Articles by Aih Cheun Lee In JoVE (1) 从海兔的神经细胞培养的高分辨率成像生长锥 Other Publications (5) Journal of NeurobiologyDevelopmental NeurobiologyJournal of Neuroscience ResearchBiophysical JournalJournal of Virology Articles by Aih Cheun Lee in JoVE Biology 从海兔的神经细胞培养的高分辨率成像生长锥 Aih Cheun Lee1, Boris Decourt1, Daniel M. Suter1 1Department of Biological Sciences, Purdue University 海兔californica神经元发展大文化的生长锥，生长锥的运动和指导的高分辨率成像的优秀。在这里，我们提出了一种海兔袋细胞神经元的剥离和电镀以及设立一个活细胞成像室的协议。 Other articles by Aih Cheun Lee on PubMed 高分辨率分析神经细胞生长锥形态的比较原子力显微镜和光学显微镜。 Journal of Neurobiology. Dec, 2006 | Pubmed ID: 17058186 神经元生长锥是能动性感官结构顶端的神经轴突，氙气指导信息到目标单元格的方向迈进。与光学技术 ； 以及特点是的形态学和神经元生长锥动态但是，提供的三维结构和力学性能的不同的分区域定量资料很少。在本研究中，我们拍摄大型海兔生长锥后化学固定用原子力显微镜 （AFM），并直接与光镜方法所取得的图像相比我们的数据。恒力成像在接触模式结合部队远距离测量显示 200 平均高度为外围 (P) 域，800 nm nm (T) 过渡地带和 1200 nm 为中心 (C) 域，分别。原子力显微镜图像显示 filopodial F-肌动蛋白束比周围 F-肌动蛋白网络更严厉。扩大后的例证的提示将 60 nm 高于相应的轴。原子力显微镜的具体生长锥地区的力学性能测量表明 T 区是比 P 和 C 域更严厉。直接比较的原子力显微镜和光学干涉对比度和荧光显微镜所获得的数据表明这些影像学方法之间的良好关系。然而，原子力显微镜提供了在更高的分辨率比荧光方法经常用来估计量的蜂窝车厢的高度和卷的信息。这些研究结果表明对活生长锥的原子力显微镜测量将提供量化的蛋白质可以不同生长锥区域之间移动的方式了解。 微管动态粘附介导生长锥指导期间的定量分析。 Developmental Neurobiology. Oct, 2008 | Pubmed ID: 18698606 期间粘附介导神经细胞生长锥指导微管接受主要重排。然而，它是未知是否微管扩展到粘附站点加号结束聚合和/或易位动态的变化由于肌动蛋白微管相互作用的变化，或因为他们遵循的肌动蛋白细胞骨架重组。在这里，我们用荧光斑点显微镜直接量化海兔生长锥微管和肌动蛋白动态，当他们转向珠与细胞粘附分子 apCAM 涂层。在粘连形成的初始阶段，期间动态微管外围域中的优先探索 apCAM 珠前生长锥形态和逆行肌动蛋白的变化流。有趣的是，这些早期的微管有聚合率保持不变，但花更少的时间中由于肌动蛋白流从解耦逆行易位。此外，探索粘附网站的微管花更少的时间在解聚。在稍后阶段的牵引部队的组建、 中心域进展和外围域中的多个微管扩展的肌动蛋白流量衰减和 F-肌动蛋白结构的间隙。微管在过渡区和中央域，然而，转移朝粘附站点在音乐会与肌动蛋白弧形和捆绑，分别。我们得出的结论粘附分子指导神经细胞生长锥和基础的微管重排，很大程度上由差异调节根据生长锥地区微管-肌动蛋白偶联和肌动蛋白运动而不是控制加端聚合速率。 皮层肌动蛋白 Filopodial 与 Colocalizes 和 IgCAM 粘附地盘在海兔生长锥累积。 Journal of Neuroscience Research. Apr, 2009 | Pubmed ID: 19021290 IgCAMs 和肌动蛋白细胞骨架在神经细胞生长锥动力和指导中发挥关键作用。但是，不清楚如何 IgCAM 受体换能器从细胞质膜的信号，以诱使肌动蛋白重塑。以往的研究表明地方聚类和固定化的 apCAM，海兔同系物的神经细胞粘附分子，诱使 Src 激酶活性和养殖海兔袋细胞生长锥的 F-肌动蛋白聚合外围的域中。因此，我们想要测试是否 Src 激酶基板和肌动蛋白调节皮层可能是 Src 活性与肌动蛋白大会期间 apCAM 介导生长锥指导之间的分子联系。在这里，我们克隆海兔皮层和显示它是在中枢神经系统中丰富。生长锥组化染色显示皮层与 F-肌动蛋白在 filopodial 包中和干预的前沿强共的定位。细胞骨架的摄动表示皮层分布很大程度上取决于肌动蛋白丝。此外，积极 Src colocalized 与皮层区域的肌动蛋白大会，包括前缘和例证的提示。最后，我们注意到，皮层，像 F-肌动蛋白介导生长锥指导 apCAM 粘附网站本地化。总之，这些数据表明，皮层是调解员的 IgCAM 触发的肌动蛋白大会参与生长锥动力和指导。 地形和力学的生活神经元生长锥的原子力显微镜分析。 Biophysical Journal. Jun, 2009 | Pubmed ID: 19527666 神经元生长锥是位于末尾的胞外指导信息转换为定向运动的神经轴突的能动性结构。尽管生长锥中神经元的发育和再生的重要作用，但相对地形了解甚少和力学性能不同亚细胞生长锥区域下的生活条件。在此研究中，我们利用原子力显微镜研究 P 域、 T 区和 C 域的活海兔生长锥。这些地区的平均高度计算从接触模式原子力显微镜图像是 183 + /-33、 + / 274 和 + /-164 1322年-690 nm，分别。这些研究结果都符合的数据来自生活和接触模式图像固定的生长锥的动态模式的图像。纳米压痕测量表明 C 域和 T 区厚道区域的弹性模量介乎 3 7 和 7 23 kPa，分别。测量弹性模量的 P 域的范围是 10-40 千帕。高分辨率图像的 P 域表明其相对较高的弹性模量结果从干预中的肌动蛋白丝密网和肌动蛋白束的例证。P 和 T 的域增加机械刚度很可能重要的是支持和生长锥转向期间发展起来的张力换能器。 传染性颗粒物预的登核衣壳核芯的救护工作。 Journal of Virology. Jun, 2011 | Pubmed ID: 21471237 甲是负责大量的人类和动物疾病的小，球形，封装、 积极意义，单链 RNA 病毒。作为一种工具使用微量注射预内核，系统已建立的大会和辛德毕斯病毒，甲病毒的类型成员的萌芽过程进行研究。我们证明表示以下注射的辛德毕斯病毒 nucleocapsids 净化从受感染细胞的细胞质的辛德毕斯病毒包膜糖蛋白的细胞释放的传染性病毒样颗粒。此外，它是所示 nucleocapsids 组装体外模仿那些孤立他们的能力将被纳入封装 virions 后注射受感染细胞的细胞质中。此系统允许发芽过程独立的正宗感染甲的研究，提供了一个平台研究病毒性和萌芽主机要求。
