The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
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Boddington, S., Henning, T. D., Sutton, E. J., Daldrup-Link, H. E. Labeling Stem Cells with Fluorescent Dyes for non-invasive Detection with Optical Imaging. J. Vis. Exp. (14), e686, doi:10.3791/686 (2008).
फ्लोरोसेंट रंजक के साथ mesenchymal स्टेम सेल के लेबल क्या
फ्लोरोसेंट रंजक भारतीय तट रक्षक के साथ मानव भ्रूण स्टेम कोशिकाओं के लेबल
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पुराना एक अपेक्षाकृत नया इमेजिंग तकनीक है, प्रतिदीप्ति का पता लगाने पर आधारित है. पुराना radiotracer आधारित इमेजिंग तकनीक के रूप में के रूप में प्रति संवेदनशील है, लेकिन किसी भी विकिरण जोखिम के साथ संबद्ध नहीं है. पुराना ट्रैकिंग गैर invasively और repetitively कोशिकाओं का एक प्रभावी साधन प्रदान करता है, जिससे लक्षित साइट के लिए सेल प्रवास में अंतर्दृष्टि प्रदान. तकनीक का एक प्रमुख सीमा vivo में फ्लोरोसेंट जांच के सीमित ऊतक पैठ है. इस प्रकार, गहरी ऊतकों में एक ट्रेसर संचय, त्वचा की सतह से 5-10 सेमी के बारे में की तुलना में अधिक का पता लगाया नहीं किया जा सकता है. वर्तमान नैदानिक अनुप्रयोगों इंडोस्कोपिक, हृदय और retinae इमेजिंग (Funovics एट अल 2003.) के रूप में सतही तकनीकों को सीमित कर रहे हैं, लेकिन अनुसंधान के इस डोमेन के लिए विशाल vivo में सेल ट्रैकिंग में की पेशकश की संभावनाओं की मान्यता के माध्यम से विस्तार जारी रहेगा.
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यह परियोजना एक लियोन पुनर्योजी चिकित्सा के लिए कैलिफोर्निया इंस्टीट्यूट से जे थाल बीज अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था. टोबीस हेनिंग एक जर्मन रिसर्च एसोसिएशन (DFG, महामहिम 4578/1-2) से वजीफा रिसर्च द्वारा वित्त पोषित किया गया था. हम मानव भ्रूण स्टेम कोशिकाओं की संस्कृति पर अपनी सलाह के लिए आभार Juanito Meneses को स्वीकार करना चाहते हैं.
| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| Indocyanine Green (IR-125) | Reagent | Fisher Scientific | AC41254-1000 | |
| DMSO | Reagent | Sigma-Aldrich | D-2650 | |
| D-MEM High Glucose | Reagent | Sigma-Aldrich | D5648 | |
| Gelatin | Reagent | Sigma-Aldrich | G1890 | Dilute to final concentration of 0.1% in PBS |
| PBS, Mg and Ca free | Reagent | GIBCO, by Life Technologies | 14190-144 | |
| Trypsin-EDTA 0.05% | Reagent | Invitrogen | 25300-120 | |
| Trypsin-EDTA 0.25% | Reagent | Invitrogen | 25200-114 | |
| FCS, characterized | Reagent | Hyclone | SH30071.03 | |
| Cell Strainer (40 μm Nylon) | Reagent | BD Biosciences | 352340 | |
| DiD | Reagent | Molecular Probes, Life Technologies | V-22887 | |
| Knockout DMEM | Reagent | GIBCO, by Life Technologies | 10829018 | |
| Knockout Serum Replacer | Reagent | GIBCO, by Life Technologies | 10828028 | |
| b-Mercapt–thanol | Reagent | Sigma-Aldrich | 7522 | |
| Non-essential Amino Acids | Reagent | GIBCO, by Life Technologies | 11140050 | |
| FGF-2 | Reagent | R&D Systems | 233-FB-025 | |
| Glutamine 200mM | Reagent | GIBCO, by Life Technologies | 25030081 | |
| Penicillin/Streptomycin | Reagent | GIBCO, by Life Technologies | 15140-122 | |
| Protamine Sulfate | Reagent | American Pharmaceutical Partners |
1. Daldrup-Link, H.E., Rudelius, M., Metz, S., Piontek, G., Settles, M., Pichler, B., Heinzmann, U., Weinmann, H.J., Schlegel, J., Link, T.M., Rummeny, E.J., Oostendorp, R.A.J. Stem cell tracking with Gadophrin-2 – a bifunctional contrast agent for MR imaging, optical imaging and fluorescence microscopy. Eur J Nucl Med Mol Imaging 31,1312-21 (2004)
2. Simon, G.H., Daldrup-Link, H.E., Kau, J., Metz, S., Schlegel, J., Piontek, G., Saborowski, O., Demos, S., Duyster, J., Pichler, B.J. Optical imaging of experimental arthritis using allogeneic leukocytes labeled with a near-infrared fluorescent probe. Eur J Nucl Med & Mol Imaging, 33, 998-1006 (2006)
3. Sutton, E., Henning, T., Pichler, B., Bremer, C., Daldrup-Link, H.E. Cell Tracking with Optical imaging. Eur Radiol in press
4, Funovics, M.A., Alencar, H., Su, H.S., Khazaie, K., Weissleder, R, Mahmood, U. Miniaturized multichannel near infrared endoscope for mouse imaging. Mol Imaging 2, 350-357 (2003)
Hi,
Congratulations on the excellent video article. Please allow for two questions:
1. how many generations until the dye is diluted below the point of detection with the respective procedures ?
2. do you see directed movement in lesion models (stroke etc.)?
Thanks,
Peter
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ReplyPosted by: AnonymousApril 4, 2008, 2:08 PM