诱导型 Tet-On 基于调节系统的体内基因表达：用于小鼠模型中靶基因转录激活的四环素诱导基因表达系统

tetracycline-On 或 Tet-On 系统是一种条件性基因表达系统，可在四环素或其类似物多西环素存在下激活目标基因的表达。

从基因工程小鼠开始，该小鼠具有修饰的基因组，其中包含编码反向四环素控制的转录激活蛋白 （rtTA） 的基因，由肝细胞或肝细胞中的肝脏特异性启动子驱动。此外，小鼠包含位于上游的四环素纵子或 tetO 序列控制的目标基因，并选择性地融合到最小的启动子上。tetO 和启动子称为四环素反应元件或 TRE。

表达的 rtTA - 一种包含 tet 阻遏蛋白、tetR 和病毒蛋白 VP16 反式激活结构域的融合蛋白 - 形成二聚体，二聚体无活性且不能与 TRE 的 tetO 序列结合，从而阻止靶基因表达的激活。

制备含有多西环素和蔗糖的溶液。蔗糖添加增加了适口性。过滤后，将多西环素-蔗糖溶液作为小鼠的饮用水。施用的多西环素在肝脏中蓄积。

在肝细胞中，多西环素与 rtTA 结合，引起构象变化并增加对 tetO DNA 结合位点的亲和力。多西环素结合的 rtTA 的 tetR DNA 结合结构域与 TRE 元件的 tetO 序列结合。VP16 结构域进一步募集 RNA 聚合酶，导致下游报告基因的转录、形成 mRNA 和随后的表达。