小鼠模型中的肿瘤移植与肿瘤疫苗注射

取一只已麻醉并去毛的小鼠。注射小鼠皮肤癌细胞。

由于具有相同的遗传背景，宿主免疫系统不会排斥癌细胞，从而允许其生长形成肿瘤。

定期测量肿瘤的尺寸。

取一种含有经修饰可分泌细胞因子的非分裂性皮肤癌细胞的肿瘤疫苗，该细胞因子可激活免疫细胞以对抗肿瘤。

当肿瘤生长至所需大小后，在肿瘤附近注射疫苗。

分泌的细胞因子与肿瘤区域内的特定免疫细胞结合，触发免疫信号级联反应。

该过程会募集更多的免疫细胞至肿瘤部位。

它们共同作用，靶向并摧毁癌细胞，从而抑制肿瘤生长。

使用30号针头，在50 µL冷PBS中皮内植入500,000个B16-F10肿瘤细胞，注射部位为左侧 flank。为成功建立肿瘤模型，植入的B16-F10肿瘤细胞数量可能需要在50,000至500,000个细胞范围内进行调整。

实施后，使用电子数显卡尺每周测量三次肿瘤的长度和宽度。计算肿瘤体积，并在肿瘤大小达到 2 毫米时，按照文稿中所述方法对小鼠进行肿瘤疫苗治疗。

使用设定为160千伏和25毫安的X射线辐照仪，以150戈瑞剂量的γ射线照射细胞。注射前通过台盼蓝染色计数并检测细胞活力。在初次细胞接种后的第3、6和9天，于原肿瘤移植部位同侧腹股沟区域，距离原发肿瘤位置约1厘米处，皮内注射一百万个经辐照的B16-Flt3L细胞，溶于50微升冷PBS中。

使用彩色笔标记疫苗注射部位，以区别于原发肿瘤。如果最初植入了50,000个B16-F10细胞，建议在第8、11和14天进行疫苗治疗。