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• イオン選択性レシオ メトリック プローブを用いたクラミジア ‐ トラコマティス介在物内の物理環境の決定。 Cellular Microbiology. May, 2002  |   Pubmed ID: 12027956 クラミジア ・ トラコマチスは ％30 細胞内細菌内介在物と呼ばれる膜結合液胞完全行わ二相性ライフ サイクルです。クラミジアの包含エンドソームとリソソームのコンパートメントと、膜融合がゴルジ装置からスフィンゴミエリン プラズマ膜への輸送に関与する経路と交差しています。成熟クラミジア介在物内の物理的な条件が知られています。我々 膜下流側へ、- イオンの蛍光染料と包含内の物理環境の microanalyis のレシオ メトリック イメージングを使用しました。CFDA （カルボキシ フルオレセイン ・ ジアセテート) または BCECF AM を使用 H +、Na +, K + およびカルシウム濃度の定量 (2'、7'-ビス (2-carboxyethyl) - 5, 6 - carboxyfluorescein アセトキシメチルセファロスポリン エステル、SBFI 午前、PBFI AM からフラ-PE3-acetomethoxyester だ （フラ PE3 午前だ）、それぞれの包含なった内腔側空間内試金される全てのイオン濃度は細胞質内を近似示さ。プリン受容体細胞外 ATP の添加による刺激は、細胞質と介在物のインテリア内に同時に発生した動的カルシウム応答トリガー。クラミジアを含めることは、こうして自由に細胞質イオンを透過するが表示されます。これらの結果は、クラミジアによる栄養塩の買収の意味合いを持って、エンドサイトーシスのコンパートメントを持つ介在物の非 fusogenicity に貢献するかもしれない。
• クラミジア ・ トラコマチスのアクチン細胞骨格中の添付ファイルと HeLa 細胞に入るに改造を誘導します。 Infection and Immunity. Jul, 2002  |   Pubmed ID: 12065523 活用する上皮細胞に侵入するクラミジア ‐ トラコマティスによって宿主の細胞機構を解明するには、クラミジア小学校体 (EBs) の内面のアクチン細胞骨格の役割を検討しました。サイトカラシン D と HeLa 細胞の治療は C. トラコマチスの血清型 L2 と D EBs の内面化を著しく抑制した.HeLa 細胞と EBs の関連サイトでローカライズされたアクチン重合の添付ファイルのいずれか間固定セルまたは実行可能な感染細胞における GFP アクチンのアクティブな募集の汚損によって視覚化として誘発。添付ファイルの特定のサイトへのアクチンの募集は細胞表面の微絨毛の形態の劇的な変化に伴われました。電顕では EBs とサイトカラシン D 依存の構造コンポーネントを介した C. トラコマチスの添付ファイルに依存していた過渡の microvillar 肥大を明らかにしました。また、C. トラコマチスの血清型 L2 のエントリをサポートしません変異町セルラインで露出に敏感である血清型 D, と感染症とは対照的である L2 EBs を次のような microvillar の肥大が表示されませんでした。C エントリはこの病原体の添付ファイルによって誘導されるプロセスを改造する、添付ファイルとエントリの即時のサイトでの台座のような構造の形成と細胞表面の全域で異なる microvillar 再編の結果、アクティブなアクチンによって促進されることを提案します。
• 卵胞刺激ホルモン応答性細胞骨格の遺伝子ラット顆粒膜細胞: クラス I の β-チューブリン ・ トロポミオシン 4 キネシンの重鎖。 Endocrinology. Jan, 2003  |   Pubmed ID: 12488327 FSH 顆粒膜細胞の分化と卵胞発育の遺伝子発現を調節します。したがって、FSH 応答遺伝子が重要なしかし唯一です、いくつかの遺伝子は卵胞の発育の初期段階の識別されています。特に、ほとんど可能性が高いなど主要なランドマークの幽門形成の形態学的変化で不可欠な役割を果たす細胞骨格の遺伝子について知られていません。FSH は未熟で、未分化のラット卵巣顆粒膜 （クリヴォログ） 細胞ラインの分化を誘導するも知られています。我々 のデータは、FSH 微小管とアクチン細胞骨格と同様、形態学的変化の大規模なまだ明確な再編の誘導を見る。FSH に分化中に応答がそれらの遺伝子を識別するには、差動表示 ROG セル上を行った。識別した 80 FSH 応答性遺伝子の細胞内の形態形成、トランスポート、および差別化のために重要です （クラス I β-チューブリン ・ トロポミオシン 4、キネシンの重鎖） 3 細胞骨格関連遺伝子があった。北のしみは、これらの遺伝子の転写レベル 6 h でピークに達した FSH 治療後 24 時間で沈静化 FSH 誘起同様の時空間表現だけでは顆粒膜細胞の幼若ラットからが、また生体内で分離されたことを示します。例えば、in situ ハイブリダイゼーション β-チューブリン mRNA 大前と初期から胞状卵胞の顆粒膜細胞における一過性発現を示した。同じ時空間表現にもかかわらず、3 つの遺伝子の制御機構は著しく異なっていた。トロポミオシン-4 （TM4) mRNA の増加に対し例として、シクロヘキシミドの β-チューブリン mRNA 発現ブロック。まだ、キネシン重鎖 (Khc) は影響しませんでした mRNA。結論としては、FSH は遺伝子発現、タンパク質の合成および細胞骨格蛋白質 ROG 細胞およびおそらく、特定の卵胞顆粒膜細胞の転位の選択的規制によって細胞骨格と形態変化の大規模な再編を誘導します。
• リケッチア チックチフス アクチンに基づく運動性に及ぼす培養表現された神経 Wiskott-Aldrich 症候群タンパク質ドメインの。 Infection and Immunity. Mar, 2003  |   Pubmed ID: 12595475 神経 Wiskott-Aldrich 症候群タンパク質 （N-WASP) とアクチン関連タンパク質 2/3 (Arp2/3) 複雑な病原体のアクチンに基づく運動性を調節する重要なホストの蛋白質として浮上しています。アクチン尾形成とリステリア菌の運動 Arp2/3 複合を必要とするが N ワスプ シグナリングをバイパスします。赤痢菌 flexneri とワクシニア ウイルスの運動には、N ワスプと複雑な Arp2/3 が必要です。アクチンに基づく運動性紅斑熱リケッチアのこれら細胞骨格制御タンパク質の機能的役割は確立されていません。本研究は, 赤痢菌に及ぼす特徴がある緑の蛍光蛋白質機能ドメインの N ワスプが付いた、ワクシニア ウイルス アクチンに基づく運動性リケッチア運動への影響を評価するために r. チックチフス感染 HeLa 細胞における表現培養。S. flexneri 感染細胞をコントロールとして使用されました。表明のワスプ N ドメインは、R. チックチフスまたは彼らのアクチンの尾にはローカライズでした。N ワスプ N ワスプのドミナント ネガティブ形態として機能し、VCA ドメイン ("verprolin 相同性, コフィリン ホモロジーと酸性ドメインに対する"）、行方不明の表現は完全にだけで適度に r. チックチフスの運動性を阻害しながら S. flexneri のアクチンに基づく運動抑制。同様に、式 Arp2/3 複雑な関数に関してドミナント ネガティブとして機能、VCA ドメインの S. flexneri (発現細胞の大部分で観測されたない運動） のアクチンに基づく運動性を厳しく抑制、R. チックチフス運動だけで適度に抑制します。N ワスプの他のドメインの発現時に観測された運動の差動の影響を含めて撮影、これらの結果は、r. チックチフスのアクチンに基づく運動が N ワスプと複雑な Arp2/3 の独立したが示唆されました。
• クラミジア ・ トラコマチス P50 Dynamitin 独立過程における微小管の整理センター ホスト セル ダイニンのトラフィックを使用しています。 Journal of Cell Science. Sep, 2003  |   Pubmed ID: 12902405 クラミジア ％30 細胞内細菌細胞外生存 (小学校体、EBs) と細胞内増殖 (網状体、RBs） 適応セル型を含む二相性の発育サイクルであります。クラミジアの細胞内開発介在物と呼ばれる膜結合胞内で完全に発生します。ホストの細胞に入る後 2 時間以内に、EBs を宿主細胞の核領域に人身売買し、のままのクラミジア ‐ トラコマティス彼らはヒューズのスフィンゴミエリンを含むホスト ベシクルのサブセットを始めるゴルジ装置に近接します。ここでは、細胞周辺からクラミジア移行ペリ ゴルジ体領域にホスト細胞小胞人身売買に似ていることの証拠を提供します。クラミジアは微小管のマイナス端に向かって移動し、微小管の整理センター (開放端の形成) を集計します。哺乳類細胞では細胞質ダイニン最も重要なのマイナス端方向微小管モーターです。キネシン微小管プラス監督モーターに対する抗体のマイクロインジェクションに効果があるなかったに対しマイクロインジェクション細胞質ダイニンのサブユニットへの抗体のクラミジアの動き開放端の形成を阻害しました。驚いたことに、ホストの小胞輸送抑制されたにもかかわらず、小胞の貨物向小胞輸送、マイナス ダイニン モーターでへのリンク、ダイナクチン複合のサブユニット dynamitin 過剰発現タンパク質 p50 クラミジア移行を廃止しませんでした。Nascent クラミジア介在物ただし、貨物結合活性 p50 dynamitin サブユニットとおそらく他のサブユニットによって供給ダイナクチンのではないことが、その p150(Glued) ダイニンの活性化またはスライディングク必要がありますを示唆している p150(Glued) ダイナクチン サブユニットと colocalize、でした。クラミジア転写と翻訳この細胞内の人身売買のために必要なので、包含膜の細胞質の顔を変更するクラミジア蛋白質蛋白質のこの機能を達成のありそうな候補であります。
• Rac GTPase 非貪食細胞のクラミジア ‐ トラコマティス侵略のための要件。 Traffic (Copenhagen, Denmark). Jun, 2004  |   Pubmed ID: 15117316 クラミジア細胞内の環境へのアクセスの生存および複製するパラマウントがグラム陰性偏細胞内病原体であります。この末尾にクラミジア nonphagocytic 細胞に侵入の非常に効率的な手段を進化しています。クラミジア ・ トラコマチスの侵略によって利用宿主の細胞機構を解明するには、クラミジア小学校体の内面化における Rho gtp アーゼの家族のメンバーの役割を検討しました。小学校体細胞表面上のバインド時に、アクチンは急速に内面のサイトに募集しています。Rho GTPase ファミリーのメンバーはアクチンの局在の募集で頻繁に関与しています。クラミジア侵略 HeLa 細胞の酵素阻害 Rac、Cdc42、における Rho gtp アーゼは、クロストリジウム属毒素 B を大幅に削減。支配的な負のコンストラクト HeLa 細胞での発現はクラミジア取り込み Rac、Cdc42 または RhoA そのないが依存していた明らかにしました。しかし、Rac、Cdc42 ないクラミジア添付ファイルによってアクティブに分かった。クラミジアの吸収に支配的な否定 Rac 表現の効果は、クラミジア エントリのアクチン リクルート サイトへの阻害により明示されます。緑色蛍光タンパク融合コンストラクトの Rac、Cdc42 と Rac Rho GTPase ファミリーの唯一のメンバーであることを示した RhoA を活用した研究クラミジア エントリのサイトに募集。
• 防水シートのクラミジア エフェクター蛋白質のチロシンリン酸化種特定とアクチンの募集のため不要です。 Infection and Immunity. Jul, 2005  |   Pubmed ID: 15972471 クラミジアは、効率的にその影響を受けやすい真核宿主細胞によるエンドサイトーシスを誘発する細胞内の病原体を義務づけるです。最近、クラミジア ‐ トラコマティス タイプ III 分泌エフェクター蛋白質、防水シートと考えられたことがわかったとチロシンのエントリのサイトでリン酸化しエンドサイトーシスと一致するアクチンの募集に関連付けられています。C. トラコマチスの防水シートを所有している六つのダイレクトまで約 50 アミノ酸の各繰り返されます。チロシン残基の大多数は、このリピート領域内で発見されます。ここで我々 を培養している異なるドメイン 229 HeLa 細胞における防水シートの表現し、実証そのチロシンリン酸化はアクチンの募集は、タンパク質の C 末端ドメインによって仲介される一方、リピート領域内で主に発生します。大型のリピート領域のクラミジア muridarum、Chlamydophila における影響、Chlamydophila 肺炎防水シートの欠如がそれぞれ、防水シートのオルソログを含む他クラミジア ゲノム配列の比較明らかにしました。それぞれの種は、同様にアクチン新兵が蛍光抗体法と antiphosphotyrosine 抗体を用いた免疫ブロットにホスホチロシン c. muridarum、C. における影響および C. 肺炎のエントリのサイトでの証拠は示していません。フルレングス C. トラコマチスおよび C. における影響防水シートの異所性発現両方アクチン リクルート リン酸化チロシンのみ C. トラコマチス防水シートであることを確認しました。データは、防水シートの C 末端ドメインがアクチン募集のため不可欠であるそのチロシンリン酸化はアクチンの募集のための絶対要件でないかもしれないことを示します。さらに具体的 C. トラコマチスと関連付けられている追加、未知のシグナル伝達経路の可能性を示唆します。
• 小さな RNA クラミジア ・ トラコマチスのヒストン様タンパク質 Hc1 の翻訳を阻害します。 Molecular Microbiology. Jan, 2006  |   Pubmed ID: 16390448 クラミジア小学校体 (EBs) のクロマチン タンパク質配列相同性真核生物の H1 と安定しています。Hc1 と Hc2 と呼ばれるこれらヒストンの同族体の網状体 (RBs) の再編に代謝的に不活性 EBs で付随クラミジアのライフ サイクルの遅い段階中にのみで表されます。Hc1 と Hc2 主要な役割は、RBs EBs に戻って区別として遺伝子発現のダウンレギュレーションと同様に、核様体構造の確立で再生します。遺伝子発現パターンに及ぼす Hc1 必要とクラミジアは Hc1 活動を厳密に制御します。Hc1 の発現や活性発現調節と同様、post-transcriptionally したがって規制されます。ここに悪影響 Hc1 合成を規制するための追加チェックポイントとして機能小型規制 RNA (スルナ) を記述します。スルナと hctA、Hc1、大腸菌のエンコード遺伝子の共発現 Hc1 翻訳抑制しますが、hctA mRNA の転写または安定性に影響をされません。Hc1 精製 EBs でのみ存在していたが IhtA （hctA 翻訳の阻害剤） 精製 RBs にのみ存在していた。感染 IhtA、しかしない Hc1 中には、RBs に存在していた、Hc1 RB に発現亢進 EB 分化中 downregulated だった。したがって、IhtA クラミジアのライフ サイクル中に RBs EBs への分化を制御するグローバル規制回路の一部であることを提案する.
• クラミジア ・ トラコマチスの染色体分離の異常を伴う Centrosomal の欠損を引き起こします。 Traffic (Copenhagen, Denmark). Aug, 2006  |   Pubmed ID: 16882039 クラミジア交通センター開放端の （宿主細胞内、細胞のニッチを確立するために形成） の微小管構築する微小管に沿って。ダイナクチン複合の活性化と貨物リンク機能未知のクラミジア グリセロールによって取って代わらですが開放端の形成に人身売買ダイニン依存です。我々 開放端の形成にローカライズと、クラミジアを含めること、細胞の中心体とタイトな関連付けを維持されることを示しています。この関連付けを通した有糸分裂の持続し、過剰中心体染色体分離の欠陥や異常なスピンドル ポールで大幅な増加に 。クラミジア感染は、このように感染から回復する細胞における染色体不安定性につながることができます。
• Rac Abi 1 と WAVE2 は Arp2/3 依存型アクチン募集クラミジアの侵略の間を促進すると対話します。 Cellular Microbiology. Sep, 2007  |   Pubmed ID: 17501982 クラミジア グラム陰性偏の細胞内病原体細胞内の環境へのアクセスの開発に基礎があります。宿主細胞のクラミジア添付ファイル WAVE2 クラミジア エントリのサイトでのローカリゼーションが必要な Rac GTPase の活性化を誘導します。Co 免疫沈降実験クラミジア感染症 WAVE2 と Abi-1, しかし、IRSp53 ではなく、Rac の相互作用を促進することを示した。WAVE2 と Abi 1 の siRNA 枯渇クラミジア誘起アクチン募集 abrogated し、劣化のセルによって病原体の吸収を大幅に削減します。クラミジアの侵入は、その局在クラミジアの添付ファイルのサイトおよび減らされた効率 VCA ドメイン ニューラル Wiskott-Aldrich 症候群タンパク質の過剰細胞におけるクラミジア侵略の示すように複雑な Arp2/3 も必要です。したがって、c は、Rac をアクティブにし、WAVE2 と Abi 1 侵略のために必要なアクチン細胞骨格再構成の誘導で生じる複雑な Arp2/3 をアクティブにするとその相互作用を促進します。
• クラミジア エントリにはグアニン ヌクレオチド交換因子の防水シートのバインディングが含まれます。 PLoS Pathogens. Mar, 2008  |   Pubmed ID: 18383626 セルのクラミジア ‐ トラコマティス添付ファイル小学校体関連タンパク質 TARP （, アクチン募集タンパク質） の分泌を誘導します。防水シートは、どこそれすぐにチロシン残基で不明なホスト キナーゼによりリン酸ですプラズマ膜を横切る。Rac GTPase は、また、アクチンの WAVE2 と Arp2/3 依存型の募集でクラミジアの添付ファイルのサイトにその結果、アクティブ化されます。防水シート アクチンを募集する Rac 依存性シグナル伝達カスケードを活性化、クラミジア侵略に直接参加していることを示します。防水シート関数によってバインド 2 つ異なる Rac グアニン ヌクレオチド交換因子)、Sos1、Vav2、ホスホチロシン依存的には。チロシン リン酸化プロファイル シーケンスの内防水シート、ホスファチジルイノシトール 3-キナーゼ (PI3-K) の過渡活性化 YEPISTENIYESI を決定するどの GEF を利用して Rac を有効にする表示されます。リン酸化されるときに、最初と 2 番目のチロシンの残余、Sos1/Abi1/Eps8 と Vav2、によってをそれぞれ、脂質ホスファチジルイノシトール 3,4,5-三リン酸後者が必要な利用されます。これら siRNA による重要なシグナル伝達分子の枯渇はクラミジアの侵攻により 2 つの経路の可能な機能冗長性の程度の差の抑制の結果。総称して、これらのデータはによって推移非貪食細胞に侵入するメカニズムを実証機械を改造するアクチン細胞骨格にシグナル伝達に防水シートを巻き込みます。
• 組織ポイゾニング マウス Muc19/Smgc 遺伝子産物。 The Journal of Histochemistry and Cytochemistry : Official Journal of the Histochemistry Society. Oct, 2009  |   Pubmed ID: 19826070 最近同定された遺伝子は、Muc19/Smgc エンコード 2 多様なスプライス亜種、Smgc (顎下腺タンパク質 C) と Muc19 (ムチン 19）。Muc19 大規模なゲル形成ムチンの家族のメンバーであるし、は、マウスにおける舌下腺粘液唾液腺の分泌製品です。SMGC の齧歯動物の顎下腺と舌下腺を開発一過性発現分泌製品です。少し粘液細胞の表現型を含む他マウス唾液および唾液非組織中の Muc19/Smgc 遺伝子産物の発現の知られています。Muc19 式したがって当初 RT-PCR と免疫組織化学法によって評価しました。補完的なアプローチとしては、ノックイン マウス モデル、Muc19-EGFP マウス Muc19 強化緑色蛍光のタンパク質 (EGFP) による Muc19 式のマーカーとして続いて最初 69 残基を含む融合蛋白質を表現を開発しました。両方のアプローチからの結果は唾液のメジャーとマイナーの粘液腺として粘膜下腺 tracheolarynx と尿道球腺の優遇 Muc19 式と一貫性が。証拠はまた個々 の粘液細胞小唾液を示します、尿道球腺 Muc19 に加えて別のゲル形成粘液を生成します。さらに、組織式 SMGC のエンコード、新生児 tracheolarynx すべての唾液中組織に制限されていますフルレングスの Smgc トラン スクリプトを見つけます。
• クラミジア感染症は、有糸分裂紡錘体極欠陥原因独立してその中心体の増幅の影響から。 Traffic (Copenhagen, Denmark). Jul, 2011  |   Pubmed ID: 21477082 クラミジア グラム負の義務づける細胞内細菌, とクラミジア ‐ トラコマティス アメリカ合衆国で最もよく報告される感染症の病原体です。クラミジアの封入と呼ばれる parasitophorous の液胞内で行われます二相性のライフ サイクルを受けます。クラミジア感染症疫学以前ひと乳頭腫ウイルス （HPV） によって感染患者における子宮頸がんにリンクされています。包含関連付けます非常に密接にホスト細胞の中心体と、この関連付けはホスト モーター蛋白質ダイニン時に依存しています。我々 以前この相互作用が過剰中心体に感染した細胞を誘導すること多極分裂スピンドルへのリードと正確な染色体分配を阻害する報告しています。我々 の調査結果は、クラミジア感染その中心体の増幅の影響とは無関係の有糸分裂紡錘体の欠陥を引き起こすことを示しています。クラミジア感染中心体普及の増加し、中心体クラスタ リングを妨害するスピンドル アセンブリ チェックポイント遅延を抑制することを示します。これらのデータは、クラミジア感染が有糸分裂紡錘体の組織に及ぼすこれらの欠陥を抑制する細胞の能力を阻害することによって中心体の増幅の結果を悪化させることをお勧めします。有糸分裂紡錘体のアーキテクチャでこれらの複合効果識別されるメカニズム クラミジアの子宮頸癌の形成に補足因子としてを仮定します。