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CellTrace 远红 (CT-FR) 染色斑马鱼 T-ALL 细胞的优化和体内增殖
JoVE 杂志
癌症研究
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JoVE 杂志 癌症研究
Optimization and In Vivo Propagation of CellTrace Far Red (CT-FR) Stained Zebrafish T-ALL Cells

CellTrace 远红 (CT-FR) 染色斑马鱼 T-ALL 细胞的优化和体内增殖

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01:47 min

July 19, 2024

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July 19, 2024

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首先,在 1.5 毫升微量离心管中收集 1 次 10 次方的 6 个荧光标记的斑马鱼、T-ALL 细胞。将细胞在 2, 500 G 和 4 摄氏度下离心 5 分钟,然后重悬于 1 mL 0.9 XPBS 中。将 250 μL 细胞悬液放入微量离心管中。

然后,加入 250 微升 0.9 XPBS,使体积达到 500 微升。加入所需体积的 CT-FR 染料储备液,并在 37 摄氏度下避光孵育 20 分钟。在室温下以 2, 500 G 离心细胞 5 分钟。

加入 500 微升鱼培养基以去除多余的染料并再次离心,然后将沉淀重悬于 25 微升鱼培养基中。用台盼蓝对细胞进行染色,并在显微镜下检查它们的活力。使用优化的 CT-FR 浓度,对斑马鱼细胞进行染色,保留一些肿瘤细胞不染色。

使用 Hamilton 微量注射器,将 5 微升染色和未染色的细胞悬液注射到麻醉斑马鱼的腹膜腔内。

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