Name: 经鼓膜药物治疗耳毒性的临床研究 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-03-16T12:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 52 s
Description: 了解经鼓膜给药技术用于耳蜗局部药物递送，预防顺铂诱导的听力损伤。该方法可在不影响化疗抗肿瘤效果的情况下，通过听觉脑干反应评估实现耳毒性保护研究。

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本文所述工作由美国国家癌症研究所（NCI）RO1 CA166907、美国国家耳聋与其他沟通障碍研究所（NIDCD）RO1-DC 002396 和 RO3 DC011621 项目资助。

雄性Wistar大鼠的处理遵循美国国立卫生研究院动物使用指南，并根据南伊利诺伊大学医学院实验动物护理和使用委员会批准的方案进行。在给药前和经鼓室给药后72小时，在麻醉状态下对大鼠进行听觉脑干反应（ABR）测试，以验证经鼓室药物递送的效果。
1. 听觉脑干反应（ABR）
注意：&#160;使用听觉检测设备和软件采集听性脑干反应（ABR）数据。ABR 代表由第八对脑神经（波 I 和 II）以及其他更高级的听觉脑干结构（包括耳蜗腹前核（波 III）、外侧丘系（波 IV）和下丘（波 V））产生的诱发电位或高频波。这些波形根据其潜伏期的不同而加以区分。ABR 测量方法如前所述12。
<ol>
	<li>通过腹腔注射给予大鼠90 mg/kg的氯胺酮和17 mg/kg的赛拉嗪混合物进行麻醉&#160;via&#160;。通过夹趾反射确认麻醉深度&#160;via&#160;。在双眼上涂抹眼科润滑剂（或矿物油滴）以防止眼睛在麻醉期间干燥并避免发生角膜溃疡。</li>
	<li>将大鼠俯卧位放置于声学屏蔽室内加热垫（37 °C）上。听力测试设备位于屏蔽室外侧并紧邻其旁。</li>
	<li>相应插入不锈钢电极：接地电极置于后侧腹部，正极置于颅骨顶部两耳之间，负极分别置于每侧耳廓下方。</li>
	<li>使用高频换能器施加声学刺激，以8、16和32 kHz的5 ms纯音短声脉冲进行。将刺激强度确定为声压级分贝值（dB SPL），起始强度为10 dB SPL，以10 dB为步长递增至90 dB SPL。使用脉冲精密声级计将声音强度校准至最大输出90 dB SPL。 
	注意：&#160;该测试结果可反映外周听觉器官——耳蜗以及上述听觉结构的完整性。波形在刺激输入后15 ms内产生，波形潜伏期取决于传导时间，而传导时间又受三个关键因素调控：脑容量、声音强度和声音频率。听觉诱发电位采用设备制造商提供的软件进行记录。</li>
	<li>将能够明显诱发两种不同波形（II和III）且波幅达0.5 µV的最低刺激强度视为听觉阈值。 
	注意：&#160;阈值偏移表示治疗后测得的阈值与治疗前阈值之间的差值。</li>
</ol>
2. 穿 tympanic 膜注射
<ol>
	<li>为经鼓室给予药物，将大鼠置于左侧卧位。
	<ol>
		<li>将2.5 mm一次性耳镜套插入耳道。</li>
		<li>使用手术镜，调整窥耳器位置，使鼓膜可见。</li>
		<li>使用29 G × ½、0.5 mL胰岛素注射器，吸取50 µL的[R]-N-苯基异丙基腺苷（R-PIA) 溶液（1 µM）、8-环戊基-1,3-二丙基黄嘌呤（DPCPX）溶液（3 µM）或 siRNA 溶液（0.9 µg），用于注射（5 单位）。</li>
		<li>使用窥耳器将针头引导至鼓膜的前下区域。</li>
		<li>用针在膜上刺一个孔，注入1.2.3中提到的药物。让大鼠保持该体位静置15分钟。 
		注意： 50 µL 应为适合注入鼓膜后的适量体积。给药后，外耳道内不应残留液体。</li>
		<li>将大鼠置于右侧卧位，重复步骤1.2.1至1.2.5，对另一侧耳部进行给药。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>对于接受腹腔注射顺铂的大鼠，将其置于37 °C加热垫上，呈仰卧位。
	<ol>
		<li>使用21 G × 3/4 蝴蝶针（12&#34; 长度管路），吸取顺铂（11 mg/kg，1 mg/mL 的无菌磷酸盐缓冲液 [PBS] 溶液）。</li>
		<li>使用注射泵给予顺铂（1 mg/mL） 通过 30分钟内腹腔注射 
		注意： 对于一只250克的大鼠，注射体积为2.75 mL，速率约为每分钟0.1 mL。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>在整个操作过程中持续监测麻醉深度。顺铂给药完成后，将大鼠以俯卧位放回笼中，确保其呼吸无任何阻碍物。</li>
	<li>监测大鼠直至完全恢复。</li>
</ol>
3. 耳蜗解剖与脱钙
<ol>
	<li>在最后一次ABR检测（72小时后），使用90 mg/kg氯胺酮和17 mg/kg赛拉嗪混合物对大鼠进行麻醉 通过 腹腔注射。通过脚趾夹捏反射确认麻醉效果。处死大鼠 通过 断头</li>
	<li>按照先前所述方法解剖出颞骨13.</li>
	<li>将耳蜗置于盛有4%多聚甲醛PBS溶液（1x PBS）的7 mL玻璃闪烁瓶中（完全浸没耳蜗），4 °C冰箱中冷藏过夜。去除多聚甲醛溶液，于室温下用1x PBS洗涤。</li>
	<li>移除 PBS，将试管完全充满 120 mM EDTA 溶液（pH 7.3）。室温下置于旋转仪上，脱钙 2 至 3 周，每天更换 EDTA 溶液。</li>
</ol>
4. 冷冻切片
<ol>
	<li>脱钙完成后，将耳蜗完全浸入以下溶液（每种溶液7 mL）中，在4 °C下分别处理24小时：10%蔗糖、20%蔗糖、1:1的20%蔗糖与最佳切割温度（OCT）包埋剂混合液。</li>
	<li>将新鲜的OCT包埋剂注入15 mm × 15 mm × 5 mm的一次性包埋模具中，完全覆盖耳蜗。按照Whitlon et al.14所述方法，将耳蜗侧向放置，使其与包埋模具底部平行。</li>
	<li>立即将模具置于干冰上，使OCT凝固，并在-80 °C下过夜保存。</li>
	<li>将载玻片浸入0.01%多聚-L-赖氨酸溶液中，室温孵育30分钟。取出载玻片，无需冲洗，室温下过夜干燥。将这些载玻片用于冷冻切片。</li>
	<li>从-80 °C冰箱中取出含OCT的耳蜗样本，并置于干冰上。使用锋利的切片刀（长×宽：80 mm × 8 mm，厚度0.25 mm，切割角度34 °），在-30 °C的恒温冷冻切片机中以10 µm厚度对OCT包埋块进行切片。每张载玻片放置两个切片。</li>
	<li>切片完成后，将载玻片置于4 °C冰箱中冷藏保存。</li>
</ol>
5. 免疫组织化学
<ol>
	<li>将载玻片放入置于载玻片架上的玻璃显微镜载玻片染色缸中，加入 350 mL 1× PBS，于室温下洗涤 5 分钟，重复三次。</li>
	<li>从染色缸中取出载玻片，用干燥擦拭纸擦干组织周围的区域，注意不要擦到组织本身。
	<ol>
		<li>使用液体阻断笔在组织切片周围画一个圆圈。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>加入 150 µL 封闭液（含 10% 正常（驴）血清、1% 非离子型去污剂和 1% BSA 的 1× PBS 溶液），于室温下封闭组织 1 小时。</li>
	<li>轻轻吸去多余的封闭液，然后在湿润盒中于 4 °C 过夜孵育，每张载玻片加入 150 µL 含 10% 正常（驴）血清、0.1% 非离子型去污剂及一抗（见下文注释）的 1× PBS 溶液。 
	注： 对于以下抗体，使用了如下稀释比例：用于 图 2 和 3 的 p-STAT1 Ser727 为 1:300；用于 图 4 的 p-STAT1 Ser727 为 1:100，TRPV1 为 1:100。</li>
	<li>将载玻片放回置于载玻片架上的玻璃显微镜载玻片染色缸中，加入 350 mL 1× PBS，于室温下洗涤 5 分钟，重复三次。</li>
	<li>在避光湿润盒中，用含 0.01% 非离子型去污剂和 10% 正常（驴）血清的 1× PBS 溶液稀释二抗，于室温下孵育 2 至 3 小时。 
	注： 对于以下二抗，使用了如下稀释比例：用于 图 2 和 3 的驴抗兔 IgG 为 1:600；用于 图 4 的罗丹明（TRITC）标记驴抗兔 IgG 为 1:500，驴抗山羊 IgG 为 1:500。</li>
	<li>将载玻片放入置于载玻片架上的玻璃显微镜载玻片染色缸中，加入 350 mL 1× PBS，于室温下洗涤 5 分钟，重复三次。</li>
	<li>轻轻吸去载玻片上多余的液体，用干燥擦拭纸擦干组织周围的水分。在组织上直接滴加一滴含 DAPI 的封片剂，缓慢盖上盖玻片，确保下方无气泡产生，并将载玻片置于避光环境中室温下过夜固化。随后将载玻片储存于 4 °C。</li>
	<li>使用共聚焦显微镜观察载玻片。成像时使用的激光如下：DAPI 使用紫外激光，488 nm 激光用于驴抗兔 IgG，543 nm 激光用于罗丹明 TRITC。</li>
</ol>

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</ol>

未声明利益冲突。

经鼓膜给药途径可将药物及其他制剂直接局部递送至耳蜗，若通过全身给药则可能产生显著的系统性副作用。这种给药方式能使药物快速到达作用部位，并达到远高于全身给药所能实现的药物浓度。本文及先前已发表的结果显示，经鼓膜给予[R]-N-苯基异丙基腺苷（R-PIA）可保护耳蜗免受顺铂诱导的外毛细胞丢失（图1）19，并抑制炎症反应，表现为STAT1转录因子活化减弱（相较于仅给予顺铂或R-PIA+DPCPX+顺铂的组别）（图2）19。这些效应可能有助于该药物对听力损失的保护作用。根据以往经验，我们提出仅需一次给药即可。这可能表明药物可在中耳滞留，并缓慢进入耳蜗，在评估动物耳毒性持续的三天内提供持续保护。目前，该技术正被用于向内耳递送其他药物，以评估其作为耳保护剂的有效性。
除了药物外，经鼓室给予siRNA也可有效敲低特定RNA，从而降...

外周听觉系统对顺铂和氨基糖苷类抗生素等药物极为敏感。顺铂是一种广泛用于治疗多种实体瘤（如卵巢癌、睾丸癌以及头颈部癌症）的化疗药物。使用该药物所引起的耳毒性具有剂量限制性，且发生率很高，影响约75%至100%的接受治疗患者1。其他药物如卡铂和奥沙利铂已作为顺铂的替代药物出现2,3,4,5，但其应用仅限于少数几种癌症。
早期研究表明，活性氧（ROS）在介导顺铂和氨基糖苷类抗生素引起的耳毒性中起关键作用。后续研究发现，NADPH 氧化酶的 NOX3 同工型是耳蜗中 ROS 的主要来源，并可被顺铂激活6,7。ROS 的生成会削弱细胞的抗氧化缓冲能力，导致细胞膜脂质过氧化增加8。此外，顺铂还可增加羟基自由基的产生，进而生成高毒性的醛类物质 4-羟基壬烯醛（4-HNE），后者是细胞死亡的启动因子9,10。基于这些发现，已有多种抗氧化剂被用于治疗顺铂耳毒性的研究，包括 N-乙酰半胱氨酸（NAC）、硫代硫酸钠（STS）、氨磷汀和 D-蛋氨酸。然而，抗氧化治疗的一个主要担忧是，当这些抗氧化剂全身给药时，可能通过与抗氧化分子中的巯基相互作用，降低顺铂的化疗疗效11。
鉴于抗氧化治疗存在上述问题，本研究旨在探讨通过鼓膜穿刺途径将抗氧化剂及其他药物递送至耳蜗，以减轻听力损失。下文所述的药物及短干扰（si）RNA的鼓膜穿刺递送途径，显示出尤为良好的应用前景。

<table><tbody><tr><td>氯胺酮麻醉剂（100 mg/ml）10 ml</td><td>Henry Schein</td><td>56344</td><td>管制物质&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>阿法沙龙注射液/赛拉嗪（20 mg/ml）20 ml</td><td>Henry Schein</td><td>33197</td><td></td></tr><tr><td>2.5 mm 一次性耳镜片</td><td>Welch Allyn</td><td>52432</td><td></td></tr><tr><td>手术显微镜</td><td>Zeiss</td><td></td><td></td></tr><tr><td>29 G × 1/2 胰岛素注射器</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-841-32&amp;nbsp;</td><td>可通过其他供应商购买</td></tr><tr><td>顺式-二氨合铂(II)二氯化物</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P4394</td><td>有毒 - 需佩戴适当的个人防护装备</td></tr><tr><td>哈佛 50-7103 恒温毯控制单元</td><td>Harvard Apparatus</td><td>Series 863</td><td></td></tr><tr><td>Excel International 21 G × 3/4 蝶形针头</td><td>Fisher</td><td>14-840-34&amp;nbsp;</td><td>可通过其他供应商购买</td></tr><tr><td>BSP 单速注射泵</td><td>Brain Tree Sci, Inc</td><td>BSP-99</td><td></td></tr><tr><td>Pulse 声学测量系统</td><td>Bruel &amp; Kjaer</td><td>Pulse 13 软件</td><td></td></tr><tr><td>高频模块</td><td>Bruel &amp; Kjaer</td><td>3560C</td><td></td></tr><tr><td>1/8&amp;Prime; 压力场麦克风 &amp;mdash; 型号 4138</td><td>Bruel &amp; Kjaer</td><td>bp2030</td><td></td></tr><tr><td>高频换能器</td><td>Intelligent Hearing System</td><td>M014600</td><td></td></tr><tr><td>Opti-Amp 功率发射器</td><td>Intelligent Hearing System</td><td>M013010P</td><td></td></tr><tr><td>SmartEP ABR 系统</td><td>Intelligent Hearing System</td><td>M011110</td><td></td></tr><tr><td>一次性皮下 EEG 电极</td><td>CareFusion</td><td>019-409700</td><td></td></tr><tr><td>16% 甲醛（无甲醇）</td><td>Fisher Scientific</td><td>28908</td><td>有毒 - 需佩戴适当的个人防护装备&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>7 mL 硼硅酸盐玻璃闪烁瓶</td><td>Fisher Scientific</td><td>03-337-26</td><td>可通过其他供应商购买</td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP118-500</td><td>可通过其他供应商购买</td></tr><tr><td>蔗糖</td><td>Fisher Scientific</td><td>S5-500</td><td>可通过其他供应商购买</td></tr><tr><td>Tissue Plus OCT 包埋剂</td><td>Fisher Scientific</td><td>4585</td><td></td></tr><tr><td>冷冻模具（15 mm × 15 mm × 5 mm）</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-363-553</td><td>可通过其他供应商购买</td></tr><tr><td>显微镜载玻片（25 mm × 75 mm）</td><td>MidSci</td><td>1354W</td><td>可通过其他供应商购买</td></tr><tr><td>盖玻片（22 × 22 × 1）</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-542-B</td><td>可通过其他供应商购买</td></tr><tr><td>聚-L-赖氨酸溶液（0.01%）</td><td>EMD Millipore</td><td>A-005-C</td><td>可通过其他供应商购买</td></tr><tr><td>HM525 NX 冷冻切片机</td><td>Thermo Fischer Scientific</td><td>956640</td><td></td></tr><tr><td>MX35 Premier 一次性低剖面切片刀片</td><td>Thermo Fischer Scientific</td><td>3052835</td><td></td></tr><tr><td>Wheaton&amp;trade;&amp;nbsp;玻璃 20 片染色皿（带可拆卸支架）</td><td>Fisher Scientific</td><td>08-812</td><td></td></tr><tr><td>Super Pap Pen 液体阻断笔</td><td>Ted Pella, Inc.</td><td>22309</td><td></td></tr><tr><td>正常驴血清</td><td>Jackson Immuno Research</td><td>017-000-121</td><td>可通过其他供应商购买</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Acros</td><td>21568</td><td>可通过其他供应商购买</td></tr><tr><td>BSA</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A7906</td><td>可通过其他供应商购买</td></tr><tr><td>磷酸化 Stat1（Ser727）抗体</td><td>Cell Signaling</td><td>9177</td><td></td></tr><tr><td>VR1 抗体（C-15）</td><td>Santa Cruz</td><td>sc-12503</td><td></td></tr><tr><td>DyLight 488 驴抗兔抗体</td><td>Jackson Immuno Research</td><td>711-485-152</td><td>已停产</td></tr><tr><td>DyLight 488 驴抗山羊抗体</td><td>Jackson Immuno Research</td><td>705-485-003</td><td>已停产</td></tr><tr><td>罗丹明（TRITC）驴抗兔抗体</td><td>Jackson Immuno Research</td><td>711-025-152</td><td>已停产</td></tr><tr><td>ProLong&amp;reg; Diamond 抗荧光淬灭封片剂（含 DAPI）</td><td>Thermo Fisher</td><td>P36971</td><td></td></tr><tr><td>(&amp;minus;)-N6-(2-苯基异丙基)腺苷</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P4532</td><td></td></tr><tr><td>8-环戊基-1,3-二丙基黄嘌呤</td><td>Sigma Aldrich</td><td>C101</td><td></td></tr><tr><td>pSTAT1 siRNA</td><td>Qiagen</td><td>定制产品</td><td>Kaur 等，2011&lt;sup&gt;20&lt;/sup&gt;</td></tr><tr><td>NOX3 siRNA</td><td>Qiagen</td><td>定制产品</td><td>Kaur 等，2011&lt;sup&gt;20&lt;/sup&gt;</td></tr><tr><td>随机阴性对照 siRNA</td><td>Qiagen</td><td>1022076</td><td>Kaur 等，2011&lt;sup&gt;20&lt;/sup&gt;</td></tr></tbody></table>

经鼓室药物递送治疗耳毒性

Trans-Tympanic Drug Delivery for the Treatment of Ototoxicity

全身性给予保护剂治疗药物诱导的耳毒性受到限制，因为这些保护剂可能干扰主要药物的化疗效果。这一点对于顺铂尤为明显，其抗癌作用会被能够有效防止听力损失的抗氧化剂所削弱。其他当前或潜在的耳保护剂如果通过全身给药，也可能产生类似问题。将各种生物制剂或保护剂直接递送至耳蜗，可在局部达到较高浓度，同时减少全身性副作用。本报告中，我们展示了一种经鼓膜将多种药物或生物试剂递送至耳蜗的方法，该方法有助于耳蜗基础科学研究，并为临床中定向使用耳保护剂提供一种简便途径。本报告详细描述了经鼓膜给药的技术，并举例说明该技术在实验动物中成功用于治疗顺铂耳毒性的应用。

顺铂给药后三天测量大鼠的ABR反应，显示其阈值显著升高。经鼓室注射trans-tympanic [R]-N-苯基异丙基腺苷（R-PIA)，腺苷A1 受体激动剂15，顺铂给药前。该作用的特异性 R-PIA 在腺苷 A 受体1 受体的存在通过以下观察得到证实：该受体可被8-环戊基-1,3-二丙基黄嘌呤（DPCPX）所拮抗，后者是一种A1 受体特异性拮抗剂16该药物增强了顺铂引起的ABR阈值偏移（图1A）。与导致听力损失的作用类似，顺铂也增加了对外毛细胞的损失/损伤（通过扫描电子显微镜 [SEM] 评估）图1B）。扫描电镜图像的获取方法如前所述1...

我们介绍一种通过经鼓膜途径将药物局部递送至耳蜗的技术。通过该途径给药不会干扰顺铂等化疗药物的抗癌疗效。

保护剂通过全身给药治疗药物性耳毒性的作用受到限制，原因在于这些保护剂可能……

本经鼓室给药技术的总体目标是将高浓度的抗氧化剂、耳保护剂或生物制剂直接局部递送至耳蜗，以治疗听力损失。经鼓室给药途径可实现药物及其他试剂在耳蜗内的局部递送，避免这些物质经全身给药时可能引发的显著副作用。该方法的主要优势在于，能够将药物以远高于全身给药所能达到的剂量快速递送至耳蜗。 该技术有望在不影响顺铂抗肿瘤效果的前提下，预防顺铂引起的听力损失。在确认大鼠对足趾夹捏无反应后，将眼膏涂抹于大鼠眼部。为评估听觉脑干反应，将大鼠俯卧于声学屏蔽室内设定为37°C的加热垫上，将不锈钢接地电极插入后侧腹部，将不锈钢正极电极插入两耳之间的颅顶部位，每侧耳廓下方各插入一根不锈钢负极电极。将高频换能器探头小心插入大鼠耳道。随后使用高频换能器以8、16和32千赫兹的频率施加持续5毫秒的声刺激脉冲。将动物置于左侧卧位。将一个2.5毫米的一次性耳镜插入耳道，并使用手术显微镜调整耳镜位置，使鼓膜可见。必须正确调整针头方向，确保鼓膜仍可被观察到，因为耳镜非常小，而成功注射需要在显微镜下清晰看到所有材料和组织。使用29½号0.5毫升胰岛素注射器，吸取50 µL目标药物或试剂至注射器筒内。使用窥耳器将针头引导至鼓膜的前下部。用针头在鼓膜上刺一个小孔，并将全部50 µL药物注入。让大鼠保持此体位休息15分钟。然后，将大鼠置于右侧卧位，并按上述方法将药物注入右耳。对于接受顺铂处理的大鼠，将其置于37°C加热垫上的仰卧位，用21又四分之三号蝶形针头（连接一段12英寸长的导管）抽取顺铂溶液。随后，使用注射泵在30分钟内通过腹腔注射方式给予1毫克/毫升的顺铂。当所有顺铂给药完成后，将大鼠放回笼中，保持俯卧位，注意确保其呼吸通畅，并持续观察动物直至完全恢复。在完成治疗后听性脑干反应（ABR）的测量后，处死大鼠并取出颞骨。将获取的耳蜗置于含有4%多聚甲醛PBS溶液的7毫升玻璃闪烁瓶中，于4°C下保存过夜。第二天早晨，用室温 PBS 清洗耳蜗。随后将其完全浸入 120 毫摩尔 EDTA 中。然后将容器置于旋转仪上，在室温下脱钙 2 至 3 周。脱钙完成后，将耳蜗置于7毫升蔗糖溶液中，依次浸入，每种蔗糖溶液在4摄氏度下孵育24小时。最后一次浸入后，向一个15×15×5毫米的一次性包埋模具中加入新鲜的最优切割温度化合物（OCT），并将耳蜗侧放于模具中，使样品与模具底部平行。立即将模具置于干冰上，使OCT固化，并将模具在-80摄氏度下保存过夜。第二天早晨，将模具转移至干冰上，并将冷冻切片机设定为负30摄氏度。然后使用锋利的切片刀，每张经多聚赖氨酸包被的载玻片获取两个十微米厚的耳蜗组织切片。将载玻片置于4摄氏度环境中。为了通过免疫组织化学分析切片，将载玻片置于玻璃染色缸中的载玻片架上，用350毫升PBS洗涤切片三次，每次洗涤5分钟。最后一次洗涤后，用实验室擦拭纸去除每个样本周围的过量PBS，并使用疏水屏障笔围绕每

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Research

科研

JoVE Journal

Medicine

医学

经鼓膜药物治疗耳毒性的临床研究

本视频展示了经半规管造瘘术（canalostomy），该方法可通过半规管将药物局部递送至小鼠内耳，同时最大程度减少对听力和前庭功能的损伤。该技术可实现将病毒载体、药物及小分子化合物接种到小鼠内耳中。...

用于成年小鼠内耳局部给药的耳蜗造口术

人工耳蜗（CIs）通过直接电刺激听觉神经来实现听力功能。然而，较差的频率和强度分辨能力限制了人工耳蜗使用者的听力质量。本文介绍了一种在小鼠中对听觉神经进行光遗传学刺激的方法，作为听觉研究及未来人工耳蜗开发的替代策略。...

光遗传学刺激听觉神经

所述的耳后手术入路可实现快速、直接地将药物递送至小鼠耳蜗的鼓阶，同时最大限度减少出血量和动物死亡率。该方法可通过圆窗膜向新生后小鼠递送分子、药物及病毒，用于耳蜗治疗。...

通过圆窗膜进行病毒介导的基因递送至小鼠内耳的手术方法

存在多种将耳毒性物质导入动物模型耳蜗的方法。本文介绍了一种通过圆窗龛递送耳毒性物质的手术方案。该方法具有良好的可靠性，可产生靶向的耳蜗内损伤，同时避免对微细结构造成机械性损伤。此外，可进一步用于研究耳蜗的自我修复与再生能力。...

小鼠圆窗给药法用于耳毒性药物递送：一种诱导耳蜗细胞退变的快速可靠技术

本文描述了两种用于向内耳局部给药的显微外科手术方法，并在听力参数、耳蜗细胞结构以及炎症标志物表达方面对二者进行了比较。...

靶向小鼠内耳给药方法的比较研究：鼓泡术 与 经鼓室注射

我们报道了一种通过圆窗膜向非人灵长类动物——普通狨猴（Callithrix...

一种在非人灵长类动物普通狨猴（Callithrix jacchus）中向内耳给药的外科手术方法

本文介绍了一种经半规管进行局部给药的耳蜗造口术（canalostomy），该方法可将药物递送至成年及新生小鼠的内耳，同时对听力和前庭功能造成的损伤最小。该技术可用于向小鼠内耳接种病毒载体、药物以及小分子化合物。...

耳道造口术作为向成年及新生小鼠内耳局部给药的一种外科手术方法

对于高频听力损失患者，使用更长电极的电声刺激（EAS）可提供更广泛的耳蜗覆盖范围及多种类型的编码图谱。结合微创手术、柔韧的侧壁电极以及类固醇给药，可实现更深度的电极插入，同时几乎不造成手术创伤，从而良好地保留残余听力。...

通过更长电极的电声刺激实现高频听力损失患者的耳蜗覆盖增强与听力保留

本文介绍了一种肿瘤热消融术。详细描述了整个操作过程，包括治疗前规划和影像学检查、麻醉、辅助技术以促进经皮入路、消融设备在影像引导下定位至肿瘤、热治疗、治疗后护理及随访。...

腹部肿瘤的热消融治疗

缺血后肢的渗透压药物递送及使用Microfil灌注血管系统以进行微型计算机断层扫描成像

了解经鼓膜给药技术用于耳蜗局部药物递送，预防顺铂诱导的听力损伤。该方法可在不影响化疗抗肿瘤效果的情况下，通过听觉脑干反应评估实现耳毒性保护研究。

经鼓室药物递送治疗耳毒性

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