समय पर प्रदर्शन किया गया था: सात खरगोश था मधुमेह के समय के दो सप्ताह, उनमें से चार दो महीने की थी, दस 12 महीने था, और 2 मधुमेह के समय के 24 महीने की थी.

सर्जरी के बाद तुरंत, इस्कीमिक कान शांत और श्यावता अथवा नीलरोग संबंधी हल्के edema के साथ दिखाई दिया. सबसे महत्वपूर्ण कान धमनी केंद्रीय धमनी सामान्य कान में एक मजबूत नाड़ी था, लेकिन इस नाड़ी के इस्कीमिक कान में मौजूद नहीं था. कान आंदोलन को कम किया गया था, लेकिन पूरी तरह से गायब नहीं है. त्वचा सुरंग से अधिक स्पष्ट depressions से पता चला, लेकिन कोई ischemia या परिगलन किसी भी जानवर में पाया गया था (4 छवि).

एक डिजिटल (Omron Omron हेल्थकेयर, Bannockburn, आईएल, या फिशर साइंटिफिक, पिट्सबर्ग, फिलीस्तीनी अथॉरिटी द्वारा अवरक्त स्थान थर्मामीटर कश्मीर एक प्रकार से) थर्मामीटर के साथ सामान्य और इस्कीमिक कान की त्वचा के तापमान मापा गया. गैर इस्कीमिक और इस्कीमिक कान के तापमान के बीच अंतर 1 से 10 डिग्री सेल्सियस, w लेकरith सबसे 2-6 ° सी. छवि की सीमा के भीतर गिरने खरगोश. 5 30 खरगोशों से औसत तापमान अंतर से पता चलता है. शुरुआती दिनों में तापमान अंतर अधिक सर्जरी के बाद 15 दिन के बाद धीरे - धीरे कमी आई है, लेकिन अभी भी एक महीने के अंत में रखा गया था.

उच्च ऊर्जा ऊतक फॉस्फेट सामग्री कुछ पशुओं में मापा गया के बाद वे बलिदान किया गया. छह ऊतकों के नमूनों प्रत्येक कान से लिया गया था और उच्च ऊर्जा सामग्री फॉस्फेट HPLC द्वारा मापा गया. दोनों एटीपी और कुल ऊर्जा सांद्रता सामान्य कान में इस्कीमिक कान की तुलना में उच्च चित्र थे. 6 सर्जरी के बाद 23 दिन का बलिदान खरगोश की एक उदाहरण दिखाता है. मतलब ऊतक सामग्री एटीपी थे 0.349 ± 0.047 μMol / जी .237 बनाम सामान्य कान में (मतलब ± एसडी) ± 0.059 / में इस्कीमिक कान (पी 0.005 <) μMol जी. कुल ऊर्जा (एटीपी + ADP एएमपी) मतलब था 0.882 ± 0.137 / 0.556 बनाम सामान्य कान में छ μMol ± 0.115 μMol / ische में छ mic के कान (पी 0.001 <).

घाव भरने बार इस्कीमिक कान के लिए अब सभी समूहों में गैर इस्कीमिक कान (गैर मधुमेह या मधुमेह) के लिए हमेशा से चित्र थे. 7 ischemic और गैर इस्कीमिक कान पर घाव के 26 जोड़े के बीच चिकित्सा की तुलना से पता चलता है. हीलिंग बार 17 से 27 दिनों बनाम सामान्य इस्कीमिक कान (पी 0.001 =) पर (20.5 3.4 दिनों का मतलब ±) कान पर 13 से 18 दिनों (14.9 1.6 दिनों का मतलब ±) बताया गया. घाव वृद्ध और मधुमेह खरगोश में उपचार के समय बहुत लंबा है, खासकर जब मधुमेह के समय अधिक से अधिक 12 महीने किया गया था.

इन खरगोशों में किसी भी जटिलताओं के बिना सामान्य रूप से चंगा चीरों मधुमेह के समय के 24 महीनों के साथ खरगोश सहित, चित्रा 8. एक ऊतक विज्ञान चंगा चमड़े के नीचे सुरंग जिसमें मांसपेशी अनुपस्थित है और तंतुमय ऊतक के द्वारा प्रतिस्थापित दिखा नमूना है. हालांकि, त्वचा बरकरार है.

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चित्रा 1. खरगोश कान तीन संवहनी बंडलों द्वारा आपूर्ति की है. केंद्रीय सबसे बड़ा है, कपाल छोटा है, और दुम का बंडल छोटी है. इन जहाजों को आसानी से सतह पर देखा जाता है के बाद कान के बाल काटे है.

चित्रा 2
चित्रा 2. तीन पृष्ठीय कान नहीं ही पृष्ठीय त्वचा के लिए, लेकिन यह भी मर्मज्ञ वाहिकाओं के माध्यम से उदर त्वचा के लिए रक्त की आपूर्ति पर पोत बंडलों. तीर उपास्थि मर्मज्ञ वाहिकाओं के माध्यम से पता चलता है. इनसेट से पता चलता है इन जहाजों की धारा पार.

चित्रा 3
चित्रा 3. चार 6 मिमी घाव कान की उदर पक्ष पर बनाया जाता है, और perichondrium भी निकाल दिया जाता है. आधार जिस पर दानेदार बनाने का कार्य और epithelization जगह ले उपास्थि है, लेकिन है उपास्थि छिद्रित नहीं है. 3 smal एल त्वचा चीरों बहुत छोटे से त्वचा के विघटन के साथ बंद हो जाती हैं.

चित्रा 4
चित्रा 4. के बाद त्वचा चीरों बंद हो जाती हैं, चमड़े के नीचे सुरंग पर दांतेदार बनाना स्पष्ट रूप से देखा जाता है.

चित्रा 5
5 चित्रा 30 खरगोशों में सामान्य और इस्कीमिक कान के बीच औसत त्वचा तापमान अंतर. जल्दी अंतर पर्वतमाला से 7 डिग्री सेल्सियस डिग्री सेल्सियस सर्जरी के बाद 10. अंतर धीरे - धीरे कम हो जाती है, लेकिन एक महीने के अंत में अभी भी बनाए रखा.

चित्रा 6
चित्रा 6. कान ऊतक उच्च ऊर्जा फॉस्फेट सामग्री के इस्कीमिक कान में कम के रूप में सर्जरी के बाद 23 दिनों (पी <0.001) पर गैर इस्कीमिक कान के लिए तुलना कर रहे हैं.

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7 चित्रा घाव भरने समय गैर इस्कीमिक कान (26 घाव प्रत्येक) की तुलना में इस्कीमिक कान में अब है. चिकित्सा घायल ऊतक अखंडता की बहाली, यानी, घाव साइटों की पूरी reepithelialization के रूप में परिभाषित किया गया है.

संख्या 8
संख्या 8 प्रोटोकॉल नमूना दिखा कान भाग युक्त चमड़े के नीचे सुरंग. चंगा ऊतक सामान्य कान की तुलना में पतली है, मूल कंकाल की मांसपेशी अनुपस्थित है और तंतुमय ऊतक के द्वारा बदल दिया है. हालांकि, त्वचा बरकरार है.

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Discussion: Ischemic घाव मॉडल के निर्माण के लिए एक सरल तकनीक

मधुमेह अमेरिका, 2,3 में 23,6 लाख लोगों को प्रभावित करता है और इन रोगियों के 15-20% अपने जीवनकाल में पैर अल्सर विकसित, अधिक से अधिक 25 अरब डॉलर की वार्षिक उपचार लागत में 4,5 3,6 हालांकि, यहां तक कि सबसे अच्छा उपलब्ध है. उपचार प्राप्त करने और केवल एक 50% उपचार दर इस बार अस्थायी है, पुनरावृत्ति के रूप में मधुमेह रोगियों में 66% के रूप में उच्च दर के साथ 7 3,6. जब अल्सर मधुमेह के रोगियों, संक्रमण और विच्छेदन नाटकीय रूप से वृद्धि के रूप में प्रमुख जटिलताओं में पाए जाते हैं. ड्रेसिंग उत्पादों के हजारों की व्यापक अनुसंधान और विकास के लगभग एक सदी के बावजूद, अभी तक कोई भी कारगर साबित हो गया है. पहले पुराने घाव का उपचार का वर्णन कागजात में बयान दिया था कि "1830 में पुरानी अल्सर बड़े अल्सर 1860 में हो जाएगा," बनाया है, आज भी लागू होता है 8 घाव अध्ययन के लिए एक उपयुक्त पशु मॉडल ढूँढना एक बड़ी चुनौती के रूप में वैज्ञानिकों के लिए किया गया है. चिकित्सकों के लिए के रूप में अच्छी तरह से. कई पशु मॉडल बनाया गया हैया घाव देखभाल के अध्ययन के लिए सुझाव दिया है, लेकिन एक घाव एक पुरानी गैर चिकित्सा मानव घाव करने के लिए तुलनीय मॉडल nonexistent है 9,10. इसका कारण यह है कि सभी मानव मधुमेह घाव ऊतक ischemia के एक संयोजन है, पुरानी hyperglycemia, oxidative तनाव, न्युरोपटी है, और जीवाणु उपनिवेशण. Ischemia मधुमेह पैर अल्सर के कारण जल्द से जल्द नहीं हो, लेकिन यह इन घावों, 11 की दृढ़ता के लिए मुख्य कारण है हो सकता है. यह क्योंकि ऊतक कि खून नहीं करता है में घाव ठीक नहीं है, जबकि वे लगभग हमेशा के ऊतकों में ठीक है कि बड़े पैमाने पर bleeds 12-15 दुर्भाग्य से, वर्तमान में इस्तेमाल किया जानवर इस्कीमिक घाव मॉडल से कोई भी अभी तक मधुमेह पशुओं में किया गया है सफलतापूर्वक इस्तेमाल किया है, और इस घाव दवाओं के परीक्षण के लिए एक प्रमुख बाधा बनाया है. BFGF के रूप में वृद्धि कारकों, के छोटे पैमाने पर नैदानिक ​​परीक्षणों से पता चला है उन्हें अत्यधिक प्रभावी हो, लेकिन वे, hypoxic चमड़े का अल्सर मॉडल में अप्रभावी कर रहे हैं 16,17.

हम एक कला प्रकाशित2007 एक इस्कीमिक खरगोश के कान घाव मॉडल है कि सफलतापूर्वक मधुमेह जानवरों में इस्तेमाल किया गया था के वर्णन में ICLE 18. तकनीक कुछ हद तक कठिन है क्योंकि कपाल neurovascular बंडल का एक सावधान विच्छेदन की जरूरत है के लिए प्रदर्शन है. क्योंकि इन जहाजों छोटे हैं, उनके पश्चात की वसूली के लिए योगदान नगण्य है. तब से, हम पूरे कपाल neurovascular बंडल काटने से प्रक्रिया सरल है. की प्रक्रिया में जो कपाल बंडल संरक्षित किया गया था के साथ तुलना करने के लिए, वहाँ घाव भरने या कान जटिलताओं में कोई अंतर नहीं था. 1): यह संशोधित न्यूनतम इनवेसिव प्रक्रिया निम्नलिखित फायदे हैं. यह आसान, सुरक्षित है, और एक उच्च सफलता दर है, जो दर्द और जानवरों के लिए पीड़ित को कम कर देता है. कोई शल्य चिकित्सा जटिलता से इन पशुओं में हुई है मधुमेह के समय के 24 महीनों के साथ कुछ खरगोश सहित, 2). यह एक लंबे इस्कीमिक समय है. माप एक महीने के अंत में एक त्वचा तापमान अंतर संकेत दिया. यह संभव है कि वेंई देरी संपार्श्विक गठन में ऊतक वापस परिणाम suturing की आवश्यकता के बिना व्यापक उपचर्म ऊतक विच्छेदन, 3). यह बहुत लचीला है. क्योंकि तीन संवहनी बंडलों शल्य नियंत्रण के तहत सभी कर रहे हैं, इस मॉडल को आसानी से विभिन्न पुराने घावों (नीचे देखें) की नकल करने के लिए किया जा सकता है, 4). अन्य स्थानों में त्वचा के विपरीत, इन घाव घाव बिस्तर में कोई बाल follicles है. चिकित्सा घाव किनारे पूरी तरह से है, 5). इस प्रक्रिया बनती तुलना के लिए एक ही खरगोश में 4 इस्कीमिक घाव और 4 गैर इस्कीमिक घाव बनाता है, जिससे व्यक्ति विविधताओं को कम करने, 6). त्वचा का संकुचन कम से कम है. जबकि खरगोश कान धर्तलीय त्वचा कुछ गतिशीलता है, उदर त्वचा उपास्थि द्वारा splinted है, फिर से किसी जख् के ऊपर उपकला की वृद्धि हो जाने से जख्म का भर जाना और अधिक सटीक अध्ययन की अनुमति, 7 19). खरगोश आम तौर पर कर रहे हैं डरपोक और nonaggressive. Anesthetics लोग घायल हो गए सर्जरी के दौरान ही की जरूरत है. 8), यह किसी भी संभावित कारकों है कि घाव भरने की प्रक्रिया को प्रभावित कर सकता है कम कर सकते हैं. यह भी देखें हैकिफायती y 8 घाव क्योंकि एक खरगोश में बनाया जा सकता है. 9). कुछ पिछली रिपोर्टों के विपरीत, हम या तो गैर मधुमेह या मधुमेह सर्जरी के बाद अधिक से अधिक 24 महीने के लिए मनाया खरगोशों में किसी भी hypertrophic निशान गठन नहीं देखा है. तंत्र अभी भी स्पष्ट नहीं है.

कई तरीकों के लिए आपरेशन को संशोधित करने के लिए विभिन्न परीक्षण आवश्यकताओं को पूरा करने के लिए ले जाया जा सकता है. ) 1. इस्कीमिक समय के आगे विस्तार. हमारे वर्तमान परिणाम बताते हैं कि त्वचा तापमान अंतर कम से कम एक महीने बनाए रखा है. यदि कुछ निष्क्रिय सामग्री (जैसे कि सिलिकॉन के रूप में) सुरंग को भरने के लिए, संपार्श्विक गठन में देरी के लिए प्रयोग किया जाता है, इस्कीमिक समय बढ़ाया जा सकता है. हम कुछ खरगोशों में इस तकनीक की कोशिश की और बहुत कम ऊतक प्रतिक्रिया मिल गया है, 2). कुल कान वितंत्रीभवन. हमारी तकनीक दो नाड़ी pedicles के (केंद्रीय और कपाल) में नसों में कटौती, दुम का शाखा बरकरार जा रही है. यदि कुल घाव वितंत्रीभवन को जरूरत है, दुम का डंडी में तंत्रिका शाखा भी हम के रूप में कटे जा सकता हैकरूँगा, 3). यदि घाव जीवाणु टीका जरूरत है, यह घाव को लागू किया जा सकता है. क्योंकि घाव के आधार कान उपास्थि है, यह संक्रमण और वेध पाने की क्षमता है. उपास्थि जटिलताओं को रोकने के लिए, जीवाणु टीका तो उपास्थि दानेदार बनाने का कार्य ऊतक के द्वारा कवर किया जाता है के बाद लागू किया जाना चाहिए. यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि जीवाणु संक्रमण आसानी से बना है और यह काफी उपचार समय का विस्तार कर सकते हैं. हालांकि, तीव्र घाव में biofilm की स्थापना और अधिक कठिन है. नैदानिक ​​सामग्री और प्रौद्योगिकी राज्य के-the-कला का प्रयोग, biofilm तीव्र घाव का केवल 6% में स्थापित किया है, जबकि पुराने घावों में घटना दस गुना ज्यादा (60%) है दिखाया गया है; 20 हमारा अनुभव से पता चला है कि जब मधुमेह बार दो साल तक पहुँचने, इस्कीमिक कान पर घाव की सबसे सख्त सड़न रोकनेवाला तकनीक के साथ भी संक्रमित हो सकते हैं. ) 4. दबाव अल्सर अक्सर केंद्रीय या परिधीय तंत्रिका सनसनी के नुकसान के कारण क्षति के साथ रोगियों में होते हैं. इस मॉडल का उपयोग, एक pressuफिर अल्सर भी विभिन्न संपीड़न विधियों द्वारा बनाया जा सकता है 21,22.

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Disclosures: Ischemic घाव मॉडल के निर्माण के लिए एक सरल तकनीक

इस अध्ययन में शामिल ब्याज की कोई वित्तीय संघर्ष है.

Acknowledgements: Ischemic घाव मॉडल के निर्माण के लिए एक सरल तकनीक

यह अध्ययन हिस्सा में को एनआईएच 1RO1DK74566 और 1RO1AM52984 अनुदान द्वारा समर्थित किया गया है. लेखकों के लिए सर्जरी के दौरान सुश्री जैकलिन म्कार्टी, RRC में उसकी मदद के लिए धन्यवाद, डीआरएस चाहते हैं. Jianpu वांग और Harshini सरोजिनी कुछ खरगोश, उसकी ऊतक विज्ञान के काम करने के लिए डा. Rong वान, सुश्री मिंग ली और उसे उच्च ऊर्जा फॉस्फेट की माप HPLC के लिए शल्य चिकित्सा और पश्चात की देखभाल में उनकी मदद के लिए.

Materials: Ischemic घाव मॉडल के निर्माण के लिए एक सरल तकनीक

For monitoring during surgery
  1. A heating pad to maintain normal temperature.
  2. A transcutaneous oxygen monitor.
  3. A temperature monitor.

For surgery
  1. A #3 knife with #15 blade.
  2. Two pairs of forceps (one for skin and another for other soft tissues).
  3. 2-3 pairs of small clamps.
  4. One or two pairs of micro scissors (for tissue cutting).
  5. One pair of small scissors (for cutting sutures).
  6. A needle holder.
  7. A few stainless steel punches (for making wounds).

References: Ischemic घाव मॉडल के निर्माण के लिए एक सरल तकनीक

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Ask the Author: Ischemic घाव मॉडल के निर्माण के लिए एक सरल तकनीक

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