The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
Authors
The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
This translation into Arabic was automatically generated through Google Translate.
English Version | Other Languages
Division of Cardiovascular Medicine, Stanford University
This article is a part of JoVE General. If you think this article would be useful for your research, please recommend JoVE to your institution's librarian.
Recommend JoVE to Your LibrarianCurrent Access Through Your IP Address
You do not have access to any JoVE content through your current IP address.
IP: 107.20.129.212, User IP: 107.20.129.212, User IP Hex: 1796506068
Current Access Through Your Registered Email Address
You aren't signed into JoVE. If your institution subscribes to JoVE, please sign in or create an account with your institutional email address to access this content.
Yamada, M., Yang, P. In vitro Labeling of Human Embryonic Stem Cells for Magnetic Resonance Imaging. J. Vis. Exp. (18), e827, doi:10.3791/827 (2008).
وقد أظهرت الخلايا الجذعية الجنينية البشرية (hESC) القدرة على استعادة عضلة القلب المصاب. وقد برز التصوير بالرنين المغناطيسي (MRI) باعتبارها واحدة من طرائق التصوير السائد لتقييم ترميم عضلة القلب المصاب. وعلاوة على ذلك ، تم توظيف وكلاء العلامات السابقين الحية ، مثل الحديد وأكسيد النانوية ، لتعقب وتوطين الخلايا الجذعية المزروعة. ومع ذلك ، فإن هذا الأسلوب لا مراقبة الممتلكات الأساسية البيولوجيا الخلوية بشأن الجدوى من الخلايا المزروعة. لقد كان من المعروف أن كلوريد المنغنيز (MnCl 2) يدخل الخلايا عبر الجهد بوابات الكالسيوم (كا 2 +) قنوات عندما كانت الخلايا النشطة بيولوجيا ، ويتراكم intracellularly لتوليد تأثير تقصير T 1. لذا ، نقترح أن المنغنيز الموجهة التصوير بالرنين المغناطيسي يمكن أن تكون مفيدة لمراقبة سلامة الخلية بعد زرع hESC في عضلة القلب.
في هذا الفيديو ، وسوف نعرض كيفية تسمية hESC مع MnCl (2) وكيف يمكن رؤيتها بوضوح تلك الخلايا باستخدام التصوير بالرنين المغناطيسي في المختبر. في الوقت نفسه ، والنشاط البيولوجي للكا 2 + القنوات سوف يتم استخدام التضمين سواء كا 2 + قناة ناهض وخصم لتقييم التغيرات المصاحبة إشارة.
المنغنيز وصفها من الخلايا الجذعية الجنينية البشرية
الوسم الحديد الخلايا الجذعية الجنينية البشرية
أداء الخلوية التصوير بالرنين المغناطيسي
تحليل نتائج التصوير بالرنين المغناطيسي
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
هذه النتائج تشير إلى أن المنغنيز لا يدخل عبر قنوات الكالسيوم الجهد مسور ، ويمكن استخدامها المنغنيز كعامل النقيض من التصوير بالرنين المغناطيسي ، والتي يمكن أن تظهر أيضا بقاء الخلية. لذا ، نقترح أن المنغنيز الموجهة التصوير بالرنين المغناطيسي يمكن أن تكون مفيدة لمراقبة سلامة الخلية بعد زرع الخلايا الجذعية الجنينية البشرية في عضلة القلب.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| Manganese chloride tetrahydrate | Reagent | Sigma-Aldrich | M8054 | |
| (S)-(-)-Bay K8644 | Reagent | Sigma-Aldrich | B133 | |
| (+)-Verapamil hydrochloride, minimum 99.0% titration | Reagent | Sigma-Aldrich | V4629 | |
| Sodium Chloride 0.85-0.90% W/V | Reagent | VWR international | VW 3257-1 | |
| Feridex I.V. | Reagent | Berlex Laboratories | NDC 59338-7035-5 | ferumoxides injectable solution 11.2mg iron/mL |
| Protamine sulfate | Reagent | American Pharmaceutical Partners | NDC 63323-229-05 | 50 mg (10 mg/mL) |
| Knockout SR (Serum replacement for ES cells) | Reagent | GIBCO, by Life Technologies | 10828 | |
| DMEM/F12 (1:1) | Reagent | GIBCO, by Life Technologies | 11330 | |
| 2- mercaptoethanol 98+% | Reagent | Sigma-Aldrich | M 3148 | |
| L-Glutamine 200mM 100x | Reagent | GIBCO, by Life Technologies | 25030 | |
| Penicillin-Streptomyocin 10,000 units/ml | Reagent | GIBCO, by Life Technologies | 15140-122 | |
| MEM Non-Essential Amino Acids 100x solution | Reagent | GIBCO, by Life Technologies | 11140 | |
| Signa HDx 3T MRI | Tool | GE Healthcare | ||
| clinical Knee coil | Tool | GE Healthcare | ||
| DPBS | Reagent | GIBCO, by Life Technologies | 14190 |
1. Bruvold, M., Nordhoy, W., Anthonsen, H. W., Brurok, H. & Jynge, P. Manganese-calcium interactions with contrast media for cardiac magnetic resonance imaging: a study of manganese chloride supplemented with calcium gluconate in isolated Guinea pig hearts. Invest Radiol 40, 117-25 (2005).
2. Aoki, I. et al. Cell labeling for magnetic resonance imaging with the T1 agent manganese chloride. NMR Biomed 19, 50-9 (2006).
3. Arbab, A. S. et al. Efficient magnetic cell labeling with protamine sulfate complexed to ferumoxides for cellular MRI. Blood 104, 1217-23 (2004).
4. Arbab, A. S. & Frank, J. A. Cellular MRI and its role in stem cell therapy. Regen Med 3, 199-215 (2008).
I like this kind of publication very much. It showed me the experiment in details and most important, the author offered me many tips. I learned a lot. Thanks for your beautiful work!
1
ReplyPosted by: Haitao ZhangOctober 21, 2008, 10:26 PM