The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.

Recommend to Librarian

Automatic Translation

This translation into Hebrew was automatically generated through Google Translate.
English Version | Other Languages

 JoVE General

מכתים חלבונים ג'ל

1, 2

1Keck Graduate Institute of Applied Life Sciences, UVP, LLC, 2Proteomic Center, Keck Graduate Institute of Applied Life Sciences

 

Video Article Chapters

Cite this Article: מכתים חלבונים ג'ל

Gallagher, S., Chakavarti, D. Staining Proteins in Gels. J. Vis. Exp. (17), e760, doi:10.3791/760 (2008).

Abstract: מכתים חלבונים ג'ל

בעקבות ההפרדה על ידי שיטות electrophoretic, חלבונים בג'ל ניתן להבחין באמצעות שיטות צביעה שונות. יחידה זו מתארת ​​פרוטוקולים לאיתור חלבונים על ידי ארבע שיטות פופולרי. מכתים Coomassie הכחול הוא שיטה קלה ומהירה. כסף מכתים, בעוד זמן רב יותר, באופן משמעותי יותר רגיש ולכן יכול לשמש כדי לזהות כמויות קטנות יותר של חלבון. מכתים פלורסנט היא אלטרנטיבה פופולרית נהלים מכתים מסורתי, בעיקר משום שהוא רגיש יותר מכתים Coomassie, ולעתים קרובות הוא רגיש כמו מכתים כסף. הכתמה של חלבונים עם SYPRO כתום SYPRO רובי הם הפגינו גם כאן.

Protocol: מכתים חלבונים ג'ל

פרוטוקול טקסט מלא לגישה זו ניסיוני זמין הפרוטוקולים נוכחי בביולוגיה מולקולרית .

Disclosures: מכתים חלבונים ג'ל

Ask the Author: מכתים חלבונים ג'ל

8 Comments

WHICH REACTION EQUATION OF CONVERT Cu+2 TO Cu+1 in the protein test

1

Reply

Posted by: najahAugust 3, 2008, 7:45 AM

thank you!very good!

2

Reply

Posted by: yushaSeptember 6, 2008, 8:51 PM

It is very good, thanks

4

Reply

Posted by: AnonymousNovember 12, 2008, 6:43 AM

A good and cheap alternative to SYPRO Rubi is RuBPS staining. Here are some protocols. More information can be found on www.ruthenium.ag.vu

 

RuBPS staining protocol I (quality)

1. Fix the gel in 30% EtOH, 10% acetic acid overnight

2. Rinse the gel in 20% EtOH for 30 min and repeat 3 times

3. Incubate the gel in 1 mM RuBPS solution for 6 h

4. Equilibrate the gel in water for 10 min and repeat once

5. Destain the gel with 40% EtOH/10% acetic acid for 15 h

6. Equilibrate the gel in water for 10 min repeat once and scan

 

all% are in V/V

 

Procedure as published in Proteomics 2004, 4, 599–608.

 

 

RuBPS staining protocol II (fast)

 

1. Incubate the gel in 50 ml of 40% Ethanol/10% acetic acid containing

   1 mM RuBPS for 1 h.

2. Destain the gel for 20 min in 40% Ethanol/10% acetic acid

3. Wash the gel for 10 min in water and scan

 

all% are in V/V

 

Procedure as published in PLoSONE. 2007 Feb 28;2(2)e263.

 

 

 

RuBPS staining protocol III (co-electrophoretical)

 

1. Add 1 ml of 20 mM stock solution to one pocket of your SDS gel. Run

    the gel according to your standard procedure.

2. Incubate the gel in 50 ml of 40% Ethanol/10% acetic acid for 20 min

3. Incubate the gel in 50 ml water for 10 min and scan

 

 

 

RuBPS staining protocol IV (loading buffer)

 

1. Add 1 ml of 20 mM stock solution to your loading buffer (omit all other

    dyes like bromophenol blue). Run the gel according to your standard

    procedure.

2. Incubate the gel in 50 ml of 40% Ethanol/10% acetic acid for 20 min

3. Incubate the gel in 50 ml water for 10 min and scan

 

5

Reply

Posted by: LamandaFebruary 16, 2009, 1:20 PM

Itz realy 2 gud!

7

Reply

Posted by: AnonymousMay 18, 2009, 11:01 AM

Thank yoy

12

Reply

Posted by: JASSIM A.May 20, 2009, 9:39 AM

thank you

13

Reply

Posted by: ibrahim b.August 27, 2010, 12:31 AM

thanks! This is very useful for my job!

14

Reply

Posted by: RichardTrinhAugust 31, 2010, 4:33 AM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Waiting
simple hit counter