نموذج الفئران التصوير غير الغازية لكشف ورصد سرطان المبيض تكرار

الهدف العام من هذا الإجراء هو إنشاء نموذج xenograft لسرطان المبيض داخل الصفاق يحاكي الملف السريري الذي لوحظ في المرضى الذين يعانون من سرطان المبيض. يتم تحقيق ذلك عن طريق الحقن داخل الرحم للخلايا الجذعية لسرطان المبيض في الفئران العارية. بعد ذلك ، يتم تحديد إنشاء تطور ورم الورم والاستجابة للعلاج عن طريق قياس التألق كبديل لعبء الورم.

هذا يسمح بمراقبة تطور الورم في الوقت الفعلي أو الاستجابة للعلاج دون الحاجة إلى التضحية بالفئران. النموذج الذي نعرضه هنا. يلخص B الملف السريري الذي لوحظ في المرضى الذين يعانون من سرطان المبيض ، وبالتالي فهو يسمح لنا ليس فقط بدراسة بيولوجيا المرض ، ولكن أيضا لتحديد العلاجات الجديدة ، خاصة لسرطان المبيض المتكرر.

يسمح لنا النموذج بمراقبة تطور الورم لتحديد ما إذا كان يستجيب للعلاج الكيميائي في الوقت الفعلي ، وكذلك لتحديد ما إذا كان المرض سيتكرر إذا توقف العلاج الكيميائي. لبدء هذا الإجراء ، قم بتخدير فأر عاري يبلغ من العمر سبعة إلى ثمانية أسابيع ، مع 2٪ من الفلور. ثم تحقق من أنه مخدر تماما عن طريق الضغط على وسادة قدمه.

بعد ذلك ، ضع على جانبه الأيمن ، وسادة شاش معقمة مع إبعاد رأسه عن المجري. ضع مرهما على كلتا العينين لمنع الجفاف أثناء التخدير بعد ذلك. أدخل رأس بسرعة في نظام مخروط الأنف المتصل بمبخر الأيزوفلوران.

تطهير الجانب الأيمن من البطن باستخدام ضمادات الكحول ، متبوعا باليود. ثم ضع الستارة الجراحية المعقمة فوقه باستخدام مقص جراحي معقم وملقط. قم بعمل شق جلدي بطول سنتيمتر إلى سنتيمترين في الربع الأيسر السفلي من الماوس.

بعد ذلك ، ارفع العضلات وقم بعمل شق للوصول إلى الصفاق. بعد ذلك ، قم بتشريح العضلة المائلة لفضح تجويف البطن. ثم حدد موقع قرن الرحم الأيسر باستخدام مشبك إرقاء معقم ، على الجانبين الأمامي والخلفي للقرن.

ضع المشبك الأمامي أسفل قناة فالوب والمشبك الخلفي فوق عنق الرحم مباشرة. في هذه المرحلة ، اطلب المجرب الثاني. حقن معلق الخلية عن طريق وضع الخلايا التي تحتوي على إبرة بزاوية 45 درجة عمودية على القرن.

ثم حقن ببطء 50 ميكرولتر من تعليق الخلية في تجويف قرن الرحم. بعد ذلك ، حرر المشبك الأمامي متبوعا بالمشبك الخلفي. بعد ذلك ، ضع قرن الرحم مرة أخرى في تجويف البطن.

أغلق الصفاق باستخدام خياطة اصطناعية قابلة للامتصاص. ثم أغلق الجلد باستخدام مادة لاصقة للأنسجة. عند الانتهاء ، قم بإزالة الماوس من مخروط الأنف وضعه مرة أخرى في قفصه.

تأكد من أن مستيقظ ونشط قبل تركه دون رقابة. توفير الإيبوبروفين في مياه الشرب خلال ال 48 ساعة الأولى بعد الجراحة. افتح الآن برنامج التصوير الجزيئي ، ثم افتح برنامج Mars Capture.

توفر هذه الوحدة تحكما منسقا في إعدادات التقاط المريخ مع الاستفادة من قدرات التقاط وتحليل أنظمة التصوير. بعد ذلك ، أدخل قيم الالتقاط المحددة مسبقا. بعد ذلك احفظ المعلمات كملفات جلسة فردية.

ثم قم بإنشاء بروتوكول تسلسل الدوران عن طريق تحديد الزر إنشاء بروتوكولات تحرير من نافذة اكتساب واجهة النظام ، حدد ملف جلسة الفلورسنت المحفوظ مسبقا واحفظه كخطوة أولى. بعد ذلك ، حدد ملف جلسة الأشعة السينية المقابل واحفظه كخطوة ثانية. مع تحديد الخطوة الأولى.

استخدم مجموعة التدوير من القائمة المنبثقة قبل التقاط الصورة لتعيين نطاق زاوية البداية المطلوبة وزيادتها. لضمان التصور السلس للميزات، تتضمن القيم المحددة زاوية انطلاق تبلغ 180 درجة تحت الصفر، ونطاق 375 درجة وزيادة قدرها 15 درجة. احفظ البروتوكول وانقر فوق الزر "تم" لتهيئة المريخ.

ثم ابدأ المحاذاة عن طريق تحديد زر المعاينة في قائمة الاستحواذ لإظهار علامة تبويب الدوار ، واستخدم إعداد التقاط التألق كما هو محدد لتصوير الكرز M. اترك الباب مفتوحا أثناء المعاينة لتسريع تحديد المواقع ، مما يسمح أيضا بالفحص البصري لموضع الماوس أثناء إجراء المحاذاة. بعد ذلك ، حدد خيار تحميل الماوس وتابع سلسلة قوائم تحديد المواقع.

تأكد من أن الطرف الأنبوبي لمخروط الأنف القابل للطي موجود في تجويف مخروط الأنف. ثم ضع الفأر المخدر في الاتجاه الانبطاح مع وضع رأسه في مخروط الأنف. ابدأ المعايرة في وضع درجة الصفر بحيث يكون الجانب البطني للحيوان متجها لأسفل.

استخدم المقبضين الموجودين في نظام التدوير لوضع بحيث يظهر في المنتصف في نافذة المعاينة. كرر العملية كما هو مطلوب للمواضع سالب 180 ، ناقص 90 زائد 90 وزائد 180 درجة وانقر فوق تم. فيما يلي مثال على فيلم تم إنشاؤه من الصور التي تم الحصول عليها.

يوضح هذا الشكل العلاقة بين عبء الورم داخل الصفاق وصورة تراكب الأشعة السينية الفلورية. بعد حوالي 32 يوما من حقن خلايا سرطان المبيض الكرزية F Two M تم إجراء التصوير ثنائي الأبعاد وتم التضحية بالفئران لربط الصورة المكتسبة بعبء الورم الفعلي. وتظهر هنا مجموعات بيانات الدوران التي تسمح بالتصوير متعدد الزوايا والكشف عن الأورام في السيطرة ، ومعالجة باكليتاكسيل ، والفئران المتكررة.

تظهر صورة ماوس واحد لكل لوحة أثناء تدويرها باستخدام نظام المريخ. لاحظ أنه حتى في الفئران الضابطة التي تعاني من عبء كبير على الورم ، يمكن التقليل من حجم الورم اعتمادا على الزاوية التي تم التقاط الصورة منها. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن تكون قادرا على إنشاء نموذج xenograft لسرطان المبيض داخل الصفاق باستخدام الطريق داخل الرحم ، بالإضافة إلى أن تكون قادرا على إجراء تصوير حيواني حي باستخدام نظام دوران متعدد الوسائط.