Quantitative Polymerase Chain Reaction to Enumerate Bacteriophages

Encyclopedia of Experiments
Biological Techniques

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Encyclopedia of Experiments Biological Techniques

定量聚合酶链反应以计数噬菌体

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制备 10 个未知浓度的生物淘选噬菌体样品和 7 个标准浓度样品的 qPCR 预混液，一式三份，得到 51 个样品的预混液，其中包含 255 微升 qPCR 预混液、51 微升引物和 102 微升水。

将 8 μL 制备的 PCR 混合物分装到 96 孔 qPCR 板的 51 个孔中。接下来，向每个孔中加入 2 微升经过热处理的 T7 噬菌体样品，将其分配到 qPCR 预混液表面下方。使用胶膜密封板。

用铝箔包裹板以尽量减少荧光光漂白，然后继续在 qPCR 设备上运行板。按照文本协议中的概述设置循环条件和熔融曲线设置。