The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
Authors
The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
This translation into Arabic was automatically generated through Google Translate.
English Version | Other Languages
1Medical Sciences Program, McMaster University, 2Centre for Gene Therapeutics, McMaster University, 3Department of Chemical Engineering, University of Waterloo
This article is a part of JoVE General. If you think this article would be useful for your research, please recommend JoVE to your institution's librarian.
Recommend JoVE to Your LibrarianCurrent Access Through Your IP Address
You do not have access to any JoVE content through your current IP address.
IP: 50.17.134.177, User IP: 50.17.134.177, User IP Hex: 840009393
Current Access Through Your Registered Email Address
You aren't signed into JoVE. If your institution subscribes to JoVE, please sign in or create an account with your institutional email address to access this content.
Boudreau, J., Koshy, S., Cummings, D., Wan, Y. Culture of myeloid dendritic cells from bone marrow precursors. J. Vis. Exp. (17), e769, doi:10.3791/769 (2008).
وقد تم تكييف هذا البروتوكول من لوتز وآخرون 1
الحصاد ومعالجة نخاع العظم
ثقافة من الخلايا الجذعية
إضافة الوسائط (اليوم 3)
لتحديث وسائل الإعلام ، إضافة نصف الحجم الكلي للسائل الاعلام جديدة تستكمل مع 40 نانوغرام / مل GM - CSF.
استبدال ثلث وسائل الإعلام (يوم 6) ، والنضج
لتحديث وسائل الإعلام ، وإزالة بعناية ثلث إجمالي حجم وسائل الإعلام واستبدالها هذا الحجم مع وسائل الاعلام DC جديدة تستكمل مع 40 نانوغرام / مل GM - CSF في يوم 6 من الثقافة.
إذا رغبت في ذلك ، يمكن أن تحفز الخلايا الجذعية لنضوج باستخدام السيتوكينات أو مستقبلات يغاندس حصيلة شبيهة. في الفيديو ، كانت البلدان النامية التي نضجت التحفيز بين عشية وضحاها مع 5 نانوغرام / مل CPG.
حصاد الخلايا الجذعية
DC ثقافة كاملة (الشكل 2). وسوف تكون الخلايا في كل من التعليق وانضمت إلى لوحة فضفاضة. ويمكن إزالة الخلايا الالتزام عن طريق كشط الطبق بمنديل مكشطة الثقافة والشطف مع برنامج تلفزيوني. العدد الكلي للخلايا ستزيد 5-8 مرات خلال الثقافة لمدة أسبوع وفترة التمايز ، ولذلك ، نتوقع أن الحصاد 1-1،6 × 10 6 خلية / مل. 
الشكل 2
الكواشف
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
البلدان النامية هي مفيدة لدراسات التفاعلات المناعية الفطرية والتكيفية ، ويمكن استخدامها كناقل اللقاح. في هذا الفيديو ، وقد برهنا على خطوات لعزل النخاع العظمي والخلايا الجذعية التفريق النخاعي في المختبر. بعد فترة الثقافة ، ويمكن تصور هذه الخلايا مجهريا كل من الخلايا الملتصقة والتي غالبا ما تمتلك التشعبات وخلايا مستديرة غير ملتصقة. ويمكن للبلدان النامية لمزيد من التلاعب العرض مستضد التي ينبض مع مستضد أو تحفيز للإنتاج خلوى وcostimulatory upregulation جزيء باستخدام السيتوكينات و / أو مستقبلات يغاندس حصيلة مثل (للمراجعة ، انظر جلبوع ، 2008 (2)).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
معتمد من قبل JB منحة دراسية من العلوم الطبيعية والهندسة مجلس البحوث (NSERC). تم تقديم الدعم لهذا المشروع من قبل المعاهد الكندية لأبحاث الصحة والمنح MOP - 67066.
| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| recombinant murine GM-CSF | Reagent | Peptrotech | 315-03 |
1. Lutz, M.B., Kukutsch, N., Ogilvie, A.L., Rossner, S., Koch, F., Romani, N. & Schuler, G. An advanced culture method for generating large quantities of highly pure dendritic cells from mouse bone marrow. J. Immunol. Methods. 223. 77-92 (1999).
2. Gilboa, E. DC-based cancer vaccines. J. Clin. Invest. 117. 1195-1203 (2007).
Adherent cells are macrophages not DCs. They are >95% F4/80 positive macrophages.
1
ReplyPosted by: Bijaya ParidaDecember 12, 2008, 1:21 PM