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Biomedical Sciences and Pharmacy, The University of Newcastle
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Murtha, L., McLeod, D., Spratt, N. Epidural Intracranial Pressure Measurement in Rats Using a Fiber-optic Pressure Transducer. J. Vis. Exp. (62), e3689, doi:10.3791/3689 (2012).
上昇した頭蓋内圧(ICP)は、脳卒中、外傷性脳損傷と心停止を含む虚血性脳損傷のいくつかの形で重大な問題である。この上昇は、テント切痕ヘルニア1,2,3,4、中脳圧迫、神経学的欠損または脳梗塞2,4の増加という形で、さらに神経損傷の原因になります。現在の治療は、しばしば臨床の現場5,6,7に昇格したICPを制御するには不十分である。したがって、基本的なメカニズムの理解を促進すると高架ICPの新しい治療法を開発するために動物モデルでのICP測定の正確な方法が必要である。
両方の臨床および実験的な設定ではICPは直接測定せずに推定することはできません。 ICPのカテーテルの挿入のいくつかのメソッドは、現在存在しています。これらの脳室内カテーテルは、ヒト8 ICP測定の臨床"ゴールドスタンダード"となっています。このメソッドはINV頭蓋骨と脳組織を介してカテーテルのインスツルメンテーションの部分的な除去はolves。その結果、室内カテーテルは6から11パーセント9の感染率を持っています。このため、硬膜下血腫と硬膜外cannulationsは、虚血性損傷の動物モデルにおいて好ましい方法となっています。
11,12,13,14,15を様々なICP測定技術は、動物モデルに適応されており、これらのうち、液体で満たされたテレメトリカテーテル10およびソリッド·ステート·カテーテルは、最も頻繁に使用されています。液体で満たされたシステムでは、偽のICP測定値で、結果の行の気泡を開発する傾向がある。ソリッド·ステート·プローブ( 図1)この問題を回避する。さらなる問題は、実験結果を変える可能性の脳損傷を引き起こすことなく、頭蓋骨の下や脳室にカテーテルフィッティングです。したがって、我々は硬膜外腔と連続してICPカテーテルを配置する方法を開発し、でもねを回避しているEDは、頭蓋骨と脳の間に挿入することができます。
圧力センサーの位置が(カテーテルの非常に先端で)このモデルでは、高忠実度ICP信号を生成することが判明したので、光ファイバ圧力カテーテル(420LP、SAMBAセンサ、スウェーデン)は硬膜外の場所でICPを用いて測定した。我々の方法で使用することができる同様の光ファイバ技術の13の他のメーカーがあります。信号が監視ネジの存在によって湿らされるようカテーテル先端の側に位置する圧力センサを持つ代替固体カテーテルは、このモデルは適していません。
ここでは、ICPを測定するための比較的簡単で正確な方法を提示します。このメソッドは、ICP関連動物モデルの広い範囲で使用できます。
1。頭蓋骨の浸透
2。ネジの修正および挿入
3。頭蓋内の圧力トランスデューサの挿入
4。気密シールを形成
5。頭蓋内の圧力トランスデューサの取り外しおよび再挿入
6。代表的な結果
図5は、10秒以上ICPの測定値を表現したものです。ベースラインでは、Wistar系ラットの平均ICPは6 mmHgである。 図5に示すように短い周期のイベントは、血圧脈波を反映しています。より長い周期のイベントは、換気のイベントを示します。 SAMBAセンサー3-4 mmHgで1〜2 mmHgのパルス振幅の換気の振幅を反映していることに注意してください。
各実験ではSAMBAセンサの位置を検証するために、ICPのトレースは腹部の圧迫や無呼吸の期間などの呼吸器イベントへの応答性をテストする必要があります。腹部の圧縮を図7に描かれています。
無呼吸の期間は、( 図8に示すように)ほとんどの実験INVOで観察される自発的に動物を呼吸lving。これらのイベントは、呼吸器(ダイヤフラムトランスデューサ)と動脈圧のトレース上での呼吸変形の有無によって生理的なレコードで識別されます。 ICPトレースで同等の変更は、ICPのプローブの位置を検証します。
図9は、耳·バー(ステップ4.6)を除去した後の典型的なICPのトレースを示しています。頭蓋内容積、したがって増加したICPの頭蓋骨と、その結果混乱のわずかな圧縮工程1.2結果の耳棒の挿入。耳·バーの除去で5 mmHgの - センサーが正しく配置されている場合、ICPは、少なくとも4をドロップします。
組織学的分析は、圧力センサとネジのすぐ下皮質領域への損傷をチェックするために使用されることがあります。外傷性と非外傷性スクリュー挿入の例を図4に描かれています。
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図1。流体は、Vs SAMBA ICPトレースを満たしていた。ICPがSAMBA光ファイバカテーテル( 上 )と流体の満たされたカテーテル( 下 )を経由して同時に記録した。平均ICPの値が両方のトレースで類似していたしかし、流体を充填カテーテル信号は、特に明確な呼吸と動脈圧の光ファイバカテーテルで見られた波形と比較して湿らせた。

図2。頭蓋内圧カテーテルの挿入の手順。ラットの頭部は耳のバーや麻酔ノーズコーン[A]と定位フレームに固定されました。穴は、直径約2mm、右頭頂骨[B]に掘削された。シャフト0.7mmの穴と2×4 mmネジが挿入された[C]。アンカーネジは、左頭頂骨と頭蓋骨と歯科用セメントで覆われ、手術部位に挿入した。 ICP cathetER( 黒矢印 ) は 、ねじ穴とコーキング材( 白い矢印 )[D]で作られた気密シールを挿入した。主食(スケール)= 12×5 mmである。

図3。ネジ穿頭孔の向きを監視します 。頭蓋骨は、ラムダ( 黒アスタリスク )とブレグマ( 白アスタリスク )と横方向の2ミリメートルとブレグマから後方2mmのドリル穴を見つけるために結合組織からクリアされました。穴は、硬膜と軟膜血管( 黒矢印 )をそのまま残し破片がクリアされました。主食(スケール)= 12×5 mmである。

図4。 24時間ICPモニタリングねじのインスツルメンテーション後のラットの脳の組織。Haemotoxylinとエオシン染色、6μmの冠状断面。左:非外傷性のネジ挿入。右:外傷性ねじの挿入、蒼白の領域は脳卒中損傷部位( 矢印 )に似た細胞の形態と損傷した組織を示しています。 4xの目的で挿入します。

図5。典型的なICPトレースします。パルス圧力波は、振幅が小さい(*)のイベントで描かれている。換気は長い周期(#)のイベントに反映されます。

図6。 ICPプローブ挿入図 。図では、サポートネジ( 右 )とネジ( 左 )にコーキング材コーティングされたICPプローブの配置を示しています。

図7。腹部の圧縮。腹部は一時的にICP信号の可能性を検証する(〜1秒)圧縮された。減少し脳の静脈還流の圧縮の結果、頭蓋内容積を増加させるため、ICPを増加させる。動脈圧(PA)は初期のICP上昇した後にのみ低下した。

図8。 Apnoeaの期間。呼吸の一時停止は、ダイアフラムトランスデューサトレース、動脈圧(Pa)とトレースとICPのトレースに反映されます。

図9。耳バーの取り外し。ICPは定位フレーム耳·バーの除去と削除する必要があります。
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ここで紹介する手順は、頭蓋内圧の非常に敏感かつ正確に記録することができます。この低侵襲技術は、硬膜外腔ではなく、脳組織または心室の圧力センサを配置することによって、重要な脳外傷を避けることができます。
重要な手順は次のとおりです。1)頭蓋骨を介して掘削 - ケアはピアス硬膜や脳組織の基礎となる損傷しないように注意しなければなりません。2)コーキング材で密封性を確保 - 任意の漏れがある場合は、ICPのトレースができなくなります信頼できる。 ICPセンサが適切に配置されている場合は、読書は、ICPでなく、呼吸や心拍数だけでなく、正確なトレースを提供します。インスピレーションで、より多くの否定的な胸腔内の圧力が下流の血管内圧、より大きな圧力勾配を作成し、脳の静脈還流を増加さが軽減されます。 ICPの低下で脳血液量の結果でその後の還元。逆に、expi配給は、下流の静脈圧を増加させ、ICPを増加させます。簡単に言うと、一秒腹部圧迫はバルサルバ法と同様の刺激をシミュレートするために、すべての実験動物で行うことができます。適用される場合には、この生理的な刺激は脳の静脈還流を減少させ、ICPの一過性上昇をもたらすことが知られています。腹部圧迫法(ICPでない上昇)への応答の欠如は、中空のネジの気密シールや閉塞のリークを示唆している。リークが明らかである場合は、コーキング材料の第3層は、気密シールを得るために、センサの周囲に適用されるかもしれません。コーキング材が光ファイバを圧縮しないことに注意してくださいので、追加の層は、十分なシール性を確保します。ネジがブロックされている場合は、コーキング材とセンサーを取り外し、滅菌生理食塩水と手順を繰り返します3.2で軽くネジをフラッシュ - 4.5。 ICPトレースがまだ弱い場合には、光ファイバケーブルをチェックする必要があります。これがeの場合はSAMBA光ファイバケーブルは、10cmの曲げ半径に耐えることができますICPトレースが損なわれますxceeded。
硬膜は頭蓋骨に非常に近接して、ステップ1.8に頭蓋骨を取り外す際に最大の注意を払う必要がある。この技法を学習するとき、硬膜が誤ってピアスすることができ、脳脊髄液(CSF)は、硬膜外腔に、モニタリングのネジにリークが発生します。頭蓋が封印されているため、硬膜内の小物は、しかし、ICP測定に影響を与えません。
このメソッドは、麻酔下の動物での使用に適しています、しかし、それは覚醒動物でテザーシステムを使用して録音を行うために容易に変更可能です。説明した手法は、ICP測定の多くのモデルに使用される可能性を秘めています。この方法で使用されている光ファイバーは、電磁フィールドの任意のフォームに鈍感であるため、MR、CT、PETやSPECTなどのイメージング技術と互換性があります。時間の経過記録と測定の信頼性の品質がカントーに優れているSEは、市販の液体で満たされたカテーテルシステムを用いて得られた。
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我々は、開示することは何もありません。
このプロジェクトは、国立脳卒中財団、ハンター医学研究所(HMRI)と国立保健医療研究評議会(NH&MRC)、オーストラリアによって資金を供給された。彼らの技術的専門知識のためのニューカッスル大学の保健ワークショップスタッフの学部に感謝します。
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Dental Cement Monomer | Henry Schein | VX- SC500MLL | |
| Dental Cement Polymer | Henry Schein | VX- SC1000GCL4 | |
| Dental drill burr- size 12 | Gunz Dental | EL104S001012/10 | |
| Dental drill burr- size 6 | Gunz Dental | EL104S001006/10 | |
| Metal Screw | Hardware Store | 2 x 4 mm, hexagonal head. (laboratory-modified by 0.7 mm hole drilled through shaft) | |
| SAMBA Control Unit | Harvard Apparatus | 50433102 | |
| SAMBA Sensor | Harvard Apparatus | 50461122 | 420 LP, 15cm bare fibre, radio-opaque coating |
| Silagum AV Mono caulking material | Gunz Dental | RG 9152 | Vinylpolysiloxanes, hydrogen polysiloxanes, filler, pigments, additives, plantinum catalyst |
| Terg-A-Zyme | Alconox, Inc. | 1304 | Enzyme-active powdered detergent |
Chris Hall
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ReplyPosted by: Chris H.July 11, 2012, 11:18 AM