The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
Authors
The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
This translation into Swedish was automatically generated through Google Translate.
English Version | Other Languages
Max Plank Institute for Molecular Cell Biology and Genetics, Dresden
This article is a part of JoVE General. If you think this article would be useful for your research, please recommend JoVE to your institution's librarian.
Recommend JoVE to Your LibrarianCurrent Access Through Your IP Address
You do not have access to any JoVE content through your current IP address.
IP: 50.17.109.248, User IP: 50.17.109.248, User IP Hex: 840003064
Current Access Through Your Registered Email Address
You aren't signed into JoVE. If your institution subscribes to JoVE, please sign in or create an account with your institutional email address to access this content.
Bucholtz, F. Principles of Site-Specific Recombinase (SSR) Technology. J. Vis. Exp. (15), e718, doi:10.3791/718 (2008).
Platsspecifika recombinase (SSR) teknik gör det möjligt att manipulera genstruktur att utforska geners funktion och har blivit en integrerad verktyg för molekylärbiologi. Platsspecifika recombinases är proteiner som binder till olika DNA-sekvenser mål. Den Cre / lox systemet beskrevs första gången bakteriofager under 1980-talet. Cre recombinase är en typ I topoisomeras som katalyserar platsspecifik rekombination av DNA mellan två loxP (locus för X-over P1) webbplatser. Den Cre / lox-systemet kräver inga kofaktorer. LoxP sekvenser innehåller olika bindningsställen för Cre recombinases som omger en riktad kärna sekvens där rekombination och ombildning sker. När celler innehåller loxP webbplatser och uttrycka Cre recombinase sker en rekombination händelse. Dubbelsträngat DNA klipps både loxP platser av Cre recombinase, ordnas och knyts ihop ("sax och lim"). Produkter av rekombination händelsen beror på den relativa orienteringen av asymmetriska sekvenser.
SSR-tekniken används ofta som ett verktyg för att undersöka geners funktion. Här genen av intresse flankeras med Cre mål sajter loxP ("floxed"). Djur är sedan korsat med djur som uttrycker Cre recombinase under kontroll av en vävnad-specifika promotorn. I vävnader som uttrycker Cre recombinase det binder till målet sekvenser och punktskatter på floxed genen. Kontrollerad gendeletion gör utredningen av geners funktion i specifika vävnader och vid olika tidpunkter. Analys av geners funktion anställa SSR teknik --- villkorlig mutagenes - har betydande fördelar jämfört med traditionella knock-outs där gendeletion ofta dödlig.
Hi.
The presentation was good and substantial. It would much good if the delicate concepts of selection are also included.
Thank you.
Cheers,
Lopez Gilsinia Gilroy
1
ReplyPosted by: Lopez Gilsinia GilroyMay 31, 2008, 5:54 AM