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癌症研究
0 次观看 • 4:20 分钟 • April 30th, 2023
子宫内细胞注射可将目标细胞递送至受体动物的子宫腔内。首先,将一只免疫缺陷裸鼠麻醉后置于右侧卧位。进行手术切口并分离腹肌,以暴露其腹腔。
找到其中一个子宫角。这些管状结构类似于两个独立的子宫,从两侧的输卵管延伸而来,并汇入一个共同的宫颈。
接下来,夹住角的前部和后部以进行分段。然后,将卵巢癌细胞悬液缓慢注入分段后的子宫腔内,确保细胞高效递送。
随后,将子宫角放回腹腔,并缝合手术切口。将小鼠置于笼中,使其恢复。
注射后数天内,注射部位即形成肿瘤,并转移至腹腔内不同组织或器官,继而形成继发性肿瘤。
开始此操作时,使用 2% 异氟烷麻醉一只 7 至 8 周龄的裸鼠。然后通过轻捏其足垫确认小鼠已完全麻醉。接着,将动物置于无菌纱布垫上,右侧卧位,头部远离实验操作者。在两只眼睛上涂抹眼膏,以防止麻醉期间眼睛干燥。
随后,迅速将动物的头部插入连接至异氟烷蒸发器的鼻罩系统中。使用酒精棉片对腹部右侧进行消毒,随后使用碘伏。然后,将无菌手术巾覆盖于其上。使用无菌手术剪和镊子,在小鼠左下腹象限处做一个1至2厘米的皮肤切口。
随后,提起肌肉并做切口以到达腹膜。接着,解剖斜肌以暴露腹腔。然后,找到左侧子宫角。使用无菌止血钳,夹住子宫角的前侧和后侧。
将前部钳夹置于输卵管正下方,后部钳夹置于宫颈正上方。此时,由第二位实验人员将含有细胞的针头以与角部垂直的45度角插入,缓慢向子宫角腔内注射50 µL细胞悬液。随后,先松开前部钳夹,再松开后部钳夹。
之后,将子宫角放回腹腔内。使用合成可吸收缝线缝合腹膜。然后,使用组织粘合剂闭合皮肤。
操作结束后,将小鼠从鼻罩中取出并放回笼中。离开前需确保动物已清醒并恢复活动能力。术后前48小时应在饮水中提供布洛芬。
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