The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
Authors
The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
This translation into Arabic was automatically generated through Google Translate.
English Version | Other Languages
1Department of Molecular Genetics and Cell Biology, University of Chicago, 2Department of Human Genetics, University of Chicago
This article is a part of JoVE General. If you think this article would be useful for your research, please recommend JoVE to your institution's librarian.
Recommend JoVE to Your LibrarianCurrent Access Through Your IP Address
You do not have access to any JoVE content through your current IP address.
IP: 107.21.186.38, User IP: 107.21.186.38, User IP Hex: 1796586022
Current Access Through Your Registered Email Address
You aren't signed into JoVE. If your institution subscribes to JoVE, please sign in or create an account with your institutional email address to access this content.
Blank, M. C., Chizhikov, V., Millen, K. J. In Ovo Electroporations of HH Stage 10 Chicken Embryos. J. Vis. Exp. (9), e408, doi:10.3791/408 (2007).
التعامل مع البيض
إعداد
النوافذ
اختياري : لتصور الأنبوب العصبي ، وضخ الحبر الحل مع إبرة قياس 26 تحت الجنين (ادخال ابرة تحت الجنين من خارج الحلبة الدم). وينبغي أن تضعف الهند الحبر 01:05 بمحلول معقم أو هانكس مقارنة مخزنة.
الحقن وElectroporation
ملاحظة : كن حذرا ليس لديهم أكبر قطر الحافة ثم الأنبوب العصبي. عموما ، سوف تكون قادرة على معرفة ما إذا كان قد تحقق حجم الأمثل من قبل طرف مدى سهولة أو صعوبة لسحب السائل إلى الشعيرات الدموية. إذا كان هناك مقاومة حادة ، وفتح هو على الارجح صغيرة جدا ، وينبغي أن تكون مكسورة الطرف مرة أخرى على مستوى اعلى. إذا كان هناك مقاومة تذكر أو لا ، وفتح كبير جدا ويجب استخدام إبرة جديدة.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
هذا البروتوكول يوفر دليل خطوة بخطوة لelectroporation الأنبوب العصبي للأجنة الدجاج HH10. بالإضافة إلى عرض هذه التقنية ، كما تقدم مبادئ توجيهية للتخزين والمناولة من البيض. هذه التقنية لديها مجموعة واسعة من التطبيقات للتحليل الوراثي والتكلفة المنخفضة وسهولة من التجارب يجعلها ممكنة للمختبرات عديدة.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Chicken egg incubator | humidified, set to 37.80°C (100F). | ||
| Pulse generator | Genetronics | BTX T820 | Square wave generator or comparable |
| Electrodes | our electrodes were made from 0.25 mm diameter platinum wire and were 5 mm long and spaced 1 mm apart | ||
| Connecter cables | |||
| Micromanipulator | |||
| Dissecting scope | with large working distance | ||
| Glass capillaries | and capillary puller or commercial glass needles | ||
| Leibovitz’s L-15 media | |||
| chicken eggs | fertilized | ||
| Curved scissors | |||
| 10 ml syringe | |||
| Large bore needle | 16-18G | ||
| Mouth pipette | |||
| India ink | |||
| Insulin syringe/syringe | |||
| Plasmid DNA | 1Âμg/Âμl in sterile TE or 1X PBS containing 0.05% Fast Green dye |
1. Itasaki, N., Bel-Vialar, S. and Krumlauf, R. 'Shocking' developments in chick embryology: electroporation and in ovo gene expression. Nat Cell Biol. 1, E203-7 (1999).
1
ReplyPosted by: AnonymousNovember 29, 2007, 6:33 PM