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非创伤性脑室内出血啮齿动物模型中的颅内压监测
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Intracranial Pressure Monitoring In Nontraumatic Intraventricular Hemorrhage Rodent Model

非创伤性脑室内出血啮齿动物模型中的颅内压监测

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08:18 min

February 08, 2022

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08:18 min
February 08, 2022

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该方案描述了一种测量啮齿动物非创伤性脑室内出血后颅内压、平均动脉压和脑灌注压的方法。通过分别插入大鼠皮层和股动脉的光纤传感器,可以准确可靠地测量颅内压和平均动脉压。当脑室内出血患者需要有创颅内压监测时,此处描述的技术已转化为临床环境。

本研究的目标是建立一个IVH动物模型,客观监测脑室内IVH后的ICP,MAP和CCP,以便作者可以在未来的实验中进一步应用,重点关注IVH诱导的ICP对后续记忆功能障碍的影响。主要困难可能包括精度,因为光纤传感器很小。股动脉夹层也可能对某些人构成挑战,特别是那些未用于显微外科技能的人。

麻醉大鼠后,插入直肠温度计以连续监测温度。在手术前夹住头部和股骨区域的头发,并用三种Betadine和70%酒精的交替磨砂膏准备皮肤。通过暂时将大鼠从呼吸机中取出并用连接到 10 毫升注射器的 PE-50 管吸出分泌物来吸出任何积聚的呼吸道分泌物。

用无菌人工泪液眼膏保护眼睛。在头皮切口之前,将局部布比卡因注射到皮肤和皮下组织中。将大鼠置于立体定向框架上的俯卧位置并用耳杆固定。

用 15 刀片手术刀沿中线切开 1.5 厘米的头皮切口。用纱布轻轻按压止血。使用无菌棉尖涂抹器,将骨膜与颅骨分开,直到可见前臼标志。

使用立体定位并标记前胝骨,并在前胝侧 1.4 毫米和后侧负 0.9 毫米处标记出两个双侧毛刺孔的位置。使用手持式钻头,在左右半球创建这两个小的颅毛孔。用无菌乳酸林格氏溶液冲洗任何多余的骨屑。

在右半球,将 22 号导引套管放置在毛刺孔水平,将 28 号针穿过套管插入右侧心室深处,以产生脑室内出血。将光纤压力传感器连接到读数单元。打开读数单元,并确保所选单位以毫米汞柱为单位。

然后,通过将传感器尖端浸入装有乳酸林格氏溶液的小烧杯中来启动传感器,直到读数单元读出零并可以使用。在左半球,将压力传感器轻轻插入皮层两到三毫米的深度,以实时监测ICP。插入ICP监视器后,转动大鼠的下躯干,以便于进入左大腿和腹股沟区域。

无菌制备和局部布比卡因给药后,用 15 刀片手术刀在后肢上做一个 1.5 厘米的皮肤切口。用止血器浅表解剖左股动脉,然后在显微镜下用细尖的镊子解剖更深的层。识别深蓝色股静脉以帮助定位邻近动脉。

使用 3-0 丝线绑住股动脉远端,并在股动脉近端放置一个临时金属夹。将第二个光纤压力传感器连接到已经启动的读数单元。将压力传感器插入PE-50管中,PE-50管插入Tuohy Borst,然后关闭。

将 Tuohy Borst 连接到三通旋塞阀,一端连接到 1 毫米注射器,另一端连接到带有 PE-50 管的 22 号针头。在显微镜下,用微型剪刀进行两毫米的股动脉切开术,并用连接到其余装置的PE-50管插管。使用一毫米注射器吸出 500 微升血液,然后转动三向旋塞阀,让压力传感器读取 MAP。

将连接到PE-50管的28号脑室内针头与IVH动物的吸血和载体对照动物的乳酸林格氏一起启动。然后将该针插入引导套管至右侧心室深处。使用每分钟100微升的速度,通过用拇指泵送1毫米注射器,将血液或200微升无菌乳酸林格氏溶液注射到右侧心室。

监测和记录 ICP、动脉血压和直肠温度。监控并记录注射后的 ICP 和 MAP 值。完成脑室内注射后,取出插入股动脉的装有压力传感器的PE-50管,并将临时夹子敷在股动脉上以防止出血。

使用 3-0 丝线绑住股动脉的近端部分,并使用 3-0 丝线以中断方式关闭股动脉切口。在ICP监视器中用心室内针移除引导套管。用骨蜡密封毛刺孔。

并用3-0丝线中断关闭颅切口。在切口处应用局部布比卡因,每公斤卡洛芬注射0.5毫克。在动物恢复足够的意识以维持胸骨卧位之前,不要让它们无人看管。

让大鼠在手术后在监督下完全康复,并在康复后将它们送回家中的笼子,并免费获得食物和水。排除假手术组,IVH和载体对照组脑室内注射期间ICP显著增加。与车辆控制相比,IVH组的ICP更高。

然后,在这些动物组中,ICP在脑室内注射后五分钟内迅速下降并恢复正常。观察到MAP在整个过程中保持相似,而CPP在脑室内注射血液或乳酸林格氏溶液时减少。手术的重要步骤包括正确定位和钻孔和股动脉切开术。

应严格遵守上述步骤,以确保传感器准确读取压力变化。

Summary

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监测非创伤性脑室内出血啮齿动物模型中的颅内压在目前的文献中并不常见。在本文中,我们展示了一种在大鼠动物模型中测量脑室内出血期间颅内压、平均动脉压和脑灌注压的技术。

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