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DOI: 10.3791/51820-v
Richelle Mychasiuk1, Allyson Farran1, Mariana Angoa-Perez2, Denise Briggs2, Donald Kuhn2, Michael J. Esser1
1Alberta Children's Hospital Research Institute,University of Calgary, 2Department of Psychiatry and Behavioral Neurosciences,Wayne State University School of Medicine & John D. Dingell VA Medical Center
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
改良的减重技术是一种简单、经济高效的程序,用于诱导幼年大鼠的轻度创伤性脑损伤。这种新技术产生临床相关的症状,将推进轻度创伤性脑损伤 (mTBI) 和脑震荡的研究。
该程序的总体目标是在幼年大鼠中产生轻度创伤性脑损伤。这是通过首先准备损伤诱导平台来实现的。接下来,将麻醉的大鼠面朝下放在评分的锡纸上。
一旦就位,重物就会落下,对头部产生掠过的打击。然后将动物置于仰卧位,并记录它写入自身所需的时间。第二天的性能是通过步进梁测试来测量的。
因此,与其他技术相比,这种技术的主要优点是它只是对动物进行短暂的麻醉。这是一种闭合性头部损伤,这使我们能够在同一只动物身上多次重复受伤,并且损伤的旋转成分更具临床相关性。这项技术的影响延伸到儿科脑震荡和轻度创伤性脑损伤的治疗,因为该模型以异质性的方式诱导临床相关症状,证明该程序将是我们实验室的技术人员 Irene 马 和 harlene 哈哈。
在本实验室的本科生。要设置轻度创伤性脑损伤装置,请构建一个由透明塑料制成的 U 形舞台。在舞台底部放置一块海绵,以便在动物坠落后将其收集起来。
接下来,用锋利的剃须刀片在一块锡纸上划痕。确保划痕的锡箔支撑大鼠的体重,但不会干扰撞击后的加速。将刻痕锡箔贴在载物台顶部,使其为 tau,并将其放置在导管下方的正确位置。
放置导管,使其高于锡箔 3.5 厘米。接下来,将钓鱼线连接到重物的顶部。将重物放入导管内并固定线,使重物悬挂在箔片上方 2.5 厘米处。
这个高度可以防止老鼠安全地受到多次打击。将钓鱼线连接到夹子支架上。用钓鱼线通过塑料导管将重物向上拉,并用位于 0.5 米高的内六角扳手销将其固定到位。
首先,确认麻醉大鼠的镇静深度,并迅速将大鼠胸部放在箔纸上,其头部直接位于下降重量的路径上。准备开始时,拉动内六角扳手销,让重物垂直穿过塑料导管。一旦被击中,老鼠将迅速旋转 180 度并以仰卧姿势着陆。
立即从收集海绵中取出大鼠,并用棉签涂抹器将局部利多卡因涂抹在大鼠的头部。接下来,将大鼠仰卧位放在干净、加热的笼子里。观察动物,直到它从麻醉剂中醒来并从仰卧位翻转到俯卧位。
将此记录为 sham injured 对照组的写入时间值。麻醉动物并将其放在舞台上,如前所述。接下来,在不拉动内六角扳手销的情况下从锡纸中取出大鼠,并在头部涂抹局部利多卡因。
将大鼠仰卧位放在干净、加热的笼子里,记录写入时间值。最后,在老鼠恢复正常行为后,将老鼠放回笼子里,然后对下一只对照动物重复。诱导脑损伤后 24 小时,将动物送回手术室。
将大鼠转移到干净的笼子中,并放置大鼠的家笼。在锥形梁面较窄的一端,框架朝向梁宽端的开口部分。锥形梁有一个中心平台,带有提供安全性的小壁架。
将摄像机放在光束的宽端并调整焦距,直到可以看到整个长度。准备好后,将大鼠放在锥形横梁的宽端,并鼓励它穿过横梁走向它的家笼。一旦老鼠越过横梁进入家笼,让它休息至少 60 秒。
为了加强目标位置,这是第一个试验,不包括在分析中。接下来,打开摄像机,让大鼠额外完成横梁行走任务,保持家笼中的第 62 个加固期。一旦老鼠完成所有试验,将其放回家笼并测试下一只动物。
如果动物在测试过程中从横梁上掉下来,请立即将其捡起并将其放回横梁上掉落的位置。对数据进行评分。测试后,记录每次单独试验的后腿脚滑次数和穿过横梁的总时间。
使用此数据计算每个动物和测试组的平均值。该图比较了经历单次脑损伤的幼年大鼠与假对照之间书写时间分数的平均差异。受伤的大鼠从仰卧位写入自己所需的时间显着增加。
在这里,显示了经历过一次受伤的幼鼠在横梁行走任务中后腿脚滑的平均次数。与假受伤大鼠相比,与遵循此程序的对照组相比,受伤的动物在横梁上表现出明显的更多脚滑。然后可以探索其他非侵入性干预措施,例如游戏疗法,以确定此类干预措施是否真的能够改善孩子们所经历的一些社交缺陷。震荡。
看完这个视频后,你应该对如何安全地诱发和检测幼年啮齿动物的轻度创伤性脑损伤有一个很好的了解。这可以在多个时间点重复。
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