The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
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The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
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English Version | Other Languages
1Department of Surgery, University of California, San Francisco - UCSF, 2Department of Pathology, Stanford University School of Medicine
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Tseng, W., Leong, X., Engleman, E. Orthotopic Mouse Model of Colorectal Cancer. J. Vis. Exp. (10), e484, doi:10.3791/484 (2007).
I. सेल तैयार
द्वितीय. ट्यूमर तैयारी
III. माउस तैयार
नोट: हमारी प्रयोगशाला में हम के लिए माउस anesthetize isoflurane साँस उपयोग, वैकल्पिक रूप से, एक इंजेक्शन anesthetics का उपयोग करने के लिए एक ही प्रभाव को प्राप्त कर सकते हैं
चतुर्थ. Laparotomy
Cecum के वी. एक्सपोजर
छठी. कक्ष के Cecal दीवार में इंजेक्शन
सातवीं. ट्यूमर के cecum पर ट्रांसप्लांटेशन
नोट: cecal दीवार में कोशिकाओं को इंजेक्शन के अलावा, एक वैकल्पिक दृष्टिकोण cecum पर ट्यूमर प्रत्यारोपण
आठवीं. माउस पेट दीवार क्लोजर और रिकवरी
नोट: साँस anesthetics के साथ यह आमतौर पर 30 सेकंड लेता है
ग्यारहवीं. प्राथमिक ट्यूमर और जिगर की मेटास्टेसिस परिणाम -
प्राथमिक ट्यूमर - बगल में दिखाया (ए) और neovascularization के सबूत (बी) के साथ, एच एंड ई धुंधला पर, ट्यूमर स्थानीय स्तर पर आक्रामक रहे हैं (सी)
जिगर metastases - दिखाया पूर्व vivo (D)
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हालांकि माउस उपचर्म ट्यूमर मॉडल स्थापित करने और निगरानी के लिए आसान कर रहे हैं, यह स्पष्ट है कि इस मॉडल में कोलोरेक्टल कैंसर के मूल शारीरिक साइट नकल नहीं कर सकते. Microenvironment में अंतर के कारण, कोलोरेक्टल कैंसर कोशिकाओं को त्वचा के नीचे बढ़ रहा है उनके phenotype परिवर्तन और लगभग हमेशा 1,2 करने के लिए प्रगति और metastasize करने में विफल करने के लिए दिखाया गया है. वास्तव में, उपचार के लिए ट्यूमर प्रतिक्रिया नाटकीय रूप से भिन्न है कि कैंसर की कोशिकाओं को एक अस्थानिक (चमड़े के नीचे) बनाम orthotopic 3 स्थान में प्रत्यारोपित कर रहे हैं पर निर्भर कर सकते हैं . कोलोरेक्टल कैंसर के Orthotopic माउस मॉडल है, जो कैंसर कोशिकाओं को उनके प्राकृतिक स्थान में बढ़ रही सुविधा, उच्च निष्ठा के साथ मानव रोग को दोहराने. दो तकनीकों इस मॉडल स्थापित करने में अद्वितीय फायदे और नुकसान है. Cecal दीवार में एक सेल निलंबन इंजेक्शन कोलोरेक्टल कैंसर की कोशिकाओं को जो पहले किया गया है इन विट्रो वातावरण में एक में बढ़ती परिचय और यकीनन सजातीय हैं. कक्ष संस्कृति में कई मार्ग के बाद आक्रामक या metastatic क्षमता कम हो सकता है. चमड़े के नीचे ट्यूमर का एक टुकड़ा का प्रत्यारोपण कि vivo में स्थापित किया गया है कैंसर की कोशिकाओं के एक अधिक विषम जनसंख्या का परिचय. हालांकि, ट्यूमर stromal कोशिकाओं होते हैं और अक्सर परिगलित भाग है जो इस मॉडल (निजी संचार, मैं Fidler, एमडी एंडरसन) की निरंतरता को प्रभावित कर सकता है. एक तकनीकी दृष्टि से, हमारी प्रयोगशाला में पाया गया है कि cecal दीवार में एक सेल निलंबन के इंजेक्शन और अधिक कठिन है और intraluminal इंजेक्शन और इंजेक्शन के बाद रिसाव के जोखिम रहता है. दिलचस्प है, मलाशय के कैंसर के एक orthotopic माउस मॉडल का वर्णन किया गया है कि माउस laparotomy 4 की आवश्यकता नहीं है . चूहे anesthetized हैं और मलाशय mucosa डिजिटल दबाव के साथ prolapsed है. एकल कक्ष निलंबन में कोलोरेक्टल कैंसर की कोशिकाओं की एक छोटी मात्रा submucosally इंजेक्शन है. प्राथमिक, आक्रामक मलाशय के कैंसर चूहों में इंजेक्शन के बाद एक सप्ताह के रूप में जल्दी के रूप में विकसित, तथापि, चूहों में से कोई भी जिगर metastases के विकास और लेखकों फेफड़ों metasases की आवृत्ति पर कोई टिप्पणी नहीं की.
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सर्जरी विभाग, विश्वविद्यालय कैलिफोर्निया, सैन फ्रांसिस्को
रेमंड शाहीन, एमडी
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Cell culture media and components | will vary depending on cell line used | ||
| Phosphate Buffered Saline | BioWhittaker | 17-512F | also sold by a number of other vendors |
| 15 mL centrifuge tubes, polypropylene | Corning | 430790 | |
| 6 well plates with lid | BD Biosciences | 353046 | |
| Iris forceps, straight, serrated tips | World Precision Instruments, Inc. | 15914 | best to have a pair of these instruments |
| Iris dissecting scissors, straight, sharp | World Precision Instruments, Inc. | 14393 | |
| Needle Holder (regular) | World Precision Instruments, Inc. | 14109 | |
| Needle Holder (Castroviejo) | World Precision Instruments, Inc. | 14137 | |
| Cidex Plus | World Precision Instruments, Inc. | 7364 | instruments should be autoclaved periodically, but may also be sterilized by soaking in Cidex |
| 6-0 or 7-0 suture | for cecum; courtesy of Department of Surgery, UCSF | ||
| 3-0 or 4-0 suture | for abd wall; courtesy of Department of Surgery, UCSF | ||
| Anesthetic machine / Isoflurane | J.A. Baulch and Associates | 3206 | also sold by a number of other vendors |
| Heating Pad, disposable, 6" x 6" | Prism Technologies | 20419 | |
| Tape, orange, 13 mm x 13 m | Fisher Scientific | 15901F | for restraining anesthetized mouse |
| Pro-Cord/Cordless Trimmer | Oster Professional Products | 78997-010 | for shaving mouse fur |
| Betadine | Fisher Scientific | 19-027132 | may also be purchased at any medical supply store |
| 2 x 2 gauze, 3-ply | Johnson & Johnson | 7635 | may also be purchased at any medical supply store |
| Sterile Field, Barrier, 16" x 29" | Johnson & Johnson | 0905 | may also be purchased at any medical supply store |
| Cotton tipped applicators, 6" | Fisher Scientific | 14-960-3Q | may also be purchased at any medical supply store |
| Syringe, 10 cc, Luer lock tip | BD Biosciences | 309604 | |
| Syringe, 1 cc, tuberculin, slip tip | BD Biosciences | 309602 | |
| 27 1/2 G needle | BD Biosciences | 305109 | |
| 30 G needle | BD Biosciences | 305106 |
1. Heijstek, M.W., Kraneburg, O., Borel Rinkes, I.H. Mouse models of colorectal cancer and liver metastases. Dig Surg. 22, 16-25 (2005).
2. Kobaek-Larsen, M., Thorup, I., Diederichsen, A., Fenger, C., Hoitinga, M.R. Review of colorectal cancer and its metastases in rodent models: comparative aspects with those in humans. Comp Med. 50, 16-26 (2000).
3. Wilmanns, C., Fan, D., O’Brian, C.A., Bucana, C.D., Fidler, I.J. Orthotopic and ectopic organ environments differentially influence the sensitivity of murine colon carcinoma cells to doxorubicin and 5-fluorouracil. Int J Cancer. 52, 98-104 (1992).
4. Kashtan, H., Rabau, M., Mullen, J.B., Wong, A.H.C., Roder, J.C., Shiptz, B., Stern, H.S., Gallinger, S., Intra-rectal injection of tumor cells: a novel animal model of rectal cancer. Surg Oncol. 1, 251-256 (1992).
Now it really really looks like a journal, feels like a journal.
It is very professional and holds very very high standards..
congratulations...
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ReplyPosted by: AnonymousDecember 6, 2007, 10:13 AM