Isolation of Adult Human Dermal Fibroblasts from Abdominal Skin and Generation of Induced Pluripotent Stem Cells Using a Non-Integrating Method

Immacolata Belviso; Anna Maria Sacco; Veronica Romano; Fabrizio Schonauer; Daria Nurzynska; Stefania Montagnani; Franca Di Meglio; Clotilde Castaldo

doi:10.3791/60629

JoVE Journal
Bioengineering

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Isolation of Adult Human Dermal Fibroblasts from Abdominal Skin and Generation of Induced Pluripotent Stem Cells Using a Non-Integrating Method

使用非整合方法分离成人人体皮肤纤维细胞与诱导多能干细胞的生成

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10:52 min

January 19, 2020

DOI: 10.3791/60629-v

Immacolata Belviso*¹, Anna Maria Sacco*¹, Veronica Romano¹, Fabrizio Schonauer¹, Daria Nurzynska¹, Stefania Montagnani¹, Franca Di Meglio¹, Clotilde Castaldo¹

¹Department of Public Health,University of Naples Federico II

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

细胞重新编程需要引入关键基因，这些基因调节和维持多能细胞状态。所述方案使诱导多能干细胞（iPSCs）菌落的形成来自人类皮肤成纤维细胞，无需病毒/整合方法，但使用非修饰RNA（NM-RNA）结合免疫逃逸因子减少细胞防御机制。

以下协议通过快速、高效地重新编程从皮肤冲孔活检中分离出的人类皮肤纤维细胞，提供自体人类诱导多能干细胞的说明。这些程序可以由在细胞重新编程方面经验很少或没有经验的研究人员进行，并且通过适当的调整，允许无异种诱导多能干细胞的产物。自体IPS细胞可用于再生医学应用和建模疾病，如遗传性疾病或癌症，以调查潜在的分子机制和开发更具体的疗法。

工作负载很高。在仔细规划实验之前研究协议非常有帮助，包括应准备试剂和材料的步骤。该程序的视觉演示有助于经验很少或没有经验的研究执行细胞分离和重新编程，避免与可能的微生物和RNA污染相关的常见错误。

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