Submit
Browse  

The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.

Recommend to Librarian

Automatic Translation

This translation into Arabic was automatically generated through Google Translate.
English Version | Other Languages

 JoVE General

زرع الجلد الفئران

,

Department of Physiology and Biophysics, University of California, Irvine (UCI)

You must be subscribed to JoVE to access this content.

This article is a part of   JoVE General. If you think this article would be useful for your research, please recommend JoVE to your institution's librarian.

Recommend JoVE to Your Librarian

Current Access Through Your IP Address

You do not have access to any JoVE content through your current IP address.

IP: 54.235.20.17, User IP: 54.235.20.17, User IP Hex: 921375761

Current Access Through Your Registered Email Address

You aren't signed into JoVE. If your institution subscribes to JoVE, please or create an account with your institutional email address to access this content.

 

Video Article Chapters

Cite this Article: زرع الجلد الفئران

Garrod, K. R., D. Cahalan, M. Murine Skin Transplantation. J. Vis. Exp. (11), e634, doi:10.3791/634 (2008).

Abstract: زرع الجلد الفئران

باعتبارها واحدة من النماذج الأكثر صرامة وأقل تحديا من الناحية التقنية ، وزرع الجلد هو طريقة قياسية لفحص استجابات المضيف لمستضدات الخلايا التائية المانحة MHC - متباينة. الهدف من هذه المادة عن طريق الفيديو هو تقديم المشاهد مع مظاهرة خطوة بخطوة البصرية زرع الجلد باستخدام نموذج الفأر. يتم تقسيم البروتوكول حيز 5 عناصر رئيسية هي : 1) حصاد الجلد المانحة ؛ 2) إعداد المتلقي للزرع ؛ 3) زرع الجلد ؛ 4) إزالة الضماد ورصد رفض الكسب غير المشروع ؛ 5) تلميحات مفيدة. يتقن مرة واحدة ، يجب أن تتخذ الإجراء نفسه <10 دقيقة للتنفيذ.

Protocol: زرع الجلد الفئران

قبل الشروع في التجربة :

  • الحصول على موافقة IACUC
  • تعقيم الأدوات الجراحية وQ - نصائح

أولا الأنسجة المانحة الحصاد

  1. الموت ببطء الماوس المانحة (وفقا للمؤسسة SOP)
  2. الرطب يعود الشعر من قاعدة الأذن مع الكحول
  3. حصاد الجلد المانحة بقطع الأذن في قاعدة قبالة
  4. نسيج اللوحة في المكان على الجليد
  5. الأذن تقسيم : قرصة الجانبين بطني وظهري من الأنسجة في قاعدة الأذن مع الفئران الأسنان ملقط ؛ برفق بعيدا الأنسجة ؛ الأنسجة تعويم الظهرية ، أسفل السطح الداخلي ، في برنامج تلفزيوني على الجليد ؛ تجاهل رفرف بطني كولاجيني

II. إعداد المتلقي للزراعة

  1. تخدير باستخدام الماوس الداخلي المعتمدة
  2. إدارة مسكن لتخفيف الألم بعد العملية (أي الملكية الفكرية ،05-0،1 Bupernex مغ / ز)
  3. الماوس مكان في موقف الوحشي
  4. أداء قرصة إصبع لضمان مخدرا الحيوان بما فيه الكفاية
  5. الشعر الرطب مع الكحول ويحلق الصدر
  6. مسح منطقة نظيفة مع مسحة الكحول

III. زرع الجلد

  1. ~ جعل شق الطول 1 : الجلد خيمة مع الجرذان وخفض سن ملقط ~ 0،25-0،5 سم تحت ملقط
  2. إزالة الجلد المانحة من برنامج تلفزيوني ، ومكان فوق السرير الكسب غير المشروع (مع السطح الداخلي للجلد الأذن التي تواجه السرير الكسب غير المشروع) ، وإزالة الزائدة مع برنامج تلفزيوني العقيمة Q - غيض
  3. تقليم بعناية بعيدا الجلد الزائد المانحة بحيث زرع تقع تماما داخل السرير الكسب غير المشروع (مع التأكد من أن ليست كرة لولبية من حواف الكسب غير المشروع في إطار الكسب غير المشروع ، وأنه لا مخلفات الجلد على الجذع المستلم)
  4. لف ضمادة معقمة في المتلقي (مع قطعة شاش غير لاصقة وضعت على مدى الكسب غير المشروع الجلد)
  5. تأكد من أن عصابة ليست ضيقة جدا (تقييم التنفس الحيوان) والتي أصبحت قادرة على الحركة بحرية الأسلحة
  6. آمنة مع ضمادة خياطة واحدة 2-0 الحرير
  7. (تعافى تحت مصباح التدفئة حتى الحيوان بما فيه الكفاية من التخدير) حيوان في قفص مكان نظيف
  8. رصد المتلقي 1-2/day عن علامات الضيق وإدارة مسكن حسب الحاجة لتخفيف الألم

رابعا. إزالة الضماد (6-7 أيام بعد الزرع)

  1. تخدير باستخدام الماوس الداخلي المعتمدة
  2. قطع وإزالة خياطة الحرير
  3. باستخدام مقص نهاية حادة ، وقطع بعناية من خلال عصابة (التأكد من عدم تعطيل الكسب غير المشروع) ، وإزالة بلطف
  4. عودة الماوس لتنظيف القفص
  5. الاختيار طعم ~ 8 ساعات بعد إزالة الضماد عن علامات scabbing أو الانكماش. إذا كان موجودا ، قد فشلت في الكسب غير المشروع يوعي وينبغي النظر فيها عطل فني.
  6. رصد يوميا بحثا عن علامات على الرفض (التي تعرف عادة بأنها نخر ~ 80 ٪ من أنسجة المانحة)
  7. وزرع الجلد خيفي ترفض عادة بين 12 - D8 - مرجع آخر

خامسا تلميحات مفيدة

  1. حصاد الأنسجة المانحة على مقربة من قاعدة للأذن : 1) زيادة حجم الكسب غير المشروع ، و 2) توفير عبء متفاوتة البطني الذي سيسهل تقسيم
  2. دائما استخدام شفرة الحلاقة الجديدة للحلاقة المستلم
  3. إذا كان المسكن هو أن تعطى للملكية الفكرية وإدارتها قبل إجراء عملية زرع للحد من التعامل مع مرحلة ما بعد المرجع (تقليل فرصة لتعطيل الكسب غير المشروع)
  4. إذا كان ذلك ممكنا ، إزالة القفازات قبل تطبيق ضمادة. قفازات تميل إلى أن العصا وتعقيد تطبيق ضمادة
  5. وسوف يضع خياطة واحدة في نهاية عصابة سابق لأوانه تقليل إزالة
  6. ضمادة التفاف كما هو مسموح به ضيق في التنفس وتقييم قبل وضع خياطة. إذا ضمادة ضيق جدا ، وسوف الحيوانات توقف التنفس. إذا ضمادة واهية جدا ، وسوف الحيوانات إزالته.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion: زرع الجلد الفئران

كما هو موضح في هذه المقالة عن طريق الفيديو ، ونموذج زرع الجلد هو طريقة سريعة وسهلة لرصد ردود خيفي الخلايا التائية. خيفي زرع الجلد لديها مجموعة واسعة من التطبيقات وكانت تستخدم لفحص كفاءة مجموعة متنوعة من العوامل المثبطة للمناعة والبروتوكولات تحريض التسامح ، فضلا عن التحقيق في الآثار البيولوجية المختلفة من الأجسام المضادة حظر.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures: زرع الجلد الفئران

Acknowledgements: زرع الجلد الفئران

NIH المناعة التدريب المنحة 60573 T32 منظمة العفو الدولية (كردستان) ، والمعاهد الوطنية للصحة منح جنرال موتورز 41514 (MDC)

Materials: زرع الجلد الفئران

Name Company Catalog Number Comments
Micro-dissecting forceps (curved) Sigma-Aldrich F4142
Rat-tooth forceps (1x2 teeth, straight) Fine Science Tools 11053-10 n=2
Strabismus scissors (blunt end) Fine Science Tools 14074-11
Iris forceps (curved) Fine Science Tools 11065-07
Spring scissors (angled) Fine Science Tools 15006-09
Halsey micro needle holder Fine Science Tools 12500-12
10 cm plates Corning 430167
PBS Cellgro 21-040-CV
Bupernex (Buprenorphine hydrochloride) Reckitt Benckiser 517201
Insulin syringes (29 Ga) Monoject 8881 600145
Q-tips Solon Manufacturing Company 362
Single edge razor blades (#9) Smith & Nephew Inc. 67-0238
Silk suture (2-0; PS-2) Ethicon Inc. 583H

Ask the Author: زرع الجلد الفئران

11 Comments

Kym, I would really be interested to see a histologic profile of the post-op period - do you have the respective images?
Thank you in advance,
Peter

1

Reply

Posted by: AnonymousJanuary 22, 2008, 4:34 PM

Dear Peter- Thanks for the great suggestion. I've contacted JoVE to see if a section can be added to the article containing histo pics from allo- and syn- transplants.

1.1

Reply

Posted by: AnonymousJanuary 22, 2008, 7:33 PM

The connecting speed is too slow, it spends loog time to watch the whole video. Can we download the video?

2

Reply

Posted by: AnonymousMarch 28, 2008, 9:35 AM

Hi Merlin. I am sorry you are having trouble.  Is it your connection that is slow or ours?  Please use www.speedtest.net to test your connection.  If the problem is on your end, we are now working on a solution to help people with slow connections.  If you would like to discuss this, please send me an email directly to support@jove.com and I'll see what may be the problem.

2.1

Reply

Posted by: AnonymousMarch 28, 2008, 11:09 AM

Hi,nikitab. Thank your help. I am from China, I test my connection, the connection is slow from USA to my city. could you tell me how to fix this problem?

2.1.1

Reply

Posted by: AnonymousMarch 28, 2008, 10:04 PM

If you click the pause pause/play button, the video will buffer and you should be able to play it without interruptions after some time.  Hope tihs helps!

2.1.1.1

Reply

Posted by: AnonymousMarch 28, 2008, 10:21 PM

Merin, just wanted to let you know that we've upgraded the video player.  How are the videos playing now?

2.1.1.2

Reply

Posted by: AnonymousMay 15, 2008, 6:34 PM

 wow ive learned alot from this can you tell me more about this? is it different from human skin transplants? there is alot going on with stem cell, is this simular, this is intresting, would this maby help people that have bad skin burns?

3

Reply

Posted by: DuaneFebruary 3, 2009, 11:16 PM

hello this is interesting, is this simular to human skin transplants? does this help people with bad skin burns?  theres alot going on with stem cell research is this simular? i have learned alot from this vidio, i wait for your answers.

5

Reply

Posted by: DuaneFebruary 3, 2009, 11:32 PM

Hi, Kym, I learn the technique of ear-skin graftting through the video. Well, in the articles about skin graft in mice, most of them just use the method of back-back or tail-back skin transplantation. And do you provide some articles about ear-back skin graft to me? Thank you very much.
cai

6

Reply

Posted by: caicaidaoJuly 9, 2009, 7:37 PM

beautiful video. we use a similar technique at the Diamantina Institute, but I got some handy hints watching your technique. thanks.

7

Reply

Posted by: purnima bhatAugust 5, 2009, 1:41 AM

Are donor and recipient mice females or males?

8

Reply

Posted by: RichardSeptember 24, 2009, 12:54 PM

Hi Kym. I was wondering if you or your colleges transplant embryonic skin that way, or if there has to be special protocol for that?

9

Reply

Posted by: Ksenia Gnedeva, Burnham Institute for Medical ResearchJanuary 21, 2010, 4:29 PM

Hi Kim,
we do skin grafts and we have problems with the bandage. I use band-aids (the ones sold in the regular pharmacy for cuts and bruises) and mice chew them off as soon as they weak up from anesthesia. I do not see in your materials list what kind of bandage you use. Would you please tell me where do you buy it and the catalog number? I would really appreciate.
best regards
sg

10

Reply

Posted by: Stefania GallucciMay 28, 2010, 3:03 PM

why i can't see it? is it because the subscription lock? Our school don't have this database. How can i see it ? is it mean that that i need to buy it ?

11

Reply

Posted by: AnonymousOctober 16, 2011, 8:02 AM

Access to this article is only available through an institutional subscription. Please contact your Librarian and include me on cc, and we will arrange a 2 weeks FREE trial to the entire institution. Not only will this give you access to this article but will provide you with the opportunity to access other content.

I hope this helps bridge the gap a little and I look forward to speaking with you soon.

Best wishes,

Ward Parry
Director of Library Relations
Journal of Visualized Experiments (JoVE)
48 Grove Street, Suite 305, Somerville, MA 02144
T. 617.996.9161
E. ward.parry@jove.com

11.1

Reply

Posted by: ward parryOctober 16, 2011, 6:40 PM

I am very sorry that i reply so late. At first, i try to contact you through email, but it was rejected by the recipient domain.
I am from China and our school librarian didn't have this service now, so i only to contact you, and thank you to arrange a free trial for me. Please tell me what should i do to apply the free trial, you can send the details to me. If i can't receive your email. i will post message on jove.thank you again.
Best wishes
jin liu
Chengdu, China. Chengdu medical college
Sichuan Province, Chengdu Chengdu City Jinniu District Road No. 601

12

Reply

Posted by: jin l.October 19, 2011, 9:37 PM

Dear Jin,
I have forwarded your response to our account manager in China. She will be in touch in due course. Thank you for your interest in JoVE.

Best,
Ward

12.1

Reply

Posted by: ward parryOctober 20, 2011, 12:14 PM

thank you!

12.1.1

Reply

Posted by: jin l.October 21, 2011, 9:37 AM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Waiting
simple hit counter