The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
Authors
The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
This translation into Portuguese was automatically generated through Google Translate.
English Version | Other Languages
Max Plank Institute for Molecular Cell Biology and Genetics, Dresden
This article is a part of JoVE General. If you think this article would be useful for your research, please recommend JoVE to your institution's librarian.
Recommend JoVE to Your LibrarianCurrent Access Through Your IP Address
You do not have access to any JoVE content through your current IP address.
IP: 54.234.42.16, User IP: 54.234.42.16, User IP Hex: 921315856
Current Access Through Your Registered Email Address
You aren't signed into JoVE. If your institution subscribes to JoVE, please sign in or create an account with your institutional email address to access this content.
Bucholtz, F. Principles of Site-Specific Recombinase (SSR) Technology. J. Vis. Exp. (15), e718, doi:10.3791/718 (2008).
Site-specific recombinase tecnologia (SSR) permite a manipulação da estrutura dos genes para explorar a função do gene e se tornou uma ferramenta integrante da biologia molecular. Site-specific recombinases são proteínas que se ligam a seqüências de DNA-alvo distintos. O sistema Cre / lox foi descrita pela primeira vez em bacteriófagos durante a década de 1980. Cre recombinase é uma topoisomerase tipo I que catalisa site-specific recombinação de DNA entre dois loxP (locus de X-over P1) sites. O sistema Cre / lox não requer cofatores. Seqüências distintas LoxP contêm sítios de ligação para recombinases Cre que envolvem uma seqüência núcleo direcional onde a recombinação e rearranjo ocorre. Quando as células contêm sites loxP e expressar a recombinase Cre, um evento de recombinação ocorre. Dupla fita de DNA é cortada em ambos os locais loxP pelo Cre recombinase, reorganizados, e ligados ("tesoura e cola"). Produtos do evento de recombinação depende da orientação relativa das seqüências assimétrica.
Tecnologia SSR é freqüentemente usado como uma ferramenta para explorar a função do gene. Aqui, o gene de interesse é flanqueado com Cre-alvo locais loxP ("floxed"). Os animais são então cruzados com animais expressando a recombinase Cre sob o controle de um promotor de tecidos específicos. Nos tecidos que expressam a recombinase Cre se liga a seqüências alvo e extirpa o gene floxed. Deleção do gene controlado permite a investigação da função dos genes em tecidos específicos e em momentos distintos. Análise da função do gene empregando tecnologia SSR --- mutagênese condicional - tem vantagens significativas sobre os tradicionais knock-outs onde deleção do gene é freqüentemente letal.
Hi.
The presentation was good and substantial. It would much good if the delicate concepts of selection are also included.
Thank you.
Cheers,
Lopez Gilsinia Gilroy
1
ReplyPosted by: Lopez Gilsinia GilroyMay 31, 2008, 5:54 AM