定量斑点印迹法，用于估计组织裂解物中的靶蛋白

定量斑点印迹 （QDB） 是一种定量样品中靶蛋白浓度的有用技术。一旦样品固定在聚合物膜上，就可以通过免疫印迹检测蛋白质。

首先，取 QDB 板 — 一个多孔板，每个孔的底部都连接着硝酸纤维素膜。将样品（含有靶蛋白的组织裂解物）添加到孔内的膜中心。

让样品干燥。靶蛋白通过非共价相互作用与膜结合。

添加阻塞解决方案。溶液中的蛋白质附着在膜上的未结合位点上，防止检测试剂的非特异性结合。

接下来，添加含有与样品中靶蛋白结合的一抗的溶液。洗涤以去除未结合的抗体。

然后，添加二抗溶液。这些分子（用过氧化物酶标记）与蛋白质结合的一抗结合。洗涤以去除未结合的抗体。

最后，添加含有化学发光底物和过氧化氢的溶液。利用过氧化氢，抗体结合的过氧化物酶氧化底物并发光。使用读板器测量样品的发光强度。

使用已知浓度的目标蛋白的连续稀释生成标准发光曲线。在曲线上绘制样品的测量发光值以确定目标蛋白质浓度。