Submit
Browse  

The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.

Recommend to Librarian

Automatic Translation

This translation into Turkish was automatically generated through Google Translate.
English Version | Other Languages

 JoVE Immunology and Infection

Ixodes scapularis Keneler gelen tükürük, Tükürük Bezi ve hemolimf Koleksiyonu

1, 2, 1, 2, 2, 1

1Microbiology and Pathogenesis Activity, Bacterial Diseases Branch, Division of Vector-Borne Diseases, National Center for Emerging and Zoonotic Infectious Diseases, Centers for Disease Control and Prevention, 2Tick-Borne Diseases Activity, Bacterial Diseases Branch, Division of Vector-Borne Diseases, National Center for Emerging and Zoonotic Infectious Diseases, Centers for Disease Control and Prevention

You must be subscribed to JoVE to access this content.

This article is a part of   JoVE Immunology and Infection. If you think this article would be useful for your research, please recommend JoVE to your institution's librarian.

Recommend JoVE to Your Librarian

Current Access Through Your IP Address

You do not have access to any JoVE content through your current IP address.

IP: 50.16.17.90, User IP: 50.16.17.90, User IP Hex: 839913818

Current Access Through Your Registered Email Address

You aren't signed into JoVE. If your institution subscribes to JoVE, please or create an account with your institutional email address to access this content.

 

Video Article Chapters

Cite this Article: Ixodes scapularis Keneler gelen tükürük, Tükürük Bezi ve hemolimf Koleksiyonu

Patton, T. G., Dietrich, G., Brandt, K., Dolan, M. C., Piesman, J., Gilmore Jr., R. D. Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks. J. Vis. Exp. (60), e3894, doi:10.3791/3894 (2012).

Abstract: Ixodes scapularis Keneler gelen tükürük, Tükürük Bezi ve hemolimf Koleksiyonu

Keneler dünya çapında bulunur ve birçok kene kaynaklı hastalıklar insanlarda eziyet edilir. Keneler, Lyme hastalığı ve kene kaynaklı tekrarlayan ateş (Borrelia spp.), Rocky Mountain Benekli Ateşi (Rickettsia rickettsii), Ehrlichiosis (Ehrlichia chaffeensis ve E. equi), anaplazmoz (Anaplasma phagocytophilum), ansefalit (kene neden patojenler için vektörleri kaynaklı ensefalit virüsü), babesiosis (Babesia spp.), Kolorado kene ateşi (Coltivirus) ve tularemi (Francisella tularensis) 1-8. Düzgün konak içine aktarılacak bu enfeksiyon ajanları farklı şekilde, gen ekspresyonu düzenleyen kene proteinleri ile etkileşim ve kene 3,9-13 yoluyla göç ederler. Örneğin, Lyme hastalığı ajanı, Borrelia burgdorferi, kenenin enzootik döngüsü 14,15 şölen ve kıtlık aşamalarına farklı gen ifade aracılığıyla uyarlar. Dahası, bir Ixodes kene gibi bir tüketirbloodmeal Borrelia çoğaltmak ve ortabağırsak gelen onlar tükürük bezlerinin seyahat ve sınırdışı tükürük 9,16-19 ile ev sahibi içine iletilir hemocoel, göç.

Kene beslenirken ev sahibi genellikle güçlü bir hemostatik ve immün yanıtı 11,13,20-22 ile yanıt verir. Bu konak yanıtları rağmen, I. kene tükürük 3,11,20,21,23 besleyen kene yardım immünomodülatör olan proteinlerin parçalayıcı ajanlar, antikoagülanlar ve fibrinolysins içerdiğinden scapularis birkaç gün süreyle besleyebilir. Kene tükürük veya tükürük bezi ekstraktı (SGE) tarafından sahip immünomodülatör faaliyetleri çok sayıda kene kaynaklı patojenlerin 3,20,24-27 iletimi, çoğalması ve yayılması kolaylaştırmak. Daha da kenelerin beslenme aktif incelemek ve kene tükürük toplamak esastır enfeksiyöz ajanlar hastalığı nasıl neden kene kaynaklı anlamak için. Bu video protokol için diseksiyon teknikleri gösteriyorhemolimf toplanması ve aktif I. beslenmesini tükürük bezlerinin çıkarılması scapularis periler 48 sonra ve 72 saat sonrası fare yerleşimi. Ayrıca yetişkin bir dişi I. tükürük toplama göstermek scapularis kene.

Protocol: Ixodes scapularis Keneler gelen tükürük, Tükürük Bezi ve hemolimf Koleksiyonu

1. Slayt hazırlanması için hemolimf toplama

(Film 1)

  1. Yavaşça yüzeyi sterilize ila 10 dakika süreyle% 70 etanol içinde daha sonra 5 dakika boyunca% 3 topikal hidrojen peroksit ve bir hayvan yerden aktif besleme kenelerin kaldırmak ve.
  2. Pap kalem silan kaplı mikroskop lamı üzerine bir daire çizin ve pap kalem daire içinde kene yerleştirin ile.
    1. Silan kaplı slaytlar mikroskop lamı için hemolimf en iyi yapışması için kullanılır.
  3. Bir mikroskop (1X objektif, 10X mercek, 3.5x büyütme) altında kene görüntüle.
  4. Yavaşça kene bacaklarının yayılmak ve kene immobilize etmek için forseps ile kenenin sırtı aşağı bastırın.

Not: Bu ortabağırsak veya ponksiyon kene bozabilir ve hemolimf kontamine olabilir, çünkü kene immobilizing çok sert basmayın zaman.

  1. Th kenenin bacak veya bacakları organınıtek neşter ince bir nokta ile e distal eklem. Enfektivite belirlemek için hemolimf üzerinden sadece 1 bacağı ampute edilmesi gerekir. Slaytta hemolimf toplanması için birkaç bacakları ampute olabilir.

Not: Bu hemolimf bir ortabağırsak kontaminasyona neden olabilir, çünkü vücudun çok yakın bacak kesmeyin.

  1. Bacak veya bacakları kesildikten sonra yavaşça slayt üzerine bacaklar dışarı salgılaması için hemolimf için kenenin sırtından basınç uygulamaya devam edeceklerdir. Yavaşça hemolimf yaymak için slayt etrafında kene taşıyın.

2. Tükürük bezinin çıkarılması

(Movies 2 & 3)

  1. Fosfat Nokta birkaç 25 ul havuzları bir mikroskop lamı üzerine (PBS) tamponlanmış ve PBS havuzlarından birine tick koyun.
  2. Bir mikroskop (1X objektif, 10X mercek, 3.5x büyütme) altında kene görüntüle.
  3. Ince uçlu forsepsle ile kene stabilizetemelinde capitulum (ağızdan parçalar) veya kene arka tutarak s.
  4. Kene arka içine ince uçlu pens takın ve kene organları açığa sırtı var kadar dilim. İsterseniz ortabağırsak şu anda kaldırılmış ve bir mikroskop lamı üzerine PBS taze bir havuz veya PBS içeren bir mikrofuge'de tüpüne aktarılabilir.
  5. Bilateral kene bacakları yanında bulunan tükürük bezlerinde (üzüm salkımı benzeri) çifti bulun. Tükrük bezleri kene enkaz tükürük bezlerinin bozulması ve kaybını azaltmak için PBS taze bir havuz, hala tükürük bezleri içeren, ana kene kısmı hareket arasında görünmüyorsa.

Not: Daha önce bir beslenme içinde, tükrük bezleri daha sonra beslenme üzerine karşılaştırıldığında onlar gibi gelişmiş olmadığından bulmak zordur.

  1. Ince uçlu pens ve PBS taze bir havuz yer olan kene ile tükürük bezleri çıkarın.
  2. Wiince inci forseps herhangi bir dış mikroorganizmalar ve kene enkaz kaldırmak için bu yıkama adımı 3-4 defa daha tekrarlayın, başka bir temiz 25 ul PBS havuzuna tükürük bezlerinde transfer uçlu.

Not: Bireysel tükürük bezlerinin kaybı ve kesintileri azaltmak için hafifçe tükürük bezi kümeleri yıkayın.

  1. Bir silan kaplı slaytta PBS temiz bir havuza veya PBS içeren bir mikrofuge'de tüp bezleri yerleştirin.

3. Tükürük toplama

(Movie 4)

  1. Yavaşça tavşan veya tam tıkalı onlar düşüyorlar hemen önce ince uçlu pens, yaklaşık 5-7 gün post-eki kullanarak başka bilgisayardan yetişkin dişi kene kaldırın.
  2. Seloteyip ile bir mikroskop lamı bir ucuna yaklaşık tıkanık kene uyun. Bant yaklaşık konulmalıdır ¾ baş doğru kenenin sırtı kadar yolu, kenenin temelinde capitulum (ağız parçaları) maruz bırakarak.
  3. Bandı% 5 pilokarpin çözeltisi kenelerin dorsal yüzeyini pipet 5 ul (metanol içinde) ön kenarının birleştiği yerde. Bant pilokarpin kenenin temelinde capitulum ile temas etmesine izin vermeden, kenenin sırtı pilokarpin fitil izin verin.
  4. Mikroskop lamı üzerine toksik olmayan modelleme kil parçasının kenenin ağız yaklaşık bir inç monte edin.
  5. Ince uçlu pens istenilen çapa çekti kılcal tüp 28 ucunu kırın kullanılması.
  6. Bir mikroskop altında kenenin temelini capitulum görüntüle.
  7. Yavaşça maksiller palps kılcal boru dışına ikamet için izin çekti kapiler tüpe kenenin hypostome uyacak.
  8. Kılcal tüp yerinde tutmak için kil modelleme içine kılcal tüpün ucunu basın.
  9. Yüksek nem (örneğin, ıslak pap ile kaplı bir strafor kapaklı kutusu ile karanlık bir odası içinde monte salyalar kene yerleştirin er havlu). Yerçekimi tükürük toplama yardımcı sağlayan hypostome noktaları böylece, kabın dibine kayar eğim.
  10. Oda sıcaklığında bir kap yerleştirin.
  11. Yakından ilk saat için salyalar keneler izlemek ve bir Pasteur pipeti ampul kılcal tüpler dışarı atarak oluşturulan, tükürükteki toplamak. İlk saat sonra, en az 4 saat süreyle birikimi her saat kontrol edin. Oluşturulduğunda gibi tükürük toplamak için devam edin.

Not: Yeterince tükürük yapılmaktadır Araştırma için toplanan bir kez Tükürük toplama durdurulabilir.

  1. Keneler salyalar değildir veya daha fazla tükürük gerekiyorsa, salivasyon bazen hypostome masaj kılcal tüpü kullanılarak oluşturulan olabilirsem.
  2. Ihtiyaç kadar -80 ° C de tükürük ve mağaza proteaz inhibitörü kokteyl 0.1 hacimleri ekleyin.

4. Temsilcisi Sonuçlar

e_content "> Film 1 kısmen beslenen I. scapularis perisi tutun ve bir mikroskop lamı üzerine hemolimf toplamak için bacaklarını kesmek zorunda gösterilmiştir. bacak veya bacakları açık bir sıvı (Şekil 1A ve 1B) salgılanır ampute edildikten sonra. Eğer ortabağırsak hemolimf olduğu gibi bulanık görünüyorsa ampute bacak (lar) (Şekil 1C ve 1D) çıkan delinmiş veya yırtılmış.

Perisi 48 veya 72 saat beslenme sonra tükürük bezlerinin çıkarılması filmleri 2 ve 3'te gösterilmiştir. Kene enkaz bir sürü genellikle yoktur delinirse sonra (trakea, Malpighi tüpleri tübüller, kan oluşan bağ dokusu vb) tükürük bezlerinin kaybı veya bozulmasını önlemek için, PBS taze bir havuz kene taşıyın. Perisi kesmişler sonra tükürük bezleri bulunur Şekil 2A ve 2B gösterisi ve şekil 2C PBS bir havuzda tükürük bezi başlıkların çıkarılması gösterir.

Tükürük toplama I. den kurmak scapularis yetişkin kadın i s film 4 ve Şekil 3'te gösterilmiştir. Bir tüp içine salyalar bir kene film 5 gözlenmektedir. Salivasyon teşvik etmek ve yetişkin dişi kene başına tükürük 20 ul fazla verim alınabilir pilokarpin kullanılan tükürük toplama yöntemi.

Şekil 1..
Şekil 1. Bir I. scapularis nympha Etiketli yapılar.

Film 1. Ixodes scapularis hemolimf koleksiyon. film izlemek için tıklayınız .

Şekil 2.
Şekil 2. Kirlenmemiş (A & B) ve perisi bacağını gelen yayan (C & D) hemolimf kontamine.

48 saatlik bir beslenen I. Film 2. Tükürük bezi çıkarma scapularis perisi.pload/3894/3894movie2.avi "> film izlemek için tıklayınız.

72 saat beslenen I. Film 3. Tükürük bezi çıkarma scapularis perisi. film izlemek için tıklayınız .

Şekil 3.
Şekil 3. Ixodes scapularis perisi tükrük bezleri. (A & B) önce çıkarılması için bir 72 saat beslenmiş perisi olarak tükürük bezlerinin örnekleri. (C) tükürük bezi küme kaldırıldı.

Film 4. Tükürük toplama bir yetişkin I. den kurmak scapularis dişi kene. film izlemek için tıklayınız .

Şekil 4.
Yetişkin I. gelen Şekil 4. Tükürük toplama scapularis kadın ticks. (A & B) kil modelleme tarafından tutulan kapiler tüpün unpulled sonu ile kılcal boru çekti sonunda onun hypostome bir slayt monte işaretleyin. (C & D) salyalar yetişkin I. içeren Nemlendirilmiş odası scapularis dişi keneler.

Film 5. Bir tüp içine salyalar scapularis dişi kene Ixodes. film izlemek için tıklayınız .

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion: Ixodes scapularis Keneler gelen tükürük, Tükürük Bezi ve hemolimf Koleksiyonu

Kene hemolimf, tükrük bezleri ve tükürük toplama kene kaynaklı patojen bulaşma çalışmada önemlidir, yaygınlık, yaygınlaştırma, proliferasyon ve kene ve ana 6,11-13,20,23,29 hem de kalıcılık. Bir kene 30,31 incelemek için çeşitli yollar vardır. Ancak, tükrük bezleri alırken düzgün böylece tükürük bezlerinin yırtılması veya kenenin kalıntıların kayıp değildir kene incelemek için önemlidir. Tükürük bezleri onlar ortabağırsak kontaminasyonu gidermek için ve sonra tükürük bezi ekstraktı (SGE) elde etmek için PBS içinde boyama veya zemin için bir slayt üzerine monte edilebilir birkaç kez yıkanmasına gerek kene kaldırılır sonra. SGE tükürük daha toplamak için kolaydır ve tükürük benzer özellikler sahiptir, bu yüzden, bir tükürük alternatif olarak kullanılabilir. Ancak, SGE kene tükürük mevcut olmayan tükürük bezi hücrelerinden kaynaklanan ek protein içerir. SGE sahip olan B ilave proteinlerin ilavee bir avantaj ya da yapılmıyorsa, çalışmaya bağlı olarak bir dezavantaj, ama bir araştırmacı SGE çalışırken farkında olması gereken bir şeydir. SGE pilokarpin tükürük bezlerinin toplama sırasında kullanılan olmadığını avantajı var. Pilokarpin, kurtuluş bir agonist olarak işlev gören bir muskarinik kolinomimetik ajanı, B. üzerinde sitotoksik bir etkiye sahip olduğu gösterilmiştir Tükürük toplama 32,33 sırasında burgdorferi. Dopamin salivasyon başka agonisti ama hızla hemolimf ve diğer kene sıvıları ile yok edilir gibi bir kalıcı etkisi 33 olduğunu pilokarpin göre. Diğer uyarıcı teknikler tükürük toplanması için araştırılmış olan ve tüm tükrük kompozisyonu 34 etkilediği gösterilmiştir.

Keneler hareket ve ortabağırsak çatlatılmadan onları hareketsiz sorunlu olabilir çünkü hemolimf toplama zor olabilir. Çift taraflı bant ile kene Hareketsizleştirici bir seçenek, ama hemo olduğunukene kaldırılmaz ise lenf banta kaybolabilir. Diğer çalışmalar distal eklemler de kene bacaklarının kesilmesi ve hemolimf 16,35 toplamak için santrifüj kullanarak birkaç kene hemolimf topladık. Hemolimf toplama hemolimf kene enfektivite belirlemek için kullanılabilir hakim sonra, patojen işaretleyiniz ve tükrük bezlerinin ortabağırsak gelen patojenlerin göç.

Laboratuvarımızda odağı B. olmasına karşın burgdorferi ve I. scapularis keneler, bu protokolde belirtilen teknikler diğer kene kaynaklı enfeksiyon etkenleri incelemek ve kene türleri için kullanılabilir. Dahası, bu teknikler göreli kolaylıkla nimfleri veya yetişkin üzerine de kullanılabilir. Larva ile bu tekniklerin kullanılması büyüklükleri nedeniyle zor olabilir. Diseksiyonu teknik hakim olduğu kadar enfekte kenelerin kullanılması tavsiye edilir. Enfeksiyon dissecting zaman uygun biyogüvenlik önlemleri egzersiz yapmak da önemlidirted veya alan keneler toplanmıştır. Bu video protokolde yöntemleri kene diseksiyonu ve ne bu teknikleri gerçekleştirirken aramaya yürütmek konusunda kılavuz olarak kullanılabilir.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures: Ixodes scapularis Keneler gelen tükürük, Tükürük Bezi ve hemolimf Koleksiyonu

Biz ifşa hiçbir şey yok.

Acknowledgements: Ixodes scapularis Keneler gelen tükürük, Tükürük Bezi ve hemolimf Koleksiyonu

Yazarlar vektör kaynaklı hastalıkların Hayvan Kaynakları Şubesi Bölümü teşekkür etmek istiyorum, özellikle Andrea Peterson, Lisa Massoudi, Elçin O'Brien ve fare ve tavşan bakımı ve bakım için John Liddell. Biz de bu yazının doğru katkıları için Amy Ullmann, Theresa Russell, ve Barbara J. Johnson teşekkür etmek istiyorum. Son olarak, bu yazının filme ile ilgili tüm legalities yönlendirmek için grafik çizimler ve Judy Lavelle üretmek için CDC, İletişim için Associate Direktörü Office Alissa Eckert kabul etmek istiyorum.

Materials: Ixodes scapularis Keneler gelen tükürük, Tükürük Bezi ve hemolimf Koleksiyonu

Name Company Catalog Number Comments
Hydrogen peroxide Fisher Scientific H312-500
Ethanol Acros Organics 61509-5000
PBS Boston Bioproducts BM-2205
Dumont Fine forceps (3C) Fisher Scientific NC9906085
Silane treated microscope slides Bioworld 42763007-1
Pap pen Bioworld 21750008-1
Super frost plus microscope slides Fisher Scientific 12-550-18
Pilocarpine Sigma-Aldrich P6503-5G
Protease inhibitor cocktail Sigma-Aldrich P2714
#11 disposable scalpel Feather Safety Razor Co, Ltd. 2975#11
Nontoxic modeling clay Fisher Scientific S17307
Capillary tubes Chase Scientific Glass, Inc. 40A502

References: Ixodes scapularis Keneler gelen tükürük, Tükürük Bezi ve hemolimf Koleksiyonu

  1. Quach, K.A., Boctor, F.N., & Elston, D.M. What's eating you? Hyalomma ticks. Cutis. 87, 165-167 (2011).
  2. Graham, J., Stockley, K., & Goldman, R.D. Tick-borne illnesses: a CME update. Pediatr. Emerg. Care. 27, 141-147, doi:10.1097/PEC.0b013e318209f0b300006565-201102000-00018 (2011).
  3. Nuttall, P.A., Paesen, G.C., Lawrie, C.H., & Wang, H. Vector-host interactions in disease transmission. J. Mol. Microbiol. Biotechnol. 2, 381-386 (2000).
  4. Estrada-Pena, A. & Jongejan, F. Ticks feeding on humans: a review of records on human-biting Ixodoidea with special reference to pathogen transmission. Exp. Appl. Acarol. 23, 685-715 (1999).
  5. Nuttall, P.A. Pathogen-tick-host interactions: Borrelia burgdorferi and TBE virus. Zentralbl Bakteriol. 289, 492-505 (1999).
  6. Jones, L.D., Hodgson, E., & Nuttall, P.A. Enhancement of virus transmission by tick salivary glands. J. Gen. Virol. 70 (Pt. 7), 1895-1898 (1989).
  7. Labuda, M. & Nuttall, P.A. Tick-borne viruses. Parasitol. 129 Suppl., S221-245 (2004).
  8. Socolovschi, C., Mediannikov, O., Raoult, D., & Parola, P. Update on tick-borne bacterial diseases in Europe. Parasite. 16, 259-273 (2009).
  9. Zhang, L., et al. Molecular Interactions that Enable Movement of the Lyme Disease Agent from the Tick Gut into the Hemolymph. PLoS Pathog. 7, e1002079, doi:10.1371/journal.ppat.1002079PPATHOGENS-D-10-00393 (2011).
  10. Piesman, J. & Schneider, B.S. Dynamic changes in Lyme disease spirochetes during transmission by nymphal ticks. Exp. Appl. Acarol. 28, 141-145 (2002).
  11. Brossard, M. & Wikel, S.K. Tick immunobiology. Parasitol. 129 Suppl., S161-176 (2004).
  12. Machackova, M., Obornik, M., & Kopecky, J. Effect of salivary gland extract from Ixodes ricinus ticks on the proliferation of Borrelia burgdorferi sensu stricto in vivo. Folia Parasitol. 53, 153-158 (2006).
  13. Nuttall, P.A. & Labuda, M. Tick-host interactions: saliva-activated transmission. Parasitol. 129 Suppl., S177-189 (2004).
  14. Anguita, J., Hedrick, M.N., & Fikrig, E. Adaptation of Borrelia burgdorferi in the tick and the mammalian host. FEMS Microbiol. Rev. 27, 493-504 (2003).
  15. Hovius, J.W., van Dam, A.P., & Fikrig, E. Tick-host-pathogen interactions in Lyme borreliosis. Trends Parasitol. 23, 434-438 (2007).
  16. Dunham-Ems, S.M., et al. Live imaging reveals a biphasic mode of dissemination of Borrelia burgdorferi within ticks. Journal Clin. Invest. 119, 3652-3665 (2009).
  17. Ribeiro, J.M., Mather, T.N., Piesman, J., & Spielman, A. Dissemination and salivary delivery of Lyme disease spirochetes in vector ticks (Acari: Ixodidae). J. Med. Entomol. 24, 201-205 (1987).
  18. Piesman, J. Transmission of Lyme disease spirochetes (Borrelia burgdorferi). Exp. Appl. Acarol. 7, 71-80 (1989).
  19. De Silva, A.M. & Fikrig, E. Growth and migration of Borrelia burgdorferi in Ixodes ticks during blood feeding. Am. J. Trop. Med. Hyg. 53, 397-404 (1995).
  20. Horka, H., Cerna-Kyckova, K., Skallova, A., & Kopecky, J. Tick saliva affects both proliferation and distribution of Borrelia burgdorferi spirochetes in mouse organs and increases transmission of spirochetes to ticks. Int. J. Med. Microbiol. 299, 373-380 (2009).
  21. Brossard, M. & Wikel, S.K. Immunology of interactions between ticks and hosts. Med. Vet. Entomol. 11, 270-276 (1997).
  22. Wikel, S.K. Tick modulation of host immunity: an important factor in pathogen transmission. Int. J. Parasitol. 29, 851-859, [pii] S0020-7519(99)00042-9 (1999).
  23. Binnington, K.C. & Kemp, D.H. Role of tick salivary glands in feeding and disease transmission. Adv. Parasitol. 18, 315-339 (1980).
  24. Guo, X., et al. Inhibition of neutrophil function by two tick salivary proteins. Infect. Immun. 77, 2320-2329 (2009).
  25. Montgomery, R.R., Lusitani, D., De Boisfleury Chevance, A., & Malawista, S.E. Tick saliva reduces adherence and area of human neutrophils. Infect. Immun. 72, 2989-2994 (2004).
  26. Lima, C.M., et al. Differential infectivity of the Lyme disease spirochete Borrelia burgdorferi derived from Ixodes scapularis salivary glands and midgut. J. Med. Entomol. 42, 506-510 (2005).
  27. Severinova, J., et al. Co-inoculation of Borrelia afzelii with tick salivary gland extract influences distribution of immunocompetent cells in the skin and lymph nodes of mice. Folia Microbiol. 50, 457-463 (2005).
  28. How to pull capillary tubes [Internet]. benchflydotcom; uploaded Aug. 6, 2009. Available from:http://www.youtube.com/watch?v=2yKHvKCatmM (2009).
  29. Labuda, M., Jones, L.D., Williams, T., & Nuttall, P.A. Enhancement of tick-borne encephalitis virus transmission by tick salivary gland extracts. Med. Vet. Entomol. 7, 193-196 (1993).
  30. Kariu, T., Coleman, A.S., Anderson, J.F., & Pal, U. Methods for Rapid Transfer and Localization of Lyme Disease Pathogens Within the Tick Gut. J. Vis. Exp. (48), e2544, DOI: 10.3791/2544 (2011).
  31. Edwards, K.T., Goddard, J., & Varela-Stokes, A.S. Examination of the internal morphology of the Ixodid tick Amblyomma maculatum koch, (Acari:Ixodidae); a "How-to" pictorial dissection guide. Midsouth Entomologist. 2, 28-39 (2009).
  32. Ledin, K.E., et al. Borreliacidal activity of saliva of the tick Amblyomma americanum. Med. Vet. Entomol. 19, 90-95 (2005).
  33. Ribeiro, J.M., Zeidner, N.S., Ledin, K., Dolan, M.C., & Mather, T.N. How much pilocarpine contaminates pilocarpine-induced tick saliva? Med. Vet. Entomol. 18, 20-24, (2004).
  34. Barker, R.W., Burris, E., Sauer, J.R., & Hair, J.A. Composition of tick oral secretions obtained by three different collection methods. J. Med. Entomol. 10, 198-201 (1973).
  35. Burgdorfer, W. Hemolymph test. A technique for detection of rickettsiae in ticks. Am. J. Trop. Med. Hyg. 19, 1010-1014 (1970).

Ask the Author: Ixodes scapularis Keneler gelen tükürük, Tükürük Bezi ve hemolimf Koleksiyonu

1 Comment

Dear professors:
This video experiments is basically valuable! and really meaningful for me, i am now focusing on ticks as a master student.
however, our library hasn't purchased it yet, could you do me a favor to send it for me,
my email is xinwang19871216@yahoo.com,
really thanks for you~

1

Reply

Posted by: sanger w.May 30, 2012, 9:59 PM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Waiting
simple hit counter