模拟小鼠中风:通过颈外动脉的短暂性脑中动脉闭塞

脑中动脉阻塞（MCAo）的不同模型用于实验性中风研究。在这里，描述了通过颈外动脉（ECA）的短暂性MCAo的实验性中风模型，该模型旨在模仿人类中风，其中由于自发凝块溶解或治疗而切除脑血管血栓。

在这里描述的灯丝模型中，完全恢复血流及其记录是确保小鼠中可生产流入的要求，特别是在转化性中风研究中。与前面描述的其他冲程模型相比，该模型具有两个主要优点。无需开颅手术，即可实现血管的完全再灌注。

细丝模型是一种复杂的手术干预，涉及不同动脉的过程操作。所有这些的可视化和解释都是小而重要的步骤，可能会加速神经外科医生的学习期。连接热毯，将手术区域的温度和麻醉期间的小鼠体温保持在37摄氏度。

准备高压灭菌剪刀和镊子，70%乙醇溶液和dexpanthenol眼膏，并保留几块棉和五O涂层编织聚酯缝合线，准备使用。在没有针头的情况下，在一毫升注射器中制备0.9%的盐水溶液，以保持切口部位水分。通过切割10微升移液器吸头的尖端，为激光多普勒探头准备支架。

一旦鼠标完全麻醉，将其放置在手术区域的俯卧位置。轻轻插入直肠探头，以监测整个外科手术过程中的温度。对手术部位进行消毒后，在左耳和眼睛之间切开这个头皮，露出颅骨。

接下来，切除并停用颞肌，以可视化颅骨下方的多条脑动脉或MCA。用胶水将手持激光多普勒探头或光纤的尖端的外部固定在左侧MCA的顶部，并关闭皮肤，以便皮肤也粘合。涂上两到三滴硬化剂胶水以加快工艺。

确保激光多普勒光纤未粘合，并且可以随时从尖端支架上轻松取下。将鼠标转到仰卧位置，然后将鼻子放入麻醉锥中，并用胶带固定爪子。对胸部周围的皮肤和头发进行消毒，并在颈部做一个两厘米长的中线切口。

使用镊子将皮肤下颌下腺和胸骨瘤肌分开。使用牵开器暴露手术区域并找到左颈总动脉或CCA。在不损伤迷走神经的情况下，解剖不含结缔组织和周围神经的CCA，并在分叉前进行短暂的结扎。

解剖颈外动脉或ECA，并在最远端可见部分打一个永久性的结。在ECA下方放置另一条缝合线并靠近分叉处，然后准备一个松散的结以供以后使用。解剖颈内动脉或ICA，并在分叉处放置一个约5毫米的微血管夹。

确保不要损伤迷走神经。然后在紧固和松散的结扎之间在ECA上切一个小孔，确保不会切断整个ECA。引入灯丝并将其推进到CCA。

拧紧腔周围ECA中松动的结扎，以暂时将灯丝固定在该位置。取下微血管夹并防止出血。取下微血管夹后，通过ICA插入细丝，直到到达MCA的起源。

通过进一步拧紧ECA周围的结，将灯丝固定在此位置。记录灯丝插入前后的激光多普勒值。在缝合伤口之前，移除牵开器并将胸骨瘤肌重新定位在下颌下腺中。

取下激光多普勒探头，将动物置于37摄氏度的恢复室中一小时。将鼠标放在手术区域的俯卧位置，鼻子放在麻醉面罩中，然后用胶带固定动物的爪子。将激光多普勒探头插入探头支架。

取下伤口缝合线，使用镊子将皮肤、下颌下腺和胸骨瘤肌分开。使用牵开器暴露手术区域。松开拧紧灯丝的ECA缝合线，然后轻轻拉动灯丝。

在去除过程中避免损坏长丝的硅橡胶涂层。记录去除灯丝之前和之后的激光多普勒值。紧紧绑住ECA缝合线，并确认激光多普勒装置中脑血流量的增加。

在与CCA分叉之前打开瞬时结扎，以恢复完整的血流。在缝合伤口之前，移除牵开器并将胸骨瘤肌重新定位在下颌下腺中。然后，将动物置于37摄氏度的恢复室中一小时，以从麻醉中恢复。

恢复后，将小鼠放回温度受控室的笼子中，并通过在笼子地板上的小培养皿中加入湿食物颗粒和水凝胶来照顾动物，并每12小时注射一次镇痛药，直到手术后的第三天。一旦去除细丝后CCA中的血流恢复，就会发生大脑的完全再灌注，这与人类患者成功机械血栓切除术后观察到的情况相似。与假动物相比，中风动物的复合和局灶性神经评分有显着变化，但一般神经评分没有显着变化。

在卒中诱导后24小时，还使用甲酚紫染色对冠状连续脑切片进行取出的梗死体积。病变区域包括躯体感觉和运动皮层，以及皮质下结构，如纹状体。梗死体积平均值为61至62毫米见方，占受影响脑半球的48%。

重要的是要对CCA，ECA和RCA进行充分的解剖，而不会对邻近组织（尤其是迷走神经）造成损害，以便对所有结构进行良好的可视化，并能够插入细丝并阻塞MCA起源。