ديسمبر 8, 2014
تقنية إنزال الوزن المعدلة هي إجراء سهل وفعال من حيث التكلفة يستخدم لتحريض إصابات الدماغ الرضحية الخفيفة في الفئران الصغيرة. تنتج هذه التقنية الجديدة أعراضا ذات صلة سريريا من شأنها أن تعزز دراسة إصابات الدماغ الرضحية الخفيفة (mTBI) والارتجاج.
الهدف العام من هذا الإجراء هو إحداث إصابة دماغية خفيفة في الفئران الصغيرة. يتم تحقيق ذلك عن طريق إعداد منصة تحريض الإصابة أولا. بعد ذلك ، يتم وضع فأر مخدر ووجهه لأسفل على ورق القصدير المسجل.
بمجرد وضعه في مكانه ، يتم إسقاط الوزن لتوليد ضربة خاطفة على الرأس. ثم يتم وضع في وضع ضعيف ، ويتم تسجيل الوقت الذي يستغرقه الكتابة بنفسه. يتم قياس أداء اليوم التالي في اختبار شعاع المشي.
لذا فإن المزايا الرئيسية لهذه التقنية على غيرها هي أن يتم تخديرها لفترة وجيزة فقط. إنها إصابة مغلقة في الرأس ، مما يسمح لنا بتكرار الإصابة في نفس عدة مرات ، وهناك مكون دوراني للإصابة أكثر صلة سريريا. تمتد الآثار المترتبة على هذه التقنية إلى علاج ارتجاج الأطفال وإصابات الدماغ الرضحية الخفيفة لأن النموذج يحفز الأعراض ذات الصلة سريريا بطريقة غير متجانسة ، مما يدل على أن الإجراء سيكون إيرين ما ، فني في مختبرنا وهارلين هاها.
في طالب البكالوريوس في مختبرنا. لإعداد جهاز إصابات الدماغ الرضحية الخفيفة ، قم ببناء مرحلة على شكل حرف U مصنوعة من البلاستيك الشفاف. ضع إسفنجة في الجزء السفلي من المرحلة لجمع بعد سقوطه.
بعد ذلك ، قم بتسجيل قطعة من ورق القصدير بشفرة حلاقة حادة. تأكد من أن ورق القصدير المسجل يدعم وزن جسم الفئران ، ولكنه لن يتداخل مع التسارع بعد الاصطدام. قم بلصق ورق القصدير المسجل أعلى المسرح بحيث يكون تاو ، وضعه في الموضع الصحيح أسفل أنبوب التوجيه.
ضع أنبوب التوجيه بحيث يكون 3.5 سم فوق ورق القصدير. بعد ذلك ، قم بإرفاق خط الصيد بالجزء العلوي من الوزن. ضع الوزن داخل أنبوب التوجيه وقم بتثبيت الخط بحيث يتدلى الوزن بمقدار 2.5 سم فوق الرقاقة.
يمنع هذا الارتفاع الجرذ من تلقي ضربات متعددة بشكل آمن. اربط خط الصيد بحامل المشبك. اسحب الوزن لأعلى من خلال أنبوب التوجيه البلاستيكي باستخدام خط الصيد وثبته في مكانه باستخدام دبوس مفتاح Allen الموجود على ارتفاع 0.5 متر.
للبدء ، تأكد من عمق التخدير في فأر مخدر وضع صدر الفئران بسرعة على الرقاقة مع رأسه مباشرة في مسار الوزن المتساقط. عندما تكون جاهزا للبدء ، اسحب دبوس مفتاح Allen للسماح للوزن بالسقوط عموديا من خلال أنبوب التوجيه البلاستيكي. بمجرد اصطدامه ، سيخضع الجرذ بسرعة لدوران 180 درجة ويهبط في وضع ضعيف.
قم بإزالة الجرذ على الفور من إسفنجة التجميع وقم بتطبيق الليدوكائين الموضعي على رأس الفئران باستخدام قضيب قطني مائل. بعد ذلك ، ضع الفئران في وضع ضعيف في قفص نظيف وساخن. راقب حتى يستيقظ من التخدير ويقلب من وضعية الاستلقاء إلى وضعية الانبطاح.
سجل هذا كوقت لكتابة القيمة للمجموعة الضابطة المصابة الوهمية. قم بتخدير ووضعه على خشبة المسرح كما هو موضح سابقا. بعد ذلك ، قم بإزالة الجرذ من ورق القصدير دون سحب دبوس مفتاح ألين وقم بتطبيق الليدوكائين الموضعي على الرأس.
ضع الجرذ في وضع ضعيف في قفص نظيف وساخن وسجل وقت كتابة القيمة. أخيرا ، أعد الجرذ إلى قفص منزله بعد أن يستعيد سلوكه الطبيعي وكرر ذلك مع التحكم التالي. بعد 24 ساعة من تحريض إصابة الدماغ ، أعد إلى غرفة الإجراءات.
انقل الفئران إلى قفص احتجاز نظيف وضع قفص منزل الفئران. في الطرف الأضيق من وجه الشعاع المدبب ، الجزء المفتوح من القفص باتجاه الطرف العريض من الحزمة. يحتوي الشعاع المدبب على منصة مركزية مع حواف صغيرة توفر الأمان.
ضع كاميرا فيديو في الطرف العريض من الشعاع واضبط التركيز البؤري حتى يصبح الطول بالكامل مرئيا. عندما تكون جاهزا ، ضع الجرذ في الطرف العريض من الشعاع المدبب وشجعه على السير عبر العارضة باتجاه قفص منزله. بمجرد أن يعبر الجرذ الشعاع ويدخل قفص المنزل ، اتركه يرتاح لمدة 60 ثانية على الأقل.
لتعزيز الموقع المستهدف ، هذه هي التجربة الأولى ولم يتم تضمينها في التحليل. بعد ذلك ، قم بتشغيل كاميرا الفيديو واسمح للفئران بإكمال مهمة المشي على الشعاع لأوقات إضافية ، مع الحفاظ على فترات التعزيز 62 في قفص المنزل. بمجرد أن يكمل الجرذ جميع التجارب ، أعده إلى قفص المنزل واختبر التالي.
إذا سقط من العارضة أثناء الاختبار ، التقطه على الفور وضعه مرة أخرى على العارضة في الموقع الذي سقط منه. لتسجيل البيانات. بعد الاختبار ، سجل عدد زلات القدم الخلفية والوقت الإجمالي لعبور العارضة لكل تجربة فردية.
استخدم هذه البيانات لحساب متوسط القيم لكل ومجموعة اختبار. يقارن هذا الرسم البياني متوسط الاختلافات في الوقت المناسب لكتابة الدرجات بين الفئران الصغيرة التي تعرضت لإصابة دماغية واحدة مقارنة بالضوابط الوهمية. أظهرت الفئران المصابة زيادة كبيرة في المدة الزمنية اللازمة لكتابة نفسها من وضع الاستلقاء.
هنا ، يظهر متوسط عدد انزلاقات القدم الخلفية على مهمة المشي على العارضة للفئران الصغيرة التي تعرضت لإصابة واحدة. بالمقارنة مع الفئران المصابة الزائفة ، أظهرت المصابة انزلاقات أكبر بكثير في القدم عبر العارضة مقارنة بعناصر التحكم بعد هذا الإجراء. يمكن بعد ذلك استكشاف التدخلات الأخرى غير الغازية مثل العلاج باللعب لتحديد ما إذا كانت هذه التدخلات قادرة بالفعل على تحسين بعض العجز الاجتماعي الذي يعاني منه الأطفال بعد ذلك. ارتجاج.
بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية إحداث واكتشاف إصابة الدماغ الرضحية الخفيفة في القوارض الصغيرة. يمكن تكرار ذلك في نقاط زمنية متعددة.
تعد تقنية إسقاط الوزن المعدلة طريقة فعالة من حيث التكلفة لاستحثاث إصابة دماغية رضية خفيفة (mTBI) في الجرذان اليافعة. يولد هذا النهج أعراضاً ذات صلة سريرياً، مما يسهل إجراء المزيد من الأبحاث حول الإصابات الدماغية الرضية الخفيفة وارتجاج المخ.
يعالج هذا النموذج فجوة حرجة في الأبحاث قبل السريرية من خلال توفير نظام موثوق من جرذان اليافعين لمحاكاة إصابات الدماغ الرضية الخفيفة، مما يسمح بتقليل المخاطر الآلية للمرشحات الواقية للأعصاب. كما تدعم الميكانيكا الحيوية ذات الصلة سريرياً والمخرجات السلوكية عملية التحقق من الأهداف والثقة التنبؤية في مراحل الاكتشاف المبكرة. وتسهل قابليته للتكرار وانخفاض معدلات الوفيات فيه عمليات الفرز عالي الإنتاجية والاستمرارية الانتقالية للاستطبابات المتعلقة بالجهاز العصبي المركزي لدى الأطفال.
تندرج هذه الطريقة ضمن تسلسل عمليات الاكتشاف، بدءاً من التحقق من الهدف، مروراً بتحديد المركبات الرائدة، وصولاً إلى اختبارات الفعالية قبل السريرية، لا سيما بالنسبة للعلاجات الموجهة للجهاز العصبي المركزي التي تستهدف المسارات المرتبطة بالارتجاج.