الزراعة المشتركة لزرع عقدة الجذر الظهري مع خلايا شوان لتكوين النخاع العصبي

ابدأ بلوحة متعددة الآبار تحتوي على غطاء مغلف ب poly-D-lysine ووسط نمو الخلايا العصبية.

ضع عقدة الجذر الظهري الجنيني للفأر ، أو DRG ، الغنية بالخلايا العصبية الحسية ، في هذا البئر واحتضنها.

تستخدم الخلايا العصبية DRG العناصر الغذائية وعوامل النمو التي تسهل نموها ، تليها امتداد الإسقاطات العصبية ، وتشكيل المحاور.

تنمو هذه المحاور من أنسجة DRG ، مما يؤسس ثقافة النبتة DRG.

استبدل الوسط بوسط زراعة مشترك مكمل بحمض الأسكوربيك بخلايا شوان ، وهي خلية دبقية متخصصة.

بمرور الوقت ، تفرز المحاور جزيئات الإشارات التي تؤدي إلى هجرة خلايا شوان نحو المحاور.

وفي الوقت نفسه ، يحفز حمض الأسكوربيك مسارات الإشارات المختلفة في خلايا شوان.

تبدأ هذه الخلايا المنشطة في تمديد أغشية البلازما الغنية بالدهون حول المحاور ، ولفها في طبقات متعددة لتشكيل غمد المايلين.

ينتج عن هذا الميالين غطاء عازل حول المحاور ، وهو أمر ضروري للاتصال العصبي الفعال.

خذ صفيحة من أربعة آبار تحتوي على 190 ميكرولتر من وسط نمو DRG في كل بئر ، وانقل DRG واحد بعناية إلى وسط كل بئر باستخدام ملقط دقيق وملعقة. بعد ذلك ، ضع مزارع الزرع DRG في الحاضنة عند 37 درجة مئوية و 5٪ ثاني أكسيد الكربون. في اليوم التالي ، أضف بعناية 50 ميكرولترا من وسط نمو DRG إلى كل بئر ، ولاحظ التصاق نبات DRG ونمو المحور العصبي باستخدام المجهر يوميا. للزراعة المشتركة في اليوم الثالث من ثقافة الزرع DRG ، استبدل وسط نمو DRG بعناية ب 250 ميكرولتر من وسط الزراعة المشتركة الذي يحتوي على 30,000 خلية شوان لكل بئر.