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宫内细胞注射允许将感兴趣的细胞递送到受体动物的子宫腔中。首先,在右侧位置准备麻醉的免疫功能低下的裸鼠。做一个手术切口并解剖腹肌以暴露其腹腔。
找到其中一个子宫角。这些管状结构类似于两个不同的子宫,从两侧的输卵管延伸并通向单个子宫颈。
接下来,夹住角的前端和后端进行分割。现在,将卵巢癌细胞悬液缓慢注射到分段的子宫腔中,确保细胞的高效输送。
随后,将子宫角放回腹腔并缝合手术切口。让鼠标在笼子里恢复。
注射后几天内,注射部位出现肿瘤,并转移在腹膜腔内的不同组织或器官中形成继发性肿瘤。
要开始此过程,请用2%异氟醚麻醉7至8周龄的无胸腺裸鼠。然后,通过捏住脚垫来验证它是否已完全麻醉。接下来,将动物右侧放在无菌纱布垫上,头部远离实验者。在双眼上涂抹药膏,以防止麻醉时干燥。
然后,快速将动物的头部插入连接到异氟醚蒸发器的鼻锥系统中。使用酒精垫对腹部右侧进行消毒,然后用碘消毒。然后,将无菌手术单放在上面。使用无菌手术剪刀和镊子,在小鼠的左下象限上做一个1至2厘米的皮肤切口。
之后,抬起肌肉并做一个切口以到达腹膜。随后,解剖斜肌以暴露腹腔。然后,找到左子宫角。使用无菌止血剂夹住角的前侧和后侧。
将前夹放在输卵管正下方,将后夹放在子宫颈正上方。此时,让第二个实验者通过将含有针头的细胞垂直于角以 45 度角放置来注射细胞悬液。然后,将50微升细胞悬液缓慢注射到子宫角腔内。接下来,松开前夹,然后松开后
夹。之后,将子宫角放回腹腔内。使用合成可吸收缝合线闭合腹膜。然后,使用纸巾粘合剂闭合皮肤。
完成后,将鼠标从鼻锥中取出,然后将其放回笼子中。在无人看管之前,请确保动物清醒且活跃。手术后的前 48 小时内在饮用水中提供布洛芬。
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